復方丹參滴丸及主要成分對阿司匹林酯酶活性的影響.pdf

1、目的:阿司匹林為臨床常用的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎藥,經(jīng)研究證實小劑量阿司匹林能不可逆地抑制血小板內(nèi)的環(huán)氧化酶(COX)而發(fā)揮抗血小板聚集作用。但是,阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)使得應用阿司匹林治療的相當一部分患者在服用阿司匹林后并不能充分地抑制血小板聚集,限制了其應用。阿司匹林口服吸收后可被血漿、紅細胞、胃黏膜及肝臟中的阿司匹林酯酶(乙酰水楊酸酯酶)水解為水楊酸而失去抗凝活性,因此阿司匹林的藥理作用和阿司匹林抵抗

2、現(xiàn)象都可能與人體內(nèi)阿司匹林酯酶的活性相關(guān)。文獻曾見報道復方丹參滴丸與阿司匹林聯(lián)合應用能減少阿司匹林抵抗現(xiàn)象的發(fā)生。本研究的目的是探討復方丹參滴丸及主要成分是否影響人血漿阿司匹林酯酶的活性,探明復方丹參滴丸減少阿司匹林抵抗現(xiàn)象是否與阿司匹林酯酶活性變化有關(guān),為臨床合理應用阿司匹林與復方丹參滴丸提供依據(jù);正交試驗法優(yōu)化大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶的體外培養(yǎng)方法及大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶活性的測定方法;研究大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯

3、酶酶動力學特性;探討復方丹參滴丸的主要成分對大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶酶促動力學參數(shù)的影響,豐富阿司匹林酯酶的研究。
　　 方法:采用RP-HPLC法同時測定血漿(或大鼠肝微粒體)中阿司匹林和水楊酸的濃度,以阿司匹林與水楊酸的比值CSA/C(ASA+SA)表示阿司匹林酯酶的活性,并用正交試驗法對人血漿和大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶的體外培養(yǎng)條件進行優(yōu)化選擇;通過體外培養(yǎng)對大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶的酶動力學特性(最適反

4、應溫度、最適pH值等)進行研究;在培養(yǎng)體系中加入復方丹參滴丸及主要成分,與空白對照(不加復方丹參滴丸及主要成分)比較測定阿司匹林酯酶的活性變化,考察復方丹參滴丸及主要成分對人血漿阿司匹林酯酶活性及大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶的酶動力學參數(shù)的影響。
　　 結(jié)果:建立的同時測定血漿中或大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林和水楊酸濃度的RP-HPLC可很好的滿足實驗要求。利用正交實驗設(shè)計對人血漿體外培養(yǎng)條件優(yōu)化選擇得出的最佳培養(yǎng)條件是A2B2

5、C3D1,即以1mmol·L-1阿司匹林,200μL血漿,在pH為7.4的培養(yǎng)液中培養(yǎng)20min。利用正交試驗設(shè)計對大鼠肝微粒體勻漿體外培養(yǎng)條件優(yōu)化選擇得出的最佳培養(yǎng)條件是A1B3C1D3,即以0.8mmol·L-1阿司匹林,100μL大鼠肝微粒體勻漿,在pH為7.4的培養(yǎng)液中培養(yǎng)40min。阿司匹林酯酶對pH的變化較敏感,對熱極不穩(wěn)定。該酶的米氏常數(shù)Km=4.42mmol·L-1和Vmax=0.736 mmol·min-1·mL-1。

6、(大鼠肝微粒體勻漿)。研究顯示復方丹參滴丸對人血漿阿司匹林酯酶的活性沒有顯著的影響(P＞0.05);實驗用量的復方丹參滴丸中主要成分(丹參素鈉、丹參酮Ⅰ、丹參酮Ⅱ A、隱丹參酮、原兒茶醛、原兒茶酸、丹酚酸A、丹酚酸B、冰片、人參皂苷Rgl、三七皂苷R1)對阿司匹林酯酶的活性影響不顯著,無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。丹參素鈉對大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶有誘導作用,隱丹參酮對大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶有一定的抑制作用(P＜0.05)

7、,其他成分對大鼠肝微粒體勻漿中阿司匹林酯酶影響不顯著(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:通過對大鼠肝微粒體勻漿中的阿司匹林酯酶活性的測定發(fā)現(xiàn)阿司匹林酯酶活性對pH值的變化較敏感,且對熱不穩(wěn)定。臨床上經(jīng)常與阿司匹林合并使用的復方丹參滴丸對阿司匹林酯酶活性無顯著性影響,而單一成分丹參素鈉具有較顯著的增強作用、隱丹參酮產(chǎn)生較顯著的抑制作用,因此同時服用含有較高劑量的丹參素鈉、隱丹參酮的藥物時應該注意用量,盡量做到用藥個體化,以達到臨床合理