基于Notch信號(hào)通路探討電針對(duì)腦缺血神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制.pdf

1、目的:基于Notch信號(hào)通路探討電針曲池、足三里對(duì)大腦中動(dòng)脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)大鼠發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。
　　方法:將96只SPF級(jí)健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組，模型組，電針組。參照ZeaLonga法，制備大鼠大腦中動(dòng)脈腦缺血再灌注模型。動(dòng)物模型成功后，手術(shù)第二天開始實(shí)施干預(yù)，電針組穴位取患側(cè)曲池、足三里，應(yīng)用G6805電針儀，電壓峰值為6V，疏密波，頻率1～20H

2、z，以肢體輕輕抖動(dòng)為度，每次電針30min，1次/天。假手術(shù)組及模型組，不予任何治療。連續(xù)干預(yù)3天后處死。采用Zea-Longa評(píng)價(jià)法評(píng)估各組神經(jīng)功能。采用動(dòng)物自然行為智能分析系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)大鼠24h行為變化;TIC染色觀察腦梗死情況、計(jì)算腦梗死體積;HE染色觀察腦缺血皮質(zhì)區(qū)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;免疫組化觀察腦缺血皮質(zhì)區(qū)的細(xì)胞增殖;免疫印跡法檢測(cè)腦缺血皮質(zhì)區(qū)中Notch通路信號(hào)分子Notch1、NICD、Hes1的蛋白表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR

3、檢測(cè)腦缺血皮質(zhì)區(qū)中Notch1、Hes1基因的相對(duì)表達(dá)量;免疫熒光觀察腦缺血皮質(zhì)區(qū)的細(xì)胞分化變化。
　　結(jié)果:腦缺血再灌注3天，與模型組相比，電針組大鼠神經(jīng)功能顯著改善(P＜0.01);各組大鼠伸展、飲水、進(jìn)食、嗅的活動(dòng)時(shí)間無顯著性差異(p＞0.05），與假手術(shù)組比較，模型組大鼠轉(zhuǎn)身、行走、整飾、睡覺的時(shí)間出現(xiàn)了明顯變化(p＜0.05)，電針組大鼠僅行走的時(shí)間發(fā)生了明顯改變(p＜0.05)，而與模型組比較，電針組大鼠睡眠的時(shí)間有顯

4、著性差異(p＜0.05);電針組大鼠的腦梗死體積明顯減少(P＜0.01);電針組可減輕腦缺血皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞損傷;電針組能促進(jìn)腦缺血皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞的增殖;電針組可明顯提高Notch信號(hào)通路上信號(hào)分子Notch1、NICD、Hes1蛋白的表達(dá);電針組可明顯提高Notch信號(hào)通路上信號(hào)分子Notch1、Hes1基因的相對(duì)表達(dá)量;電針組可調(diào)控內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖分化。
　　結(jié)論:電針曲池、足三里能有效改善腦缺血大鼠神經(jīng)功能障礙及肢體行為活動(dòng)、減