輸尿管部分梗阻對(duì)腎臟功能及形態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分多普勒超聲測(cè)定輸尿管部分梗阻腎臟血流動(dòng)力學(xué)變化的意義 目的：測(cè)定輸尿管部分梗阻后腎臟的形態(tài)及血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，分析腎動(dòng)脈血流阻力指數(shù)(RI)對(duì)梗阻的診斷價(jià)值和對(duì)梗阻腎功能的預(yù)測(cè)價(jià)值。 方法：45只健康成年日本大耳白，雌雄不限。隨機(jī)選取10只進(jìn)行多普勒超聲檢查，測(cè)定腎盂的最大前后徑(APD)、橫徑(T)、長(zhǎng)徑(L)、腎皮質(zhì)厚度(RCT)、血流阻力指數(shù)(RI)等作為對(duì)照。然后將40只按照Cheng的方法制作右側(cè)輸尿管部

2、分梗阻模型，分別在梗阻后1、2、4、8周時(shí)隨機(jī)選取10只測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)，將其中4只解除梗阻，4周后再次測(cè)定。另5只作假手術(shù)對(duì)照，1周后進(jìn)行檢查。根據(jù)測(cè)定值計(jì)算腎盂容積(V)、雙側(cè)RI差值(△RI)和雙側(cè)RI比率(RIR)。 結(jié)論：輸尿管部分梗阻后腎臟的血流明顯減慢，腎臟的血流動(dòng)力學(xué)改變可反映腎臟的功能狀態(tài)，作為腎功能的評(píng)估指標(biāo)有一定實(shí)用意義。血流阻力指數(shù)(RI)是一個(gè)時(shí)間相關(guān)性生理參數(shù)，它與梗阻后腎臟形態(tài)及功能的改變呈平行關(guān)系，比

3、較雙側(cè)腎臟的RI值可顯著提高其診斷梗阻的準(zhǔn)確性。 第二部分多層螺旋CT灌注成像對(duì)梗阻性腎臟功能的評(píng)價(jià) 目的：探討多層螺旋CT(MSCT)灌注成像對(duì)積水腎臟功能的診斷價(jià)值，并與彩色多普勒超聲檢查結(jié)果進(jìn)行比較，分析二者間的相關(guān)性。 方法：10只健康成年日本大耳白，雌雄不限，在右側(cè)輸尿管部分梗阻模型制作前，應(yīng)用多普勒超聲及多層螺旋CT灌注成像進(jìn)行相關(guān)參數(shù)檢查；然后按Cheng的方法制作右側(cè)輸尿管部分梗阻模型，4周后再次

4、檢查。CT灌注成像對(duì)比劑用量為2ml/kg，注射速度為1ml/s。將二種方法所測(cè)梗阻前后的指標(biāo)進(jìn)行比較。 結(jié)果：輸尿管部分梗阻后4周，CT灌注成像可見腎盂擴(kuò)張，腎皮質(zhì)明顯變薄。皮質(zhì)及髓質(zhì)的腎血流量(BF)分別由892.58±62.74、192.24±96.48ml/100g/min降至467.66±111.27、14.84±7.62ml/100g/min(p＜0.01)；血容量(BV)分別由21.70±10.32，8.48±4.

5、68ml/100g降至12.17±2.34，4.07±5.29ml/100g(p＜0.01或＜0.05)；而對(duì)比劑的平均通過(guò)時(shí)間(MTT)無(wú)明顯變化。腎皮質(zhì)的表面通透性(PS)雖有所下降，但與梗阻前相比無(wú)顯著性差異(p＞0.05)；髓質(zhì)的PS則由梗阻前的94.04±18.70ml/100g/min顯著降至30.66±18.46ml/100g/min(p＜0.01)。多普勒超聲檢查顯示，梗阻后無(wú)論是腎動(dòng)脈還是腎內(nèi)動(dòng)脈的PSV及EDV均較梗

6、阻前顯著降低(p＜0.05或＜0.01)，PSV分別由37.76±9.86、33.57±7.16cm/s降至29.37±9.06、24.00±4.41cm/s；EDV分別由20.54±4.70、17.97±3.32cm/s降至12.15±4.00、11.12±3.17cm/s。梗阻后腎動(dòng)脈及腎內(nèi)動(dòng)脈RI顯著升高(p＜0.01)，分別由0.45±0.03、0.46±0.04上升至0.58±0.08、0.54±0.07。 結(jié)論：多層

7、螺旋CT灌注成像可以反映單位時(shí)間內(nèi)流經(jīng)腎臟的血流量及毛細(xì)血管開放量，間接反映腎小球的濾過(guò)量，所測(cè)量的腎功能與CDFI具有較高的一致性，可用作腎功能狀態(tài)的評(píng)定。 第三部分放射性核素腎掃描對(duì)梗阻后腎功能可復(fù)性的預(yù)測(cè)價(jià)值 目的：探討單側(cè)輸尿管部分梗阻及梗阻解除后的GFR變化規(guī)律，分析GFR預(yù)測(cè)腎臟功能恢復(fù)的價(jià)值，為臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：30只健康成年日本大耳白，隨機(jī)分為對(duì)照組6只、梗陽(yáng)組24只。對(duì)照組應(yīng)用SPE

8、CT檢查腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)和腎圖后，處死3只取腎靜脈血測(cè)定BUN、Cr,另3只作假手術(shù)對(duì)照，1周后再次檢查。梗阻組采用Cheng法制作右側(cè)輸尿管部分梗阻模型。在梗阻后1、2、4、8周，隨機(jī)分別選6只進(jìn)行SPECT檢查，嗣后處死3只留取腎靜脈血測(cè)定BUN和Cr，其余3只解除梗阻，4周后再次檢查。 結(jié)果：?jiǎn)蝹?cè)輸尿管部分梗阻后GFR進(jìn)行性下降，血BUN、Cr正常。梗阻1、2、4、8周時(shí)，梗阻腎GFR分別為29.25±5.57、27

