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文檔簡(jiǎn)介
1、作為甜瓜生產(chǎn)與消費(fèi)大國(guó),我國(guó)甜瓜種植面積和產(chǎn)量位于世界第一位,作為重要的水果型蔬菜,選育口感佳,果肉厚以及耐貯運(yùn)等優(yōu)質(zhì)性狀的高品質(zhì)甜瓜品種一直是育種者的工作重點(diǎn)。本研究首先通過觀察甜瓜果皮的顯微結(jié)構(gòu),了解果皮各部分在發(fā)育過程中的生理變化。再通過高通量測(cè)序技術(shù)及生物信息學(xué)分析手段,在全基因組上開發(fā)多態(tài)性CAPS分子標(biāo)記,挖掘與甜瓜果皮相關(guān)性狀的位點(diǎn),從兩方面共同揭示影響甜瓜果皮厚度的遺傳機(jī)理,為從分子手段選育優(yōu)質(zhì)甜瓜奠定理論與材料基礎(chǔ)。<
2、br> 本實(shí)驗(yàn)親本材料為差異顯著的厚皮甜瓜伊麗莎白(M4-5)與薄皮甜瓜(M1-15),通過兩親本雜交獲得F1代,F(xiàn)1代自交獲得F2代群體,利用掃描電子顯微鏡對(duì)其進(jìn)行顯微結(jié)構(gòu)觀察,初步探究遺傳規(guī)律。結(jié)合高通量測(cè)序,開發(fā)CAPS引物,在兩親本間篩選有多態(tài)性的引物,構(gòu)建甜瓜遺傳連鎖圖譜,對(duì)甜瓜果皮相關(guān)性狀基因進(jìn)行定位,同時(shí)也對(duì)果實(shí)相關(guān)性狀進(jìn)行QTL分析,具體結(jié)果如下:
1.甜瓜果皮顯微結(jié)構(gòu)觀察
甜瓜果皮分為外果皮,中果
3、皮和內(nèi)果皮三部分,其中中果皮和內(nèi)果皮肉質(zhì),為食用部分,被稱之為果肉。在外果皮上存在表皮毛和氣孔器,表皮毛隨果實(shí)發(fā)育逐漸脫落,并形成脫落傷口,傷口隨時(shí)間愈合。食用果皮部分(中果皮和內(nèi)果皮)為薄壁細(xì)胞層,其間貫穿維管束。
通過對(duì)比發(fā)現(xiàn),薄皮甜瓜和厚皮甜瓜在外果皮類型上差異顯著,厚皮甜瓜外果皮栓化,為栓化類型,薄皮甜瓜外果皮不栓化,為非栓化類型,但是薄皮甜瓜和厚皮甜瓜外果皮均為一層細(xì)胞構(gòu)成,食用果皮(中果皮和內(nèi)果皮)也都為薄壁細(xì)胞,
4、無明顯差異。
2.果皮及果實(shí)相關(guān)性狀遺傳分析
果皮相關(guān)性狀包括外果皮類型,外果皮厚度,食用果皮厚度,果皮硬度以及裂果。研究發(fā)現(xiàn)外果皮類型為質(zhì)量性狀,外果皮厚度、食用果皮厚度與果皮硬度為數(shù)量性狀,同時(shí)外果皮厚度與外果皮類型高度關(guān)聯(lián)。果實(shí)相關(guān)性狀包括果實(shí)形狀、產(chǎn)量、可溶性固形物,研究表明這些與果實(shí)相關(guān)的性狀均為數(shù)量性狀。通過遺傳分析和相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)果皮及果實(shí)相關(guān)性狀密切相關(guān)。
3.遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
5、通過測(cè)序結(jié)果,利用生物信息學(xué)分析軟件挖掘SNP位點(diǎn),對(duì)M4-5和M1-15兩親本間存在SNP突變位點(diǎn)的序列進(jìn)行CAPS檢測(cè),共設(shè)計(jì)CAPS標(biāo)記523對(duì),篩選出在親本間有多態(tài)性的CAPS標(biāo)記223對(duì),多態(tài)率43.8%。利用多態(tài)性引物對(duì)F2代群體標(biāo)記,構(gòu)建了一張?zhí)鸸线z傳連鎖圖譜,該圖譜包含195個(gè)標(biāo)記,12個(gè)連鎖群,覆蓋基因組長(zhǎng)度1702.55cM,標(biāo)記間平均距離8.78cM。
4.果皮及果實(shí)相關(guān)性狀CAPS標(biāo)記分析
利
6、用IciMapping V3.3軟件進(jìn)行定位分析,共檢測(cè)到關(guān)于果皮及果實(shí)相關(guān)位點(diǎn)40個(gè)。其中與果皮相關(guān)性狀的位點(diǎn)12個(gè)(關(guān)于外果皮類型2個(gè),關(guān)于外果皮厚度2個(gè),關(guān)于食用果皮厚度4個(gè),關(guān)于食用果皮硬度1個(gè),關(guān)于裂果3個(gè)),分布在連鎖群LG3、LG5、LG6、LG7、LG9和LG11。貢獻(xiàn)率介于3.6743%-72.9145%。檢測(cè)到關(guān)于果實(shí)相關(guān)位點(diǎn)共計(jì)28個(gè),貢獻(xiàn)率介于3.4974%-17.9684%。其中與果實(shí)形狀相關(guān)的位點(diǎn)共計(jì)14個(gè),
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