生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物奧曲肽對(duì)實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管的b-FGF和TGF-β的調(diào)控作用.pdf

1、目的：通過(guò)觀察生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物奧曲肽在實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管(CNV)動(dòng)物模型中對(duì)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b-FGF)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)的調(diào)控作用，研究奧曲肽對(duì)脈絡(luò)膜新生血管的抑制作用。 方法：激光建立C57BL/6小鼠CNV模型，建模后7d、14d、21d和28d為觀察時(shí)間點(diǎn)。135只C57BL/6小鼠中3只為正常對(duì)照，132只用于實(shí)驗(yàn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各3只作為疾病對(duì)照，余120只作為治療組分為PO組和P7組：激光制作CNV

2、模型當(dāng)天開(kāi)始用藥為PO組，光凝后7天開(kāi)始用藥為P7組。PO組和P7組又各分為3組：?jiǎn)渭兤は伦⑸浣M、單純球后注射組和皮下+球后聯(lián)合注射組，每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各5只小鼠。皮下注射和球后注射奧曲肽的劑量均為501μg/Kg體重，1次/d，連用14天。分別于激光照射后7d、14d、21d和28d處死小鼠，摘除眼球，行HE染色，采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)不同注藥方式視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜中b-FGF和TGF-βmRNA的變化，分析表達(dá)

3、強(qiáng)度，計(jì)算相對(duì)系數(shù)：相對(duì)系數(shù)(％)=標(biāo)志物表達(dá)強(qiáng)度/β-actin表達(dá)強(qiáng)度。數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，采用兩樣本t檢驗(yàn)。P<0.05，差異有顯著性；P<0.01，差異有極顯著性。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)用鼠132只，造模成功117只。造影結(jié)果顯示，疾病對(duì)照組照射7d、2w和3w時(shí)，可見(jiàn)大部分光凝斑處有熒光滲漏，呈片狀，隨時(shí)間延長(zhǎng)，熒光范圍增大，亮度增強(qiáng)，證實(shí)有CNV形成。HE染色顯示，疾病對(duì)照組激光光凝術(shù)后7d，光凝斑處色素紊亂

4、、缺失，脈絡(luò)膜增厚，Bruch膜中斷，視網(wǎng)膜色素上皮層下可見(jiàn)新生血管，提示CNV形成。 RT-PCR檢查結(jié)果顯示，視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜組織中均有b-FGF和TGF-βmRNA的表達(dá)。 PO組單純皮下用藥早期不能抑制b-FGF增加，晚期b-FGF的陽(yáng)性表達(dá)明顯減少。球后注射和聯(lián)合用藥早期能抑制CNV膜中b-FGF的陽(yáng)性表達(dá)。P7組皮下注射奧曲肽不能有效抑制CNV中b-FGF陽(yáng)性表達(dá)。球后注射和聯(lián)合用藥均能抑制CNV膜中b-FGF

5、的陽(yáng)性表達(dá)。 PO組和P7組3種用藥方式均能顯著抑制CNV膜中TGF-β的陽(yáng)性表達(dá)，抑制作用最強(qiáng)的用藥方式為：PO組聯(lián)合用藥，P7組球后注射。早期的抑制作用較弱，逐漸增強(qiáng)，觀察期末TGF-β呈低水平穩(wěn)定表達(dá)。 同一觀察時(shí)間點(diǎn)、同一給藥方式(球后注射、聯(lián)合用藥)，給藥時(shí)間不同(PO組和P7組)對(duì)b-FGF和TGF-β的陽(yáng)性表達(dá)未產(chǎn)生顯著影響。 結(jié)論：應(yīng)用高強(qiáng)度、小光斑、短曝光時(shí)間的半導(dǎo)體激光光凝視網(wǎng)膜，可

6、誘導(dǎo)C57BL/6小鼠CNV發(fā)生。 RT-PCR檢測(cè)CNV小鼠模型脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜組織中有b-FGF和TGF-βmRNA的表達(dá)，證實(shí)b-FGF和TGF-β參與CNV的形成。 全身及局部或眼局部使用生長(zhǎng)抑素類(lèi)似物奧曲肽能有效抑制C57BL/6小鼠CNV膜中b-FGF和TGF-β的陽(yáng)性表達(dá)，聯(lián)合用藥效果優(yōu)于單純局部用藥。 在CNV形成早期使用奧曲肽能夠有效抑制CNV膜中b-FGF和TGF-β的陽(yáng)性表達(dá)。