ID4對沉默SOX2之后的腫瘤復發(fā)的影響.pdf

1、目前，惡性腫瘤已成為嚴重威脅人類健康的重要疾病之一。越來越多的研究表明，轉錄因子SOX2在腫瘤的發(fā)生與發(fā)展過程中起著十分重要的作用。前期的研究結果表明，沉默SOX2基因的表達雖然能夠有效抑制荷瘤小鼠中肺癌的發(fā)生與發(fā)展，但是仍然有一部分小鼠出現(xiàn)腫瘤復發(fā)的現(xiàn)象。本研究擬探討SOX2負向調控的原癌基因，并明確其在沉默SOX2后腫瘤復發(fā)中的作用。
　　 在利用RNA-seq技術對沉默SOX2之后的基因表達譜的改變進行分析后，挑選了12個

2、候選靶基因，并對它們的表達水平進行了mRNA水平上的確認。通過對基因功能的分析，從中挑選出轉錄因子ID4作為進一步研究對象。在構建了沉默SOX2之后繼而誘導沉默ID4表達的MCF7細胞系后，進一步檢測了同時沉默SOX2和ID4對該細胞系轉移、增殖、凋亡能力的影響。通過免疫組化方法檢測了人乳腺癌組織芯片的196例組織標本，并對其中ID4的表達進行了統(tǒng)計學分析，同時也分析了SOX2與ID4表達的相關性。
　　 首先確認了12個候選靶

3、基因在mRNA水平上都是隨著SOX2表達的降低而升高。在迸一步的分析中發(fā)現(xiàn)在蛋白水平上，ID4的表達與SOX2也呈現(xiàn)出負相關。構建了沉默SOX2和誘導沉默ID4的穩(wěn)定細胞系之后發(fā)現(xiàn)，在沉默SOX2的基礎上，沉默ID4的表達能抑制腫瘤細胞的增殖伴隨著增殖標記蛋白Ki67的表達降低。同時也發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定細胞系的轉移能力也明顯降低。通過檢測細胞中凋亡蛋白cleaved caspase3的表達，發(fā)現(xiàn)其增強了細胞對化療藥物的敏感性，Annexin V/