解毒活血法對單側輸尿管梗阻大鼠炎癥細胞因子的影響.pdf

1、腎小管間質纖維化(tubular interstitial fibrosis，TIF)幾乎是各種慢性腎臟疾病進展為終末期腎衰竭的共同病變過程，以腎小管擴張或萎縮、間質炎癥細胞浸潤、成纖維細胞增殖、活化以及細胞外基質(extra cellular matrix，ECM)沉積等為病理特征。炎癥反應是TIF的始動環(huán)節(jié)之一并貫穿其始終，有效抑制炎癥反應對控制腎小管間質纖維化的發(fā)生發(fā)展有著重要意義。
　　目的：本研究采用單側輸尿管梗阻(un

2、ilateral ureteral obstruction，UUO)的方法建立腎小管間質纖維化模型，以纈沙坦為對照藥，通過觀察解毒活血法對大鼠腎臟組織病理形態(tài)學的改變，對血肌酐(serum creatinine，Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、白細胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis factor-α，TNF-α)及單核細胞趨化蛋

3、白-1(monoocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)的影響，探討其對UUO大鼠的保護作用及可能機制，為臨床治療提供實驗依據(jù)。
　　方法：健康雌性Sprague Dawley(SD)大鼠50只，隨機分為假手術組，模型組，纈沙坦組，解毒活血低劑量組，解毒活血高劑量組，每組10只，適應性喂養(yǎng)1周。第8天，除假手術組，其余各組結扎左側輸尿管復制UUO模型。所有大鼠灌胃給藥，纈沙坦組給予26mg生藥/

4、kg·d；解毒活血低劑量組予12g生藥/kg·d；解毒活血高劑量組予24g生藥/kg·d，容量均為1ml/100g，假手術組和模型組予等容量生理鹽水，每日1次，共14天。所有大鼠于第22天斷頭處死，常規(guī)制備血清，檢測血肌酐和血尿素氮。切取左腎，制備腎組織勻漿，放射免疫法檢測IL-1β；行HE、Masson染色，觀察腎組織病理形態(tài)學改變，免疫組化法檢測TNF-α和MCP-1。
　　結果：
　　1各組大鼠的一般情況
　　假

5、手術組大鼠的被毛、飲食、精神狀態(tài)、活動等無明顯改變。模型組大鼠的被毛蓬亂，飲食減少，精神萎靡，活動減少。各治療組大鼠的一般情況均好于模型組。
　　2各組大鼠血肌酐、血尿素氮的檢測結果
　　模型組大鼠的血肌酐(117.090±14.521μmol/L)、血尿素氮(9.689±0.570mmol/L)較假手術組(61.118±12.492，7.485±0.354)顯著升高(P＜0.01)，纈沙坦組、解毒活血高、低劑量組的血肌酐(

6、95.218±15.805，81.914±9.598，83.863±8.716)、血尿素氮(8.832±0.289，8.374±0.297，8.573±0.344)較模型組均明顯降低(P＜0.01)。
　　3各組大鼠的腎組織病理形態(tài)學改變
　　HE染色顯示：假手術組的腎小管上皮細胞排列整齊，無明顯異常改變。模型組的腎小管上皮細胞變性、壞死、脫落，腎小管擴張，間質大量炎癥細胞浸潤。纈沙坦組，解毒活血高、低劑量組的腎小管上皮細胞

7、變性、壞死及炎癥細胞浸潤程度均比模型組減輕。
　　Masson染色顯示：假手術組的間質有少量膠原成分的表達。模型組間質可見大量膠原沉積。纈沙坦組，解毒活血高、低劑量組的膠原沉積均比模型組顯著減少。
　　4各組大鼠腎組織TNF-α的免疫組化檢測結果
　　假手術組的腎小管上皮細胞有少量TNF-α的表達，呈淺黃色。與假手術組相比，模型組表達顯著增多，呈棕黃色。與模型組相比，纈沙坦組TNF-α的表達減少，呈淺黃色。解毒活血高、

8、低劑量組均比模型組明顯減少，呈淺黃色。
　　5各組大鼠腎組織MCP-1的免疫組化檢測結果
　　假手術組有極少量MCP-1的表達。與假手術組相比，模型組表達顯著增多，主要見于腎小管上皮細胞，呈棕黃色。與模型組相比，纈沙坦組MCP-1的表達減少，呈淺黃色。解毒活血高、低劑量組均比模型組明顯減少。
　　6各組大鼠腎組織IL-1β放射免疫法的檢測結果
　　模型組大鼠腎組織的IL-1β(144.510±14.462pg/m

9、l)表達水平較假手術組(107.640±14.657)顯著升高(P＜0.01)，纈沙坦組(130.590±9.803)、解毒活血低劑量組(127.420±11.274)較模型組均明顯降低(P＜0.05)，解毒活血高劑量組(124.580±12.060)較模型組顯著降低(P＜0.01)。
　　結論：
　　1解毒活血方藥具有顯著減輕腎小管間質纖維化大鼠腎組織結構的損傷，改善腎功能的作用。從實驗角度證實解毒活血方藥能明顯減輕腎小管