頭穴透刺對(duì)急性腦缺血大鼠內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化影響的研究.pdf

1、目的：
　　 腦血管疾病具有發(fā)病率、致殘率與病死率均高的特點(diǎn)，其中缺血性腦血管疾病最為常見(jiàn)。大量的臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，頭穴透刺治療本病具有較好的療效。腦梗死常造成患者神經(jīng)功能喪失，神經(jīng)元死亡不可避免，如何積極有效地促進(jìn)腦梗死造成神經(jīng)功能缺失的恢復(fù)，是目前研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)采用改良線栓法制作大鼠局灶性腦缺血模型，運(yùn)用頭穴透刺治療，并對(duì)大鼠神經(jīng)功能缺損進(jìn)行評(píng)分，從內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化方面探討頭穴透刺抗腦缺血損傷的作用機(jī)理。<

2、br>　　 方法：
　　 選用雄性SD大鼠64只，體重200～250g，隨機(jī)分為4組，即正常組、假手術(shù)組、腦缺血組與頭穴透刺組，每組各16只。采用改良線栓法復(fù)制大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞局灶性腦缺血模型，頭穴透刺組在造模成功，待動(dòng)物模型清醒后1h，采用針刺治療，取百會(huì)透前頂、率谷透懸厘，接通G6805-Ⅱ型電針治療儀，選用疏密波，強(qiáng)度為1mA，頻率為2～15Hz，留針30min，每日治療1次，連續(xù)治療7日后，對(duì)大鼠神經(jīng)功能缺損進(jìn)行評(píng)分

3、，運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)海馬齒狀回(HDG)神經(jīng)巢蛋白(Nestin)，RT-PCR檢測(cè)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)mRNA、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.大鼠經(jīng)栓塞右側(cè)大腦中動(dòng)脈造成腦缺血后，均出現(xiàn)不同程度的行為異常，表現(xiàn)為不能完全伸展左側(cè)前爪，或出現(xiàn)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈、傾倒等現(xiàn)象，表明造模成功。頭穴透刺組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分明顯改善。與腦缺血組比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，有極顯著性差異(t=3.

4、99，P＜0.01)。
　　 2.腦缺血組大鼠海馬齒狀回Nestin表達(dá)較正常組和假手術(shù)組明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬齒狀回Nestin表達(dá)增加；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬齒狀回Nestin陽(yáng)性表達(dá)明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 3.腦缺血組大鼠海馬GFAP mRNA表達(dá)較正常組和假手術(shù)組明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，具有極顯著性差異

5、(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬GFAP mRNA表達(dá)增加；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬GFAP mRNA表達(dá)明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 4.腦缺血組大鼠海馬NSE mRNA表達(dá)較正常組和假手術(shù)組明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，具有極顯著性差異(P＜0.01)，提示模型大鼠腦缺血后，海馬NSE mRNA表達(dá)減少；與腦缺血組比較，頭穴透刺組海馬NSE mRNA表達(dá)明顯增加，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，

6、具有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.急性腦缺血后，大鼠海馬齒狀回Nestin表達(dá)增加，海馬GFAP mRNA表達(dá)明顯增加，海馬NSE mRNA表達(dá)明顯減少，表明Nestin、GFAP mRNA、NSE mRNA參與了急性腦缺血的病理過(guò)程。
　　 2.頭穴透刺可使急性腦缺血模型大鼠受損神經(jīng)功能明顯恢復(fù)，提示本法有顯著抗腦缺血損傷的作用。
　　 3.頭穴透刺能使腦缺血大鼠海馬齒狀回Ne