中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床分析和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎(UlcerativeColitis，UC)是一種反復(fù)發(fā)作的慢性直腸和結(jié)腸非特異性炎癥性疾病，病變主要限于大腸粘膜與粘膜下層，表現(xiàn)為炎癥及潰瘍。UC可發(fā)生于任何年齡，臨床上以腹痛、腹瀉、膿血便為主要表現(xiàn)，病因和發(fā)病機(jī)制至今不明。本病往往病程較長(zhǎng)，易反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，急性爆發(fā)型死亡率較高，慢性持續(xù)型易癌變，其癌變發(fā)生率是正常人的5-20倍。闡明UC的病因及發(fā)病機(jī)制，并最終尋找到有效的治療方法是急待解決的問題。

2、 建立理想的動(dòng)物模型對(duì)闡明該病的病因、發(fā)病機(jī)制及觀察藥物療效有著重要意義。由于UC的病因、發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，因此很難建立理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。目前建立炎癥性腸病動(dòng)物模型的方法主要有四種，第一種是某些動(dòng)物可自然發(fā)生腸道粘膜炎癥，此類模型的存在提示炎癥性腸病的發(fā)生可能與某些基因特征有關(guān)；第二種是通過基因敲出及轉(zhuǎn)基因技術(shù)誘導(dǎo)的模型，此模型可從基因水平闡明腸道炎癥的免疫發(fā)病機(jī)制；第三種是用異體結(jié)腸粘膜等作為抗原刺激造成慢性免疫性炎癥；第四種是通

3、過外源性化學(xué)刺激物而誘發(fā)的模型。通過外源性化學(xué)刺激物誘導(dǎo)鼠腸道粘膜產(chǎn)生免疫反應(yīng)來建立炎癥性腸病動(dòng)物模型是一種常用的方法。 目前，西醫(yī)常用治療UC的藥物有氨基水揚(yáng)酸類、皮質(zhì)類固醇類、免疫調(diào)解劑、抗感染藥物等。隨著UC病因和發(fā)病機(jī)制的深入了解，近年來許多全新的治療UC的方法和新型的藥物制劑開始用于臨床，同時(shí)對(duì)一些常用藥物的使用也獲得了更多的經(jīng)驗(yàn)，但是總的來講，UC治療的療效仍不滿意，許多藥物長(zhǎng)期應(yīng)用有較大的副作用。在西藥不能有效治療

4、UC的情況下，對(duì)中藥治療UC的研究進(jìn)行的很多。 二十世紀(jì)八十年代初中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院消化內(nèi)科在臨床上采用錫類散、黃連素、慶大霉素加地塞米松合并灌腸的方法治療UC收到較好效果，并已形成了常規(guī)的治療方案。其中地塞米松為腎上腺皮質(zhì)激素類藥物，藥理作用主要為抗炎和抗過敏。黃連素(或慶大霉素)在合并用藥中對(duì)炎癥表面有抗菌消炎作用。錫類散源于《金匱翼方》，為經(jīng)方，由青黛、冰片、牛黃、珍珠等藥組成，具有收斂瘡面、清熱解毒、去腐生肌功效，

5、對(duì)咽喉疾病有較好的療效，近年來，有關(guān)錫類散老藥新用的報(bào)道很多，以錫類散治療腸道疾病的報(bào)道為主。組方中的四種藥物均為療效確切的藥物，但多年臨床應(yīng)用中從未系統(tǒng)、客觀地考察過該四種藥物聯(lián)合應(yīng)用的藥效。本研究對(duì)我科1995年～2003年住院的并給予中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療的UC患者進(jìn)行了回所顧性分析，然后用最為常見的三硝基苯磺酸、葡聚糖硫酸鈉、惡唑酮三種外源性化學(xué)刺激物分別建立小鼠炎癥性腸病動(dòng)物模型，通過比較，找出合適的UC的動(dòng)物模型，最后應(yīng)用UC的

6、動(dòng)物模型，對(duì)這種中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療UC的配方進(jìn)行動(dòng)物對(duì)照實(shí)驗(yàn)研究，以對(duì)此配方的療效、劑量配比進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)UC的發(fā)病機(jī)制以及此配方療效機(jī)理作一初步探討。 目的： 一.回顧性分析我科1995年～2003年179例住院的UC患者，探討中西醫(yī)結(jié)合藥物治療UC的方法以及總結(jié)UC臨床特點(diǎn)。 二.通過外源性化學(xué)刺激物建立小鼠炎癥性腸病動(dòng)物模型，篩選合適的UC的動(dòng)物模型，并對(duì)炎癥性腸病發(fā)病機(jī)制作一初步探討。 三.通過

