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文檔簡介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)是以《金匱要略·腹?jié)M寒疝宿食病脈證第十》中的赤丸方為基礎(chǔ)、參考現(xiàn)代藥理研究結(jié)論、結(jié)合導(dǎo)師臨床體會(huì)、從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)入手,觀察、研究赤丸方中的藥物,在經(jīng)過60min的煎煮減毒處理后,是否仍會(huì)對(duì)Wister大鼠的腎臟產(chǎn)生慢性毒性以及其慢性毒性的程度;采集可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)、提供可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為臨床選方用藥提供參考,并為進(jìn)一步揭示其腎臟毒性機(jī)制、避免其腎臟毒性反應(yīng)打下基礎(chǔ)。
方法:清潔級(jí)純系Wister大鼠80只,體重200±1
2、0克,雌雄各半,分別用隨機(jī)區(qū)組法分為4組(空白對(duì)照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組),每組20只,雌雄各半;給各組大鼠稱量體重并對(duì)體重值做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,在統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示各組大鼠體重的差值無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義后,將各組大鼠按各自組別適應(yīng)性喂養(yǎng)一周;適應(yīng)性喂養(yǎng)結(jié)束后再次稱量大鼠體重、計(jì)算各組大鼠一周的體重變化值,并分別作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理;在統(tǒng)計(jì)結(jié)果仍無顯著性差異的情況下,用剪尾采血法剪尾,采集各組大鼠的血液送檢其血液一般情況。于第二周開始,依據(jù)給藥標(biāo)準(zhǔn)、根
3、據(jù)大鼠體重、按照赤丸方中各藥的比例稱取各藥物;以水為溶劑、按照重浸提法的要求提取所稱量藥物的成份,用700W的額定功率對(duì)浸漬液進(jìn)行60min的煮沸減毒處理[事先測定該加熱功率下60min的蒸發(fā)量,準(zhǔn)確控制溶劑容量以保證加熱60min后所得溶液的濃度恰為200%(2g生藥/ml)];用煎煮所得的湯劑,按照等濃度不等容積的方法,以擬臨床用量60、30、10倍的藥量,分別給高、中、低劑量組大鼠按相應(yīng)劑量灌胃給藥并觀察其灌胃后反應(yīng)(空白組用涼開
4、水);每天定時(shí)灌胃1次,每周連續(xù)灌胃6次、測量體重1次、并隨體重變化調(diào)整給藥量,持續(xù)灌胃3個(gè)月;在末次灌胃結(jié)束24h后再次測量各組大鼠體重變化,用剪尾采血法采集各大鼠的血液標(biāo)本送檢其血液學(xué)一般情況;用心臟采血法,采集各組半數(shù)大鼠的血液標(biāo)本送檢其與腎功能相關(guān)的生化指標(biāo);剖取大鼠腎臟組織、制作組織標(biāo)本,在光鏡下觀察其腎臟組織形態(tài)學(xué)的改變。各組剩余大鼠繼續(xù)喂養(yǎng)3周,為觀察其可逆性情況和可能存在的遲發(fā)性毒性反應(yīng)做準(zhǔn)備;對(duì)各標(biāo)本的相關(guān)指標(biāo)值進(jìn)行統(tǒng)
5、計(jì)分析。
結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)各組大鼠體重增長所造成的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義:與空白組組相比:高劑量組體重表現(xiàn)出顯著性差異(P<0.01);與高劑量組體重變化相比:各組體重均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,P<0.05,P<0.01);與中劑量組體重相比:高劑量組體重有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與低劑量體重相比:高劑量組體重有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);2.實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)各組大鼠的血紅蛋白含量所造成的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);3.
6、實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)各組大鼠的紅細(xì)胞數(shù)值所造成的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);4.實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)各組大鼠的腎功能所造成的影響為:1)對(duì)尿素氮排泄的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);2)對(duì)肌酐排泄的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);3)對(duì)尿酸排泄的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);4.對(duì)各組大鼠腎臟的組織形態(tài)學(xué)未造成異常影響;5.不存在遲發(fā)性的腎臟毒性反應(yīng)。
結(jié)論:將赤丸方中各味藥物的水浸漬液進(jìn)行60min的煎煮減毒處理后所制成的濃度為2
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