輸尿管部分梗阻對腎臟功能及形態(tài)影響的實驗研究.pdf

1、第一部分多普勒超聲測定輸尿管部分梗阻腎臟血流動力學變化的意義 目的：測定輸尿管部分梗阻后腎臟的形態(tài)及血流動力學參數(shù)，分析腎動脈血流阻力指數(shù)(RI)對梗阻的診斷價值和對梗阻腎功能的預測價值。 方法：45只健康成年日本大耳白，雌雄不限。隨機選取10只進行多普勒超聲檢查，測定腎盂的最大前后徑(APD)、橫徑(T)、長徑(L)、腎皮質厚度(RCT)、血流阻力指數(shù)(RI)等作為對照。然后將40只按照Cheng的方法制作右側輸尿管部

2、分梗阻模型，分別在梗阻后1、2、4、8周時隨機選取10只測定相應指標，將其中4只解除梗阻，4周后再次測定。另5只作假手術對照，1周后進行檢查。根據(jù)測定值計算腎盂容積(V)、雙側RI差值(△RI)和雙側RI比率(RIR)。 結論：輸尿管部分梗阻后腎臟的血流明顯減慢，腎臟的血流動力學改變可反映腎臟的功能狀態(tài)，作為腎功能的評估指標有一定實用意義。血流阻力指數(shù)(RI)是一個時間相關性生理參數(shù)，它與梗阻后腎臟形態(tài)及功能的改變呈平行關系，比

3、較雙側腎臟的RI值可顯著提高其診斷梗阻的準確性。 第二部分多層螺旋CT灌注成像對梗阻性腎臟功能的評價 目的：探討多層螺旋CT(MSCT)灌注成像對積水腎臟功能的診斷價值，并與彩色多普勒超聲檢查結果進行比較，分析二者間的相關性。 方法：10只健康成年日本大耳白，雌雄不限，在右側輸尿管部分梗阻模型制作前，應用多普勒超聲及多層螺旋CT灌注成像進行相關參數(shù)檢查；然后按Cheng的方法制作右側輸尿管部分梗阻模型，4周后再次

4、檢查。CT灌注成像對比劑用量為2ml/kg，注射速度為1ml/s。將二種方法所測梗阻前后的指標進行比較。 結果：輸尿管部分梗阻后4周，CT灌注成像可見腎盂擴張，腎皮質明顯變薄。皮質及髓質的腎血流量(BF)分別由892.58±62.74、192.24±96.48ml/100g/min降至467.66±111.27、14.84±7.62ml/100g/min(p＜0.01)；血容量(BV)分別由21.70±10.32，8.48±4.

5、68ml/100g降至12.17±2.34，4.07±5.29ml/100g(p＜0.01或＜0.05)；而對比劑的平均通過時間(MTT)無明顯變化。腎皮質的表面通透性(PS)雖有所下降，但與梗阻前相比無顯著性差異(p＞0.05)；髓質的PS則由梗阻前的94.04±18.70ml/100g/min顯著降至30.66±18.46ml/100g/min(p＜0.01)。多普勒超聲檢查顯示，梗阻后無論是腎動脈還是腎內動脈的PSV及EDV均較梗

6、阻前顯著降低(p＜0.05或＜0.01)，PSV分別由37.76±9.86、33.57±7.16cm/s降至29.37±9.06、24.00±4.41cm/s；EDV分別由20.54±4.70、17.97±3.32cm/s降至12.15±4.00、11.12±3.17cm/s。梗阻后腎動脈及腎內動脈RI顯著升高(p＜0.01)，分別由0.45±0.03、0.46±0.04上升至0.58±0.08、0.54±0.07。 結論：多層

7、螺旋CT灌注成像可以反映單位時間內流經(jīng)腎臟的血流量及毛細血管開放量，間接反映腎小球的濾過量，所測量的腎功能與CDFI具有較高的一致性，可用作腎功能狀態(tài)的評定。 第三部分放射性核素腎掃描對梗阻后腎功能可復性的預測價值 目的：探討單側輸尿管部分梗阻及梗阻解除后的GFR變化規(guī)律，分析GFR預測腎臟功能恢復的價值，為臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：30只健康成年日本大耳白，隨機分為對照組6只、梗陽組24只。對照組應用SPE

8、CT檢查腎小球濾過率(GFR)和腎圖后，處死3只取腎靜脈血測定BUN、Cr,另3只作假手術對照，1周后再次檢查。梗阻組采用Cheng法制作右側輸尿管部分梗阻模型。在梗阻后1、2、4、8周，隨機分別選6只進行SPECT檢查，嗣后處死3只留取腎靜脈血測定BUN和Cr，其余3只解除梗阻，4周后再次檢查。 結果：單側輸尿管部分梗阻后GFR進行性下降，血BUN、Cr正常。梗阻1、2、4、8周時，梗阻腎GFR分別為29.25±5.57、27