7、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療UC的療效、劑量配比進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)療效機(jī)理作一初步探討。 材料與方法： 一.我科1995年～2003年179例住院的UC患者均符合1993年太原全國(guó)慢性非感染性腸道疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)制定的?潰瘍性結(jié)腸炎診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)?，均為活動(dòng)期病人。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用6-8周SPF級(jí)BALB/C雌性小鼠，體重約20-25g。 二.對(duì)1995年～2003年我科住院的UC患者進(jìn)行回顧性分析，探討中西醫(yī)結(jié)合藥物

8、治療UC的方法以及總結(jié)UC臨床特點(diǎn)。 三.應(yīng)用最為常見的三硝基苯磺酸、葡聚糖硫酸鈉、惡唑酮三種外源性化學(xué)刺激物分別建立BALB/C小鼠炎癥性腸病動(dòng)物模型。對(duì)小鼠大腸留取的病理標(biāo)本進(jìn)行石蠟包埋、切片、蘇木精－伊紅染色(HE)，然后對(duì)所有切片的病理組織學(xué)改變?cè)u(píng)分。并采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定小鼠大腸組織IFN-γ、IL-4含量。以期對(duì)該方法做一較為全面的總結(jié)，以篩選合適的CD和UC的動(dòng)物模型，并對(duì)IBD發(fā)病機(jī)制作一初步探

9、討。 四.應(yīng)用篩選出的合適的UC動(dòng)物模型，進(jìn)行中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療UC的實(shí)驗(yàn)研究，并采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定小鼠IFN-γ、IL-4，對(duì)這一配方的療效機(jī)制加以探討。 結(jié)果： 一.論文第一部分結(jié)果。在169例給予中西醫(yī)結(jié)合灌腸治療的患者中，轉(zhuǎn)外科手術(shù)治療26例，7例短期自動(dòng)出院，其余136例，5例未愈，131例好轉(zhuǎn)，無死亡病例，未見明顯副作用，總有效率為77.5％。169例患者中，病變累及近端結(jié)腸(病變

10、未超過結(jié)腸脾曲)的患者，灌腸治療118例，好轉(zhuǎn)101例，有效率為85.6％；病變累及全結(jié)腸的患者，灌腸治療51例，好轉(zhuǎn)30例，有效率為58.8％。169例患者中，灌腸治療的初發(fā)型患者33例，好轉(zhuǎn)22例，有效率為66.7％；灌腸治療的慢性復(fù)發(fā)型患者79例，好轉(zhuǎn)70例，有效率為88.6％；灌腸治療的慢性持續(xù)型患者57例，好轉(zhuǎn)39例，有效率為68.4％。169例患者中，灌腸治療的輕型患者45例，好轉(zhuǎn)39例，有效率為86.7％；灌腸治療的中型患

11、者37例，好轉(zhuǎn)31例，有效率為83.8％；灌腸治療的重型患者87例，好轉(zhuǎn)61例，有效率為70.1％。 二.論文第二部分結(jié)果。各組小鼠給藥后的一般情況：惡唑酮組、TN-BS組、DSS組小鼠分別于第二、三、三天開始全部出現(xiàn)稀便及明顯體重下降，其中惡唑酮組四只小鼠出現(xiàn)血便，四只小鼠便潛血陽性；TNBS組七只小鼠出現(xiàn)血便，三只小鼠便潛血陽性；DSS組三只小鼠出現(xiàn)血便，五只小鼠便潛血陽性.A對(duì)照組小鼠第一天便開始出現(xiàn)松散便或稀便，但第七天

