褪黑素對單側(cè)輸尿管梗阻腎臟影響的實驗研究.pdf

1、【目的】探討褪黑素對腎盂輸尿管連接部梗阻腎組織的影響及意義。
　　【方法】成年新西蘭兔24只,雌雄不限,隨機(jī)分成3組(A、B、C),每組8只,A組為對照組(A組右側(cè)腎為正常對照A1,術(shù)側(cè)腎為手術(shù)對照A2),B組為手術(shù)組,C組為手術(shù)/藥物治療組,所有組均行開腹手術(shù)暴露左側(cè)腎盂輸尿管連接部,A組右側(cè)不做任何處理,左側(cè)行開腹手術(shù)暴露腎盂輸尿管連接部,B、C組在麻醉下,手術(shù)制作動物UPJO模型。造模成功后,給予清水和普通飼料喂養(yǎng),C組手術(shù)

2、前3天就開始給予褪黑素(0.3mg/kg.d),造模成功后一周穿刺取腎組織,H-E染色觀察梗阻側(cè)腎臟組織結(jié)構(gòu)病理變化并采用免疫組化檢測不同時間點TGFβ1、iNOs的表達(dá)情況,RT-PCR檢測各個時間點腎臟TGFβ1mRNA的表達(dá)情況。為進(jìn)一步確認(rèn)褪黑素對梗阻性腎臟的藥理作用,我們選取每組1、2、3號3只新西蘭兔,分別于2w、5w后再次穿刺取腎臟組織,RT-PCR檢查腎組織中TGFβ1mRNA的表達(dá)變化。
　　【結(jié)果】A組HE染色

3、鏡下見腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)均基本正常,腎皮質(zhì)和腎髓質(zhì)分界清楚,無纖維組織增生;B組HE染色鏡下可見腎小管擴(kuò)張,腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死、崩解,間質(zhì)可見纖維組織增生,大量炎癥細(xì)胞浸潤;C組HE染色鏡下見腎小管擴(kuò)張,間質(zhì)內(nèi)可見較少炎癥細(xì)胞浸潤,間質(zhì)纖維組織增生不明顯,但腎小管、腎小球結(jié)構(gòu)病變較B組輕;免疫組化結(jié)果:iNOS蛋白主要表達(dá)于腎臟皮質(zhì)和髓質(zhì)的近曲小管和遠(yuǎn)曲小管,B組表達(dá)明顯明顯高于A、C兩組(PAB<0.01,PBC<0.05),C

4、組高于A組(P<0.05);TGFβ1蛋白主要表達(dá)于腎間質(zhì),B組均明顯高于A、C組(PAB<0.01,PBC<0.05),C組表達(dá)均高于A組(P<0.05)。RT-PCR實驗結(jié)果:TGFβ1主要表達(dá)于腎間質(zhì),TGFβ1mRNA表達(dá)量隨著時間的增加而增加,B組均明顯高于A、C組(PAB<0.01,PBC<0.05),C組表達(dá)均高于A組(P<0.05)。
　　【結(jié)論】單側(cè)輸尿管梗阻后腎臟組織HE染色鏡下可見腎小管擴(kuò)張,腎小管上皮細(xì)胞變