GDNF基因修飾的神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠局灶性腦缺血神經(jīng)干細(xì)胞增殖和星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:探討膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-derived neuralfactor,GDNF)基因修飾的神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)移植對(duì)大鼠腦缺血后神經(jīng)干細(xì)胞增殖與星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響。方法:建立大鼠暫時(shí)性大腦中動(dòng)脈梗塞模型(middle cerebral arteryocclusion,MCAO),并將其隨機(jī)分為:生理鹽水移植組(NS)、神經(jīng)干細(xì)胞移植組(NSCs)和GDNF基因修飾

2、的神經(jīng)干細(xì)胞移植組(GDNF/NSCs)。再將各組按照再灌注時(shí)間不同分為5個(gè)亞組(1W、2W、3W、5W、7W,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠)。再灌注3d采用腦立體定位儀將移植物植入大鼠的右側(cè)腦室。再灌注不同時(shí)間點(diǎn)(1W、2W、3W、5W、7W,其中免疫組化和免疫印跡各3只大鼠)處死大鼠,取同側(cè)大腦半球,通過免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)的方法,用nestin抗體觀察神經(jīng)干細(xì)胞的增殖,用免疫印跡(Westernb

3、lotting)的方法,用GFAP抗體觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。結(jié)果:1、各實(shí)驗(yàn)組的Nestin陽性細(xì)胞主要分布于缺血側(cè)的額頂皮質(zhì)、紋狀體、海馬部位。2、Nestin陽性細(xì)胞統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明:GDNF/NSCs、NSCs組Nestin陽性細(xì)胞數(shù)1w最低,3w達(dá)高峰,后逐漸下降。NS組Nestin陽性細(xì)胞數(shù)1w最高,后逐漸下降。而再灌注1-7w,GDNF/NSCs組、NSCs組Nestin陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于NS組(P<0.05),而再灌注2w、

4、3w,GDNF/NSCs組Nestin陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于NSCs組(P<0.05)。3、GDNF/NSCs組、NSCs組和NS組GFAP蛋白均在2w達(dá)到高峰,后逐漸降低。而再灌注1-7w,GDNF/NSCs組的GFAP蛋白顯著高于NS組(P<0.05)；GDNF/NSCs組GFAP蛋白顯著高于NSCs組(P<0.05)。再灌注1-5w,NSCs組GFAP蛋白顯著高于NS組(P<0.05)。結(jié)論:GDNF/NSCs移植治療大鼠缺血再灌注的