貴州黑山羊瘤胃溶纖維丁酸弧菌分離鑒定.pdf

1、目的：共軛亞油酸（Conjugated Linoleic Acid，CLA）對人體健康有諸多益處，大量研究表明天然CLA主要來源于反芻動(dòng)物產(chǎn)品，而反芻動(dòng)物瘤胃溶纖維丁酸弧菌是合成CLA的主要菌株。因此，通過開展貴州黑山羊瘤胃中溶纖維丁酸弧菌的分離鑒定等試驗(yàn)研究，為后續(xù)進(jìn)一步在菌株細(xì)胞水平深入研究和系統(tǒng)闡明CLA生物合成機(jī)制，以及開發(fā)利用貴州黑山羊瘤胃溶纖維丁酸弧菌奠定基礎(chǔ)。
　　方法：以貴州黑山羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，通過安裝瘤胃瘺管，活體

2、采集瘤胃液，采用現(xiàn)代分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)手段開展貴州黑山羊瘤胃溶纖維丁酸弧菌分離與鑒定等相關(guān)研究。
　　結(jié)果：（1）給6只貴州黑山羊成功安裝了改良瘤胃瘺管；（2）經(jīng)過革蘭氏染色、形態(tài)觀察、16S rRNA序列分析和系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建后，1株菌鑒定為溶纖維丁酸弧菌，其16S rRNA GenBank登錄號為X8997.1；革蘭氏染色陰性，菌體呈彎曲桿狀，有錐形端，菌落顏色為乳白色，菌落形狀為圓形，半透明的粘稠菌落；在30℃~37℃和pH7.

3、0環(huán)境下生長良好，硝酸鹽不還原、產(chǎn)硫化氫陰性、觸媒反應(yīng)陰性但具有運(yùn)動(dòng)性等生理生化特征；（3）活體瘤胃灌注亞油酸（Linoleic Acid，LA）能促進(jìn)貴州黑山羊瘤胃溶纖維丁酸弧菌增殖，增加瘤胃共軛亞油酸（c9t11-CLA and t10c12-CLA）和反-11-油酸（t11-C18∶1，簡稱TVA）含量，提高亞油酸異構(gòu)酶濃度。
　　結(jié)論：瘤胃溶纖維丁酸弧菌常與其他厭氧菌處于伴生狀態(tài)，極難分離純化；連續(xù)3天灌注30mL食品級L