9、.15±7.20、25.30±8.05、21.32±4.10ml/min，顯著低于正常對照組的60.62±8.14ml/min和假手術對照組的59.09±6.04ml/min(p＜0.01)；梗阻解除后4周雙腎GFR略有上升，梗阻腎GFT分別由26.40±2.94、22.57±7.51、18.97±4.91、21.93±3.17ml/min上升至28.37±5.68、25.13±5.56、20.77±2.02、21.27±5.59ml/

10、min。與梗阻解除前相比無顯著性改善(p＞0.05)。若以GFR＞10ml/min為標準，則2/3的梗阻腎臟在梗阻解除后4周有不同程度的恢復。 結論：輸尿管部分梗阻后GFR降低以早期最為顯著，梗阻解除后4周緩慢上升。當梗阻腎的GFR＞10ml/min時，在梗阻解除后其功能有望恢復。 第四部分輸尿管部分梗阻腎臟AngⅡ、AT1R、AT2R及TGF-β1的免疫組織化學檢測 目的：測定單側輸尿管部分梗阻腎靜脈血中血管緊

11、張素轉換酶(ACE)水平，探討梗阻腎臟組織中AngⅡ、AT1R、AT2R、TGF-β1及膠原蛋白的表達，分析其與腎小管間質纖維化的關系，為今后梗阻腎小管間質纖維化的逆轉提供理論依掘。 方法：測定第三部分實驗動物腎靜脈血中的ACE水平，將其腎臟取出后常規(guī)進行石蠟包埋切片，HE染色和Masson膠原染色評估輸尿管部分梗阻后腎臟的纖維化進程。免疫組織化學S-P法檢測AngⅡ、AT1R、AT2R及TGF-β1蛋白在腎臟組織中的表達情況，

12、應用圖像分析技術測定蛋白表達的平均光密度值。 結果：ACE測定示：梗阻1、2、4、8周時分別為49.67±4.51，52.00±5.30，98.67±20.21，38.00±10.15U/L。梗阻2、4周時顯著高于正常對照組的34.67±6.66U/L和假手術組的39.00±2.65U/L(p＜0.05或＜0.01)。梗阻解除后4周，各組分別為33.67±4.04、30.67±4.73、28.33±1.53、27.00±9.16

13、U/L，各組與對照組相比無顯著性差異(p＞0.05)。 輸尿管部分梗阻后腎臟切片HE染色可見：梗阻1周腎小管上皮水腫、擴張；梗阻2周腎小管繼續(xù)擴張，髓質內可見纖維組織增生，淋巴細胞浸潤；梗阻4周腎小管進一步擴張呈囊性，部分腎小管開始萎縮，腎小管上皮變?yōu)楸馄綘?，腎小球分葉尚保存，間質纖維組織增生后小管間距離增寬；梗阻8周后出現(xiàn)腎小管、腎小球的萎縮，腎小球血管分葉體積變小，球囊增大，腎小管內出現(xiàn)管型，間質纖維組織增生明顯。梗阻解除后

14、4周各組病理改變無明顯進步。 Masson膠原染色陽性表達主要見于梗阻腎間質細胞的胞漿，同時可見腎小管的基底膜有陽性，隨梗阻時間的延長，腎小管間質纖維化的程度越來越高。正常對照組平均光密度為0.2995±0.02，梗阻1、2、4、8周時的平均光密度分別為0.2969±0.04、0.3390±0.02、0.3424±0.04及0.3411±0.02。梗阻1周與正常對照組無顯著性差異；梗阻2周以后的平均光密度均顯著高于正常對照組(p

15、＜0.01)。各組皮質和髓質的平均光密度值無顯著差異(p＞0.05)。 免疫組化染色示：梗阻腎臟中AngⅡ與AT1R的表達相平行，隨梗阻時間延長而進行性增強，但梗阻1周時的表達與正常對照組無顯著差異(p＞0.05)；梗阻2周后與正常對照組相比差異顯著(p＜0.01)。梗阻8周后開始下降，但與梗阻4周相比無顯著性差異(p＞0.05)。正常對照組及不同梗阻組AngⅡ的平均光密度值分別為0.3851±0.01、0.3871±0.02、

16、0.4046±0.02、0.4352±0.03和0.4297±0.02。AT1R的平均光密度值分別為0.3984±0.02、0.3974±0.02、0.4240±0.03、0.4383±0.03和0.4282±0.03。AT2R的表達各組與對照組幾無差異(p＞0.05)，分別為0.3981±0.02、0.3967±0.03、0.3940±0.02、0.4160±0.02和0.4061±0.02。TGF-β1陽性表達見于梗阻腎間質細胞的細