甜瓜單性花性狀遺傳規(guī)律及分子標記研究.pdf

1、甜瓜(CucumismeloL.)具有顯著的雜種優(yōu)勢，生產(chǎn)上幾乎全部使用甜瓜一代雜交品種。利用單性花系進行雜交種子生產(chǎn)，不但可省去雜交授粉過程中人工去雄的繁雜工序，降低制種成本，還可提高甜瓜一代雜交種子純度，因此是一代雜交種制種的有效途徑。本研究以西北農(nóng)林科技大學園藝學院西甜瓜課題組選育得到兩個甜瓜單性花系A(chǔ)TA-A、ATA-B、普通的雄全同株(雄花、兩性花同株)甜瓜品種以及他們的雜交后代為材料，對單性花性狀的遺傳規(guī)律進行了研究，同時對

2、甜瓜的RAPD-PCR反應(yīng)體系進行了優(yōu)化，利用獲得的優(yōu)化體系對控制單性花的基因進行了分子標記。取得了以下結(jié)果： 1.通過對甜瓜單性花系A(chǔ)TA-A、ATA-B及他們的雜交后代F1、F2、BC1的花性型分離情況進行統(tǒng)計分析研究后認為，甜瓜單性花性狀由一對基因控制的質(zhì)量性狀，單性花性狀由顯性基因所控制，其遺傳符合孟德爾遺傳規(guī)律。 2.在進行優(yōu)化RAPD反應(yīng)體系研究中，以甜瓜基因組總DNA為模板，通過對聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)體

3、系中Mg2+濃度、dNTPs濃度、模板DNA的濃度、隨機引物的濃度和Taq酶濃度梯度進行試驗，結(jié)果表明，25μL反應(yīng)體系中：10mM反應(yīng)buffer2.5μL，2.0mM的Mg2+濃度，0.2mmol/L的dNTP，引物終濃度0.2μmol/L，30ng模板DNA，Taq酶1.0U。篩選出的PCR反應(yīng)體系擴增譜帶清晰、條帶豐富、重復(fù)性好。對反應(yīng)程序進行單因子優(yōu)化實驗，獲得了穩(wěn)定的RAPD反應(yīng)體系。 3.以甜瓜單性花系A(chǔ)TA-A系

4、與兩性花品種YJX-1的雜交F2代的80個單株為材料，利用群分法(BSA法)進行單性花基因有關(guān)RAPD分子標記研究，篩選分析了840個10bp隨機引物的PCR擴增譜帶，結(jié)果表明，隨機引物S128在1180bp，S493在930bp處產(chǎn)生與性別相關(guān)的特異性條帶，S128的特異條帶與單性花性狀相關(guān)，S493的特異條帶與兩性花性狀相關(guān)。 4.對S128.1180標記的特異條帶進行回收、克隆、測序，獲得了特異條帶的序列，為最終轉(zhuǎn)化SCA