老齡過程中心臟交感神經(jīng)及去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運蛋白表達變化和可能的影響因素.pdf

1、目的：觀察大鼠心交感神經(jīng)密度隨年齡增長的變化與去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運蛋白（norepinephrine transporter，NET）表達間的關(guān)系，并討論其意義。
　　 方法：將不同年齡的雄性SD大鼠分為三組：即3（n=5）、10（n=5）、16月齡組（n=5）。各組分別進行（1）超聲心動圖：分別測定左室室壁厚度、收縮末期直徑（LVDd）、左室舒張末期直徑（LVDs）、左室短軸縮短率（FS）、左室射血分數(shù)（INEF）等指標(biāo)，以評價左

2、室收縮功能；（2）有創(chuàng)血流動力學(xué)檢測：血流動力學(xué)指標(biāo)：平均動脈壓（MBP）、左心室收縮壓（INSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓上升及下降最大速率（LV±dp/dtmax），計算左、右心室重量指數(shù)（LVMI，RVMI）；（3）觀察心臟膠原變化：用苦味酸-天狼猩紅染色測定各組大鼠左心室膠原容積分數(shù)（collagen volume fraction，CVF），在偏振光顯微鏡下觀察染色結(jié)果并攝片，采用IPP軟件分析其結(jié)果。（4）

3、用免疫組織化學(xué)方法檢測酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH）及NET表達：常規(guī)石蠟包埋切片，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測TH與NET表達，并于顯微鏡下觀察左心室心肌組織中TH及NET變化并攝片，采用image pro plus6.0分析并以點計數(shù)的方法計數(shù)樣本組織中免疫染色陽性點總數(shù)。
　　 結(jié)果：比較3、10、16月齡三組大鼠檢測結(jié)果，（1）超聲心動圖：隨年齡增大，心室壁增厚，射血分數(shù)與短軸縮短率均無明顯改變（

4、P>0.05）；（2）血流動力學(xué)指標(biāo)：與3月組相比，10月組與16月組LV-dp/dtmax絕對值顯著降低（P<0.05），10月組與16月組間比較LV-dp/dtmax無顯著差異（P>0.05）。MBP、LVSP、LVEDP、LV+dp/dtmax各年齡組間均無顯著差異（P>0.05）。（3）心臟結(jié)構(gòu)變化：隨年齡增長心臟增大、左心室腔擴大；光鏡下心肌纖維增粗，排列較規(guī)則；各年齡組間LVMI、RVMI無明顯差異（P>0.05）。（4）苦

5、味酸-天狼猩紅染色測定膠原容積分數(shù)：3月組與10月組大鼠心肌膠原容積分數(shù)明顯低于16月組（P<0.05），16月組大鼠左室心肌CVF比3月組增長了約67％，但3月組與10月組間無明顯差異（P>0.05）。（5）TH及NET免疫組織化學(xué)染色：TH染色，與3月組相比，10月組和16月組TH陽性點計數(shù)均明顯降低，16月齡組TH陽性點計數(shù)比3月齡組降低51.2％，且各組間皆有差異（P<0.05）。NET染色，與3月組相比，10、16月組NET陽

6、性點計數(shù)均明顯降低（P<0.05）；16月組NET陽性點計數(shù)與10月組相比，亦顯著降低（P<0.05），且16月齡組NET陽性點計數(shù)比3月齡組降低25.4％。
　　 結(jié)論：老齡化過程中，（1）大鼠左室心肌交感神經(jīng)密度與NET表達水平下降，NET表達水平的下降與交感神經(jīng)密度的降低可能有一定關(guān)系。（2）NET活性的降低很可能與NET表達水平降低有關(guān)。（3）NET活性下降可致心肌間質(zhì)中NE濃度增加，NE刺激可增加膠原含量，促使左室舒張