針刺對實驗性乳腺增生模型大鼠干預作用的研究.pdf

1、乳腺增生病，屬中醫(yī)“乳癖”范疇，是婦女最常見的乳腺疾病，近年來發(fā)病率有明顯上升趨勢，發(fā)病率約占育齡婦女的40％左右。本病的不同發(fā)展階段有一定的癌變率，故對婦女的身體和精神健康均造成一定的威脅。針灸治療本病療效較為滿意，安全無毒副作用。為了更全面深入探討針刺治療乳腺增生病的作用機理，本文從以下兩方面進行了研究。 1文獻研究本文對現(xiàn)代醫(yī)學有關乳房結構、發(fā)育和生理，內分泌對乳腺的影響，乳腺增生病的發(fā)病、病因病機及治療的文獻進行了較系統(tǒng)

2、全面整理，并就中醫(yī)論述乳房生理及病理、乳房與臟腑經(jīng)絡、乳癖的病因病機及辨證論治、針灸治療的古今文獻進行了較為系統(tǒng)全面的文獻整理，為進一步的實驗研究奠定了理論基礎。 1.1現(xiàn)代醫(yī)學的認識：乳腺組織的生理、病理變化受下丘腦一垂體一卵巢軸及其他內分泌腺的綜合控制和調節(jié)，尤以卵巢激素的影響最大。在月經(jīng)周期中，乳腺組織受雌、孕激素的影響，也隨著子宮內膜增殖、分泌、脫落的變化，發(fā)生著增生和復舊的周期性變化。這種周期性的改變，是乳腺增生病發(fā)病

3、的生理基礎。乳腺增生的病理改變?yōu)槿橄僦髻|和間質不同程度地增生與復舊不全所致的乳腺結構在數(shù)量上和形態(tài)上的異常，是乳腺實質的良性增生。其發(fā)病原因主要是內分泌激素失調的觀點已被大多數(shù)學者公認。目前認為，雌激素水平相對增多而黃體素水平相對低下，雌激素過度刺激而缺乏孕酮的保護作用是本病發(fā)生的一個重要因素。雌激素能刺激乳腺組織增生，引起乳腺導管擴張和囊腫形成，是影響乳腺增生發(fā)生發(fā)展轉歸的重要因素。乳腺增生病的不同發(fā)展階段有一定的癌變率。乳腺的非典型

4、增生癥可歸為乳腺癌的癌前期病變范疇。根據(jù)乳腺癌發(fā)展的漸進模式理論，正常乳腺的上皮細胞惡化需經(jīng)歷一個從良性增生到細胞間變，從不典型增生、癌前期病變逐漸發(fā)展為乳腺惡性腫瘤的過程。而細胞基因的突變和調控失常，是正常細胞向惡性轉化的關鍵。這一理論，為臨床上積極治療乳腺增生病、阻斷癌前期病變提供了有力的理論依據(jù)。 1.2中醫(yī)學認識：中醫(yī)認為乳房的發(fā)育、生長、衰萎受五臟六腑之精氣支配。其中以腎的先天精氣，脾胃的后天水谷精氣，肝的藏血與疏調氣

5、機，對乳房的生理病理影響最大。乳房與經(jīng)絡聯(lián)系廣泛而密切，乳房及其周圍經(jīng)絡縱橫，腧穴密布，其中與足陽明胃經(jīng)、足少陰、足厥陰肝經(jīng)及沖任二脈關系最為密切。經(jīng)絡與乳房密切相關這一生理基礎，為乳癖外治法(針灸、按摩、外敷藥貼)提供了充實的中醫(yī)理論依據(jù)。乳腺增生病屬于祖國醫(yī)學“乳癖”范疇。乳癖是本虛標實之證，以肝腎不足，沖任失調為本，氣滯、痰凝、血瘀為標。病機主要是肝氣郁結，血瘀痰凝，阻閉乳絡所致。中醫(yī)藥在治療乳腺增生病方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗。治

6、療原則可歸納為：早期治療，既病防變；扶正與祛邪相結合；內外同治。針灸治療本病療效較為滿意，無毒副作用，臨床應用十分普遍；機理研究主要集中在組織形態(tài)學、激素和激素受體的層面。研究表明，針灸和中藥能調節(jié)患者血液雌二醇等激素水平，影響實驗動物乳腺組織雌激素受體(ER)和孕激素受體的表達。 2動物實驗研究本研究選擇過量雌激素誘導大鼠乳腺增生為模型，應用組織形態(tài)學、放射免疫學、免疫組織化學等方法，圍繞著雌激素、雌激素受體和雌激素信號轉導通