9、.15±7.20、25.30±8.05、21.32±4.10ml/min，顯著低于正常對(duì)照組的60.62±8.14ml/min和假手術(shù)對(duì)照組的59.09±6.04ml/min(p＜0.01)；梗阻解除后4周雙腎GFR略有上升，梗阻腎GFT分別由26.40±2.94、22.57±7.51、18.97±4.91、21.93±3.17ml/min上升至28.37±5.68、25.13±5.56、20.77±2.02、21.27±5.59ml/

10、min。與梗阻解除前相比無(wú)顯著性改善(p＞0.05)。若以GFR＞10ml/min為標(biāo)準(zhǔn)，則2/3的梗阻腎臟在梗阻解除后4周有不同程度的恢復(fù)。 結(jié)論：輸尿管部分梗阻后GFR降低以早期最為顯著，梗阻解除后4周緩慢上升。當(dāng)梗阻腎的GFR＞10ml/min時(shí)，在梗阻解除后其功能有望恢復(fù)。 第四部分輸尿管部分梗阻腎臟AngⅡ、AT1R、AT2R及TGF-β1的免疫組織化學(xué)檢測(cè) 目的：測(cè)定單側(cè)輸尿管部分梗阻腎靜脈血中血管緊

11、張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)水平，探討梗阻腎臟組織中AngⅡ、AT1R、AT2R、TGF-β1及膠原蛋白的表達(dá)，分析其與腎小管間質(zhì)纖維化的關(guān)系，為今后梗阻腎小管間質(zhì)纖維化的逆轉(zhuǎn)提供理論依掘。 方法：測(cè)定第三部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腎靜脈血中的ACE水平，將其腎臟取出后常規(guī)進(jìn)行石蠟包埋切片，HE染色和Masson膠原染色評(píng)估輸尿管部分梗阻后腎臟的纖維化進(jìn)程。免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)AngⅡ、AT1R、AT2R及TGF-β1蛋白在腎臟組織中的表達(dá)情況，

12、應(yīng)用圖像分析技術(shù)測(cè)定蛋白表達(dá)的平均光密度值。 結(jié)果：ACE測(cè)定示：梗阻1、2、4、8周時(shí)分別為49.67±4.51，52.00±5.30，98.67±20.21，38.00±10.15U/L。梗阻2、4周時(shí)顯著高于正常對(duì)照組的34.67±6.66U/L和假手術(shù)組的39.00±2.65U/L(p＜0.05或＜0.01)。梗阻解除后4周，各組分別為33.67±4.04、30.67±4.73、28.33±1.53、27.00±9.16

13、U/L，各組與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(p＞0.05)。 輸尿管部分梗阻后腎臟切片HE染色可見：梗阻1周腎小管上皮水腫、擴(kuò)張；梗阻2周腎小管繼續(xù)擴(kuò)張，髓質(zhì)內(nèi)可見纖維組織增生，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；梗阻4周腎小管進(jìn)一步擴(kuò)張呈囊性，部分腎小管開始萎縮，腎小管上皮變?yōu)楸馄綘睿I小球分葉尚保存，間質(zhì)纖維組織增生后小管間距離增寬；梗阻8周后出現(xiàn)腎小管、腎小球的萎縮，腎小球血管分葉體積變小，球囊增大，腎小管內(nèi)出現(xiàn)管型，間質(zhì)纖維組織增生明顯。梗阻解除后

14、4周各組病理改變無(wú)明顯進(jìn)步。 Masson膠原染色陽(yáng)性表達(dá)主要見于梗阻腎間質(zhì)細(xì)胞的胞漿，同時(shí)可見腎小管的基底膜有陽(yáng)性，隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)，腎小管間質(zhì)纖維化的程度越來(lái)越高。正常對(duì)照組平均光密度為0.2995±0.02，梗阻1、2、4、8周時(shí)的平均光密度分別為0.2969±0.04、0.3390±0.02、0.3424±0.04及0.3411±0.02。梗阻1周與正常對(duì)照組無(wú)顯著性差異；梗阻2周以后的平均光密度均顯著高于正常對(duì)照組(p

15、＜0.01)。各組皮質(zhì)和髓質(zhì)的平均光密度值無(wú)顯著差異(p＞0.05)。 免疫組化染色示：梗阻腎臟中AngⅡ與AT1R的表達(dá)相平行，隨梗阻時(shí)間延長(zhǎng)而進(jìn)行性增強(qiáng)，但梗阻1周時(shí)的表達(dá)與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(p＞0.05)；梗阻2周后與正常對(duì)照組相比差異顯著(p＜0.01)。梗阻8周后開始下降，但與梗阻4周相比無(wú)顯著性差異(p＞0.05)。正常對(duì)照組及不同梗阻組AngⅡ的平均光密度值分別為0.3851±0.01、0.3871±0.02、

16、0.4046±0.02、0.4352±0.03和0.4297±0.02。AT1R的平均光密度值分別為0.3984±0.02、0.3974±0.02、0.4240±0.03、0.4383±0.03和0.4282±0.03。AT2R的表達(dá)各組與對(duì)照組幾無(wú)差異(p＞0.05)，分別為0.3981±0.02、0.3967±0.03、0.3940±0.02、0.4160±0.02和0.4061±0.02。TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)見于梗阻腎間質(zhì)細(xì)胞的細(xì)