菌根真菌對兩種藥用石斛的生長發(fā)育和基因表達(dá)的影響.pdf

1、該文研究了菌根真菌對兩種藥用石斛的生長發(fā)育和基因表達(dá)的影響,包括鐵皮石斛（Dendrobium candidum）原球莖液體培養(yǎng)工藝和真菌誘導(dǎo)子的作用、菌根真菌對兩種藥用石斛生長和形態(tài)的影響、菌根真菌對金釵石斛（Dendrobium nobile）基因表達(dá)的影響.研究了瘤菌根菌屬（Epulorhiza sp.）真菌AR-18或AR-15對鐵皮石斛和金釵石斛生長的影響.金釵石斛根及其菌根的顯微結(jié)構(gòu)研究表明,金釵石斛具有典型的蘭科植物根的結(jié)

2、構(gòu),在金釵石斛的根中有大量根毛存在.金釵石斛根及其菌根的超微結(jié)構(gòu)研究表明,金釵石斛根的根被細(xì)胞薄壁,在最外層根被細(xì)胞之外覆蓋著蠟質(zhì)層,外皮層細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞壁厚,內(nèi)含葉綠體,靠近外皮層的皮層細(xì)胞含葉綠體、線粒體,皮層細(xì)胞壁薄,細(xì)胞核明顯,周圍有葉綠體圍繞,細(xì)胞膜附近有小泡結(jié)構(gòu).通過mRNA差異顯示技術(shù)研究了菌根真菌對金釵石斛基因表達(dá)的影響,經(jīng)反相Northern blot證實,a和j為差異表達(dá)的基因片段,差異片段a在真菌處理后的金釵石

3、斛苗中表達(dá),在對照中不表達(dá),差異片段j在真菌處理后的金釵石斛苗中表達(dá)較弱,在對照中表達(dá)較強(qiáng).對兩個片段進(jìn)行克隆、序列測定及blast分析,發(fā)現(xiàn)兩個片段具有典型的mRNA3'端序列的特點,在Genbank中未找到同源序列.經(jīng)Southern blot分析證實兩個片段來自金釵石斛基因組,在基因組中的拷貝數(shù)為單拷貝,因此推測兩個片段可能為具有重要功能的新基因片段,且為誘導(dǎo)性表達(dá)或抑制.該研究為進(jìn)一步研究基因的全長序列、結(jié)構(gòu)特點及基因功能打下了