7、路(雌激素信號轉導機制的非基因組效應的MAPK通路)而展開，觀察針刺對乳腺組織形態(tài)學、雌激素(E2)、雌激素受體(ER)、細胞外信號調節(jié)激酶(ERK)、一氧化氮合酶(NOS)表達的效應。結果如下： 2.1造模大鼠乳頭高度明顯高于正常對照組(P＜0.01)，其中以模型組增長最明顯。正常組乳腺導管上皮細胞排列規(guī)則，導管腔、腺泡腔無擴張，小葉及小葉中腺泡數(shù)極少。模型組乳腺導管上皮排列紊亂、增生明顯，導管管腔、腺泡腔明顯擴張，腺泡數(shù)增加

8、明顯，間質纖維結締組織明顯增生。表明過度雌激素的刺激可引起大鼠乳腺組織增生，造模是成功的。 2.2針刺組的乳腺導管上皮排列基本規(guī)則，在觀察指標上與模型組的差異均有統(tǒng)計學上意義：乳頭高度(P＜0.05)、腺泡數(shù)目(P＜0.05)、腺泡腔直徑(P＜0.01)和導管直徑(P＜0.01)。提示針刺對雌激素過度刺激所誘導的大鼠乳腺組織增生具有抑制作用，這為臨床針灸治療本病提供了動物實驗依據(jù)。 2.3雌激素水平：模型組血清E2水平明

9、顯上升，為4組中最高，與正常組相比差異有非常顯著性意義(P＜0.01)；針刺組、西藥組與正常組比較，血清E2水平雖有上升，差異均有顯著性意義(P＜0.05)，但升高幅度不及模型組。針刺組、西藥組與模型組比較，血清E2水平下降，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。 2.4雌激素受體表達：與正常組比較，三組ER受體陽性細胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P

10、＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，ER受體陽性細胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 2.5細胞外信號調節(jié)激酶蛋白表達：與正常組比較，三組ERK蛋白表達陽性細胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，ERK蛋白表達陽性細胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 2.6一氧化氮合

11、酶蛋白表達：與正常組比較，三組eNOS蛋白表達陽性細胞數(shù)均有增加，其中以模型組最明顯，有非常顯著性差異(P＜0.01)；針刺組次之，西藥組最低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)。針刺組、西藥組與模型組比較，eNOS蛋白表達陽性細胞數(shù)較低，差異均有非常顯著性意義(P＜0.01)。 3結論3.1通過對古今文獻的研究，我們認為針灸治療乳腺增生病具有充實的中醫(yī)理論依據(jù)、較好的臨床療效和一定積累的機理研究工作， 3.2研究結果顯

12、示，過度雌激素的刺激可引起大鼠乳腺組織增生，而針刺對雌激素過度刺激所誘導的大鼠乳腺組織增生具有抑制作用，這為臨床針灸治療本病提供了動物實驗依據(jù)。 3.3研究結果表明，一定量的外源性雌激素可引起血清E2水平升高，ER、ERK和eNOS蛋白表達增強。提示ERK通路和NO在乳腺增生的發(fā)生、發(fā)展及轉歸的病理過程中的作用是不容忽略的。研究對它們的調控干預手段，對阻止乳腺增生病癌前期病變的演變有重要意義。 3.4針刺抑制乳腺增生作用

13、機理研究中發(fā)現(xiàn)：①針刺“膻中”“三陰交”穴能降低外源性雌二醇所致的血清高雌激素水平，從而提示針刺的治療作用與調整機體血清E2水平有關。 ②針刺組的ER受體陽性細胞數(shù)低于模型對照組(P＜0.01)，提示針刺膻中、三陰交穴有抑制ER表達的作用，從而下調雌激素對乳腺的促增生作用，起到抑制乳腺增生的作用。 ③針刺組的ERK蛋白表達水平低于模型對照組(P＜0.01)，提示針刺膻中、三陰交穴有抑制ERK表達的作用。我們推測，針刺可能

14、通過ERK通路，從而下調雌激素對乳腺組織細胞增殖、分化及血管擴張等生物學效應，達到抑制乳腺增生的作用。提示針刺對于阻斷乳腺增生病癌前期病變的演變有一定意義。 ④針刺組的eNOS蛋白表達水平低于模型對照組(P＜0.01)，提示針刺可調節(jié)過量雌激素誘發(fā)的大鼠乳腺增生組織中eNOS蛋白表達。這一作用可能有利于保護乳腺組織，阻斷從增生到不典型增生、癌前期病變逐漸發(fā)展為乳腺惡性腫瘤的過程。 綜上所述，我們認為針刺對雌激素、雌激素受