胡須輸入信息缺失誘導(dǎo)嗅覺功能上調(diào)的跨感覺模式可塑性及其細(xì)胞機(jī)理研究.pdf

1、目的：為了研究跨感覺模式可塑性的細(xì)胞機(jī)理，我們建立了胡須輸入信息缺失誘導(dǎo)嗅覺功能上調(diào)的動(dòng)物模型，分析胡須剝奪后嗅皮層GABA能神經(jīng)元和錐體神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位編碼能力的可塑性變化。
　　方法：1.小鼠胡須輸入信息的剝奪：將FVB-Tg（Gad GFP）4570Swn/J小鼠右側(cè)嘴角部全部觸須修剪至小于1mm，每48小時(shí)修剪一次，從出生后12天開始持續(xù)到出生后19天；2.在上述處理7天以后，應(yīng)用T迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠嗅覺功能變化，實(shí)驗(yàn)

2、中小鼠移動(dòng)到食物一側(cè)的成功率作為鑒別其嗅覺功能上調(diào)的指標(biāo)；3.膜片鉗電生理實(shí)驗(yàn)：小鼠胡須傳入剝奪一周以后，迅速分離大腦并做包含嗅皮層的矢狀切片(400μm)，然后將腦片放置于氧合的人工腦脊液(ASCF)中，25?C下孵育1-2小時(shí)后轉(zhuǎn)移至灌流槽，在31?C下對(duì)腦片進(jìn)行灌流；采用 IR-DIC光學(xué)顯微鏡(Nikon E600FN)熒光顯微鏡定位大腦嗅覺皮層綠色熒光蛋白標(biāo)記的GABA能神經(jīng)元和錐體神經(jīng)元；運(yùn)用Axoclamp-200B放大器

3、全細(xì)胞記錄方法記錄大腦嗅覺皮層GABA能神經(jīng)元和錐體神經(jīng)元的內(nèi)在特性，包括閾電位(threshold potentials,Vts)和絕對(duì)不應(yīng)期(absolute refractory periods,ARP)，信號(hào)輸入Clampex軟件獲取群集發(fā)放的動(dòng)作電位間距(inter-spike interval,ISI)，使用Clampfit軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：1.胡須傳入被剝奪的小鼠對(duì)食物位置選擇成功率高于正常小鼠；

4、　　2.應(yīng)用膜片鉗電生理方法，發(fā)現(xiàn)與正常組相比，剝奪組嗅皮層GABA能神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著降低，動(dòng)作電位間距ISI延長(zhǎng)(P<0.05)，神經(jīng)元內(nèi)在特性表現(xiàn)為絕對(duì)不應(yīng)期延長(zhǎng)(P<0.05)和閾電位(Vts)升高(P<0.05)；錐體神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著增加，動(dòng)作電位間距ISI縮短(P<0.05)，神經(jīng)元內(nèi)在特性表現(xiàn)為絕對(duì)不應(yīng)期縮短(P<0.05)和閾電位(Vts)降低(P<0.01)。
　　結(jié)論：1.