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文檔簡介
1、目的:探討intermedin(IMD)是否通過抑制氧化應(yīng)激效應(yīng)來緩解單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)后大鼠的腎臟纖維化。
方法:雄性Wistar大鼠,隨機分為5組:假手術(shù)組(sham組)、UUO模型組、UUO+IMD組、UUO+IMDshRNA組、UUO+空質(zhì)粒組。轉(zhuǎn)染組的UUO模型在質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后7d來制做,各組分別于術(shù)后1d、3d、7d、14d取6只,Masson染色來觀察腎臟纖維化的水平;化學(xué)熒光法檢測大鼠腎組織局部活性氧類(RO
2、S)物質(zhì)的表達(dá),比色法去檢測超氧化物歧化酶(SOD)的活性及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,real time RT-PCR檢測腎組織血紅素加氧酶-1(HO-1)的mRNA表達(dá),免疫組化法檢測其蛋白質(zhì)表達(dá)。
結(jié)果:Masson染色結(jié)果顯示,Sham組檢測各時間點腎組織無明顯纖維化表現(xiàn);UUO各組伴隨著梗阻時間延長而腎間質(zhì)纖維化進(jìn)行性加重;UUO+IMD組各時間點腎間質(zhì)纖維化程度較相應(yīng)UUO組明顯減輕(P<0.05);而UU
3、O+IMDshRNA組腎間質(zhì)纖維化程度較相應(yīng)UUO組更重(P<0.05);UUO+空質(zhì)粒組與UUO相比無明顯區(qū)別。與sham組相比, UUO組大鼠各檢測時間點腎組織ROS和MDA含量明顯增高(P<0.05)。UUO+IMD組較相應(yīng)時間點UUO組ROS和MDA含量明顯降低;而UUO+IMDshRNA組較相應(yīng)UUO組ROS和MDA含量更高(P<0.05);UUO+空質(zhì)粒組則與相應(yīng)UUO相比無明顯區(qū)別(P>0.05)。與sham組相比,UUO
4、組SOD活性、HO-1的mRNA和蛋白表達(dá)在第1d明顯升高,以后逐漸下降,SOD活性第3d開始低于sham組,而HO-1的mRNA和蛋白表達(dá)各檢測時間點均高于sham組(P<0.05),UUO+IMD組較相應(yīng)時間點UUO組SOD活性和HO-1的表達(dá)更高(P<0.05),而UUO+IMDshRNA組SOD活性和HO-1的表達(dá)較相應(yīng)UUO組顯著下降(P<0.05),UUO+空質(zhì)粒組與UUO相比無明顯區(qū)別(P>0.05)。
結(jié)論:I
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