宮腔分泌蛋白譜評估促排卵周期內膜容受性的研究.pdf

1、近幾十年來體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization–embryo transfer，IVF-ET）技術迅速發(fā)展并得到廣泛應用，臨床妊娠率能夠穩(wěn)定在40％以上，但IVF-ET周期胚胎種植率卻一直徘徊在20-30％左右。低種植率一直是生殖醫(yī)學領域尚未解決的難題之一，也是限制輔助生殖技術（assisted reproductive technology，ART）發(fā)展的瓶頸。成功的胚胎種植取決于胚胎的侵入能力和良好的子宮

2、內膜容受性。文獻報道50%-75%的妊娠丟失是由于胚胎種植失敗，而不良的子宮內膜容受性承擔2/3以上的胚胎種植失敗。因此認為，子宮內膜容受性不良是導致胚胎著床失敗的關鍵因素。目前對子宮內膜容受性的研究主要集中在非胚胎移植周期或動物模型，這些數據不能將內膜容受性與同周期的臨床結局聯系起來，使其臨床應用價值受到限制。亦有通過宮腔沖洗液獲取宮腔分泌物研究子宮內膜容受性的試驗，但宮腔分泌物經高度稀釋后，很多因子檢測率很低甚至檢測不出，使數據失去

3、了真實性。本研究通過胚胎移植前直接抽吸宮腔分泌物，檢測胚胎種植窗宮腔分泌蛋白表達譜，旨從內膜微環(huán)境角度實時研究胚胎著床的“土壤”條件，尋找能夠預測妊娠結局的蛋白表達譜，探討圍著床期宮腔分泌蛋白譜與胚胎植入的關系。同時，本研究設計在放棄胚胎移植周期，D3（取卵后第3天）行宮腔分泌物的檢測，D7（取卵后第7天）行子宮內膜組織活檢，檢測子宮內膜容受性標志物白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）、整合素β

4、3（integrinβ3）的表達情況，探討宮腔分泌蛋白譜與促排卵周期子宮內膜容受性的關系。
　　研究目的：探討體外受精促排卵周期圍著床期宮腔分泌蛋白譜與妊娠結局的關系，同時研究宮腔分泌蛋白譜與促排卵周期子宮內膜容受性的關系，建立無創(chuàng)性評估子宮內膜容受性的技術平臺，為進一步研究子宮內膜容受性異常的疾病奠定理論基礎。材料與方法：收集首次在上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院生殖中心，因單純輸卵管因素實施體外助孕患者的資料。研究宮腔分泌物無創(chuàng)

5、、微量取樣對妊娠的影響：收集促排卵周期胚胎移植前行宮腔分泌物取樣為實驗組，共63例；與實驗組一般情況匹配的條件下，篩選同期促排卵后直接行胚胎移植為對照組，共171例，比較兩組患者的妊娠結局。探討宮腔分泌蛋白譜與胚胎植入的關系：將實驗組根據妊娠結局分為妊娠組與未妊娠組，比較兩組患者17種調節(jié)因子表達譜的差異。宮腔分泌物標本采用多重免疫分析方法，檢測宮腔分泌物中與胚胎種植有關的IL-1β、IL-13、G-CSF、IFN-r、MCP-1、MI

6、P-1β、TNF-a等17種與胚胎種植有關因子的表達。同時，為研究宮腔分泌蛋白譜與內膜容受性的關系：我們選取同期促排卵放棄移植周期的患者，D3宮腔分泌物取樣，并在D7進行子宮內膜組織取樣。內膜組織采用免疫組織化學和western-blot檢測內膜容受性標志物LIF、integrinβ3蛋白的表達水平。分析比較宮腔分泌蛋白表達譜與內膜容受性標志物LIF、integrinβ3表達的關系。結果：比較實驗組與對照組的一般情況、促排卵數據及妊娠結

7、局，差異均無統計學意義（P＞0.05）。實驗組根據妊娠結局分為：妊娠組與未妊娠組。比較兩組宮腔分泌蛋白譜結果顯示：妊娠組與未妊娠組比較，IL-13（9.76±5.04 vs18.37±17.82）、IFN-r（7.50±2.62 vs8.87±2.39）、MCP-1（17.5±9.63 vs49.97±85.95）水平均低于未妊娠組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，余各因子妊娠組與非妊娠組比較均無統計學差異（P＞0.05）。根據放棄

8、ET組宮腔分泌蛋白IFN-r，IL-13，MCP-1平均水平分為：≥平均值和＜平均值兩組，分別比較IFN-r，IL-13，MCP-1≥平均值和＜平均值兩組內膜容受性標志物LIF和整合素β3表達顯示: IFN-r兩組LIF和整合素β3表達差異均無統計學意義，(P＞0.05)。IL-13≥13.79 pg/ml組LIF水平明顯低于＜13.79 pg/ml組，差異具有統計學意義(P＜0.05)，整合素β3表達兩組差異無統計學意義。MCP-1的