培育方式對羔羊生長發(fā)育和肝臟基因表達(dá)的影響.pdf

1、本文以雙胞胎羔羊為試驗動物研究培育方式對羔羊生長發(fā)育和相關(guān)基因表達(dá)的影響。選取24對雙胞胎湖羊公羔羊，采用配對試驗設(shè)計，將每對雙胞胎羔羊分成兩組，一組為試驗組，實行人工哺育代乳品(AR, artificially reared);另一組為對照組，進(jìn)行隨母哺乳(ER，ewe reared)，每組24只羔羊。羔羊出生后，每隔10天于晨飼前進(jìn)行稱重、采血。羔羊在45～55日齡和75～85日齡隨機選取4對雙胞胎羔羊采用全收糞尿法進(jìn)行消化代謝試驗

2、。羔羊在60和90日齡時，分別隨機選取3對雙胞胎羔羊進(jìn)行屠宰。采用基因芯片技術(shù)和生物信息學(xué)的方法分析肝臟組織的差異表達(dá)基因。
　　試驗一，培育方式對雙胞胎湖羊羔羊生長發(fā)育、營養(yǎng)物質(zhì)利用率和血清學(xué)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示，在20、30、40日齡時，AR組羔羊的體重顯著低于ER組(P＜0.05)，但差異在逐漸減小，到50日齡以后差異不顯著（P＞0.05）。AR組羔羊的平均日增重在10～20日齡段顯著低于ER組（P＜0.05），在40～50

3、日齡段顯著高于ER組(P＜0.05)，其他時段差異不顯著，全期的平均日增重差異亦不顯著(P＞0.05)。對消化器官發(fā)育的影響:在60日齡時，AR組羔羊的瘤胃占復(fù)胃總重的比例顯著高于ER組(P＜0.05)，而瓣胃和皺胃占復(fù)胃總重的比例顯著低于ER組(P＜0.05);在90日齡時，兩組羔羊各胃室鮮重以及占復(fù)胃總重的比例均無顯著性差異(P＞0.05)，但AR組羔羊瘤胃的鮮重比ER組高。AR組羔羊的小腸占宰前活重的比例顯著高于ER組(P＜0.0

4、5)。代乳品對羔羊內(nèi)臟器官重量的影響差異不顯著(P＞0.05);對干物質(zhì)(DM)、有機物(OM)、能量(E)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、鈣(Ca)、磷(P)等營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率均無顯著影響(P＞0.05);對總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、血中尿素氮(BUN)、膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、堿性磷酸酶(ALP)等血清生化指標(biāo)以及IgG、IgM、IgA等血清免疫指標(biāo)的影響不明顯(P＞

5、0.05)，AR組與ER組羔羊在不同時期的血清學(xué)指標(biāo)呈現(xiàn)出相似的變化規(guī)律。
　　試驗二，培育方式對雙胞胎湖羊羔羊肝臟基因表達(dá)的影響。通過基因芯片分析發(fā)現(xiàn)了因培育方式不同引起的差異表達(dá)基因。AR組和ER組的差異表達(dá)基因在60日齡和90日齡都發(fā)生改變的基因有7個，它們是OR1E2、S1PR3、KMO、APOA4、ORM2、HTR4和FADS1;60日齡和90日齡的差異表達(dá)基因在AR組和ER組中表達(dá)也發(fā)生變化的基因有20個，它們是ACO

6、1、HBA1、MFSD2A、CYSJ、LOC785954、FCN、GRB2、LOC100037663、 ORM2、RXRG、LOC100602447、SQLE、HSD17B2、CYP4F2、INHBE、EAAT2，其中有4個未知基因，探針號為14780690、14815720、14845504、14854080;在不同日齡和不同處理中，表達(dá)均發(fā)生改變的基因是ORM2。GO功能顯著性富集分析發(fā)現(xiàn)，這些差異表達(dá)基因主要參與氨基酸、小分子化合

7、物和有機酸代謝的生物過程、酶活性反應(yīng)生物過程和免疫反應(yīng)過程。Pathway途徑顯著性分析發(fā)現(xiàn)，這些差異表達(dá)基因主要參與氨基酸代謝、脂類代謝、激素合成和p53信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
　　總體結(jié)論，人工飼喂代乳粉的培育方式能夠達(dá)到與母乳哺育羔羊相同的培育效果。不同的培育方式導(dǎo)致肝臟的基因表達(dá)發(fā)生了改變，發(fā)現(xiàn)了肝臟的差異表達(dá)基因。通過這些差異表達(dá)基因所參與的生物學(xué)過程及其發(fā)揮的生物學(xué)功能，初步探討了羔羊早期生長發(fā)育的營養(yǎng)調(diào)控作用，為揭示羔羊早期