生長抑素類似物奧曲肽對實驗性脈絡(luò)膜新生血管的治療研究.pdf

1、山東大學博士學位論文生長抑素類似物奧曲肽對實驗性脈絡(luò)膜新生血管的治療研究姓名：曲毅申請學位級別：博士專業(yè)：眼科學指導教師：李鏡海20050101山東人學博士學位論文生長抑素類似物奧曲肽對實驗性脈絡(luò)膜新生血管的治療研究博士生姓名專業(yè)博士生導師曲毅眼科學李鏡海教授中文摘要目的：通過觀察生長抑素類似物奧曲肽在實驗性脈絡(luò)膜新生血管(CNV)動物模型中對胰島素樣生長因子一1和血管內(nèi)皮生長因子的調(diào)控作用，以及對視網(wǎng)膜色素上皮細胞(RPE)的超微結(jié)構(gòu)

2、的影響，研究奧曲肽對脈絡(luò)膜新生血管的抑制作用。方法：C57BL／6小鼠腹腔注射氯胺酮50mg／Kg麻醉妥后，美多麗散瞳，使用532nm半導體激光，經(jīng)裂隙燈通過三面鏡聚焦于視網(wǎng)膜，激光功率150mW，光斑直徑100gm，曝光時間O1s，圍繞視盤距視盤IPD擊射lO個點，建立小鼠CNV模型。術(shù)后7d、14d、21d和28d為觀察時間點。78只C57BL／6小鼠中2只為正常對照，每個時問點各1只作為疾病對照，72只作為治療組分為P0組和P7組

3、。激光制作CNV模型當天丌始用藥為PO絹，光凝后7天丌始用藥為P7組。P0組和P7組又各分為3組：單純皮F注射組、單純球后注射組和皮下注射球后注射組，每組每個時問點各3只。皮F注射和球后注別奧曲肽的劑量均為50peCke體重，1次／d，連用14天。分別于激光照射后7d、14d、2ld和28d處死小鼠，立即摘除眼球，行HE染色和免疫組化染色。切片做圖像分析，測量CNV膜面積，比較CNV膜中IGF1和VEGF陽性表達的變化。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶

4、鏈反應(RTPCR)檢測不同時間點不同注藥方式IGF一1和VEGFmRNA的變化，分析表達強度，計算相對系數(shù)。Westernblotting檢測在RPE、視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜組織中IGF—l和VEGF蛋白的表達。比較激光術(shù)后21d疾病對照組和聯(lián)合用藥組RPE細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。數(shù)據(jù)經(jīng)SPSSl20統(tǒng)計學軟件處理，采用單因素方差分析及q檢驗(Newman—Keuls法)，均數(shù)問兩兩比較采用霞檢驗。P005，差異有顯著性；P0Ol，差異有極顯著性