12、大便已基本正常，其中五只小鼠輕微體重下降.B對(duì)照組小鼠僅有兩只出現(xiàn)輕微體重下降。 各組小鼠給藥后的大體形態(tài)：惡唑酮組、DSS組小鼠粘膜病變從肛門側(cè)自下向上連續(xù)性發(fā)展，逐漸減輕，直腸最為嚴(yán)重，近端結(jié)腸幾乎正常，病變部粘膜呈中、重度充血水腫，散在糜爛、淺潰瘍。TNBS組小鼠病變以結(jié)腸末端為主，但可達(dá)近端結(jié)腸，兩只小鼠病變達(dá)末端小腸，病變部粘膜呈充血水腫，糜爛、壞死，多發(fā)潰瘍，潰瘍深大，腸腔狹窄。A、B對(duì)照組小鼠結(jié)腸粘膜基本正常。惡唑

13、酮組、DSS組、A對(duì)照組、B對(duì)照組小鼠腸壁未見明顯水腫及壞死，TNBS組小鼠腸壁可見明顯水腫、擴(kuò)張及壞死。 各組小鼠給藥后的光鏡下病理形態(tài)：惡唑酮組、DSS組小鼠粘膜均見中、重度充血水腫，淺潰瘍，僅一例惡唑酮組小鼠潰瘍達(dá)肌層，惡唑酮組小鼠粘膜、粘膜下層以淋巴細(xì)胞侵潤(rùn)為主，而DSS組小鼠粘膜、粘膜下層以中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)為主。TNBS組小鼠粘膜充血水腫，上皮脫落、壞死，潰瘍形成，部分潰瘍達(dá)漿膜層，粘膜、粘膜下層以中性粒細(xì)胞侵潤(rùn)為主。A

14、對(duì)照組四例出現(xiàn)粘膜、粘膜下層輕度細(xì)胞侵潤(rùn)。B對(duì)照組僅兩例小鼠出現(xiàn)粘膜、粘膜下層輕度細(xì)胞侵潤(rùn)。 小鼠大腸組織IFN-γ、IL-4含量測(cè)定情況。惡唑酮組小鼠大腸組織IL-4含量較A對(duì)照組明顯升高(p＜0.05)，而IFN-γ較A對(duì)照組明顯降低(p＜0.05)。TNBS組小鼠大腸組織IFN-γ含量較A對(duì)照組明顯升高(p＜0.05)，而IL-4含量較A對(duì)照組明顯降低(p＜0.05)。DSS組小鼠大腸組織IL-4、IFN-γ含量較B對(duì)照組

15、均明顯升高(p＜0.05)。 二.論文第三部分結(jié)果。主要有：各組小鼠給藥治療后的一般情況、病理改變、小鼠大腸組織IFN-γ、IL-4含量測(cè)定情況。 結(jié)論： 一.采用錫類散、黃連素、慶大霉素加地塞米松合并灌腸治療UC有效，并且無明顯副作用。 二.采用錫類散、黃連素、慶大霉素加地塞米松合并灌腸治療病變累及近端結(jié)腸的患者的療效明顯好于病變累及全結(jié)腸的患者。 三.采用錫類散、黃連素、慶大霉素加地塞米松合并

16、灌腸治療慢性復(fù)發(fā)型的療效明顯好于慢性持續(xù)型患者。 四.采用錫類散、黃連素、慶大霉素加地塞米松合并灌腸治療輕型患者的療效明顯好于重型患者。 五.先致敏，然后1％惡唑酮50％乙醇溶液0.15ml灌腸所建立的小鼠IBD動(dòng)物模型類似人類UC，其誘導(dǎo)的結(jié)腸炎IL-4升高，IFN-γ下降，主要由Th2細(xì)胞所介導(dǎo)。 六.5％DSS蒸餾水溶液，給小鼠自由飲用，連續(xù)7天所建立的小鼠IBD動(dòng)物模型類似人類UC，其誘導(dǎo)的結(jié)腸炎IL-4

17、、INF-γ均升高為非典型Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞反應(yīng)。 七.2％TNBS50％乙醇溶液0.1ml灌腸所建立的小鼠IBD動(dòng)物模型類似人類CD，其誘導(dǎo)的結(jié)腸炎IL-4下降，IFN-γ升高，主要由Th1細(xì)胞所介導(dǎo)。 八.中等劑量的錫類散、黃連素(或慶大霉素)加地塞米松合并灌腸治療UC與低劑量的配方及柳氮磺吡啶灌腸治療比較療效明顯提高，而高劑量配方的療效較中等劑量配方的療效無明顯差異，低、中、高劑量配方灌腸治療UC均未見明顯的副