茄子單性結實的遺傳規(guī)律及AFLP分子標記研究.pdf

1、茄子(SolanummelongenaL.)起源于東南亞、印度，在中國有很長的栽培歷史，早已被人們接受和喜愛，是餐桌上常見的蔬菜之一。茄子是喜溫蔬菜，在設施栽培及春季露地早熟栽培條件下開花期常由于低溫弱光或缺乏授粉傳媒而引起授粉受精不良，引起落花落果，降低效益。國內(nèi)生產(chǎn)上多采用生長素防止落花，費工費時，成本高，而且如果使用不當，常對植株造成藥害，果實產(chǎn)生畸形和殘留部分藥劑，降低果實的商品品質(zhì)和食用價值，不利于無公害茄子的生產(chǎn)。單性結實指

2、植物開花后不經(jīng)受精而產(chǎn)生無種子果實的現(xiàn)象。因此生產(chǎn)上亟需耐低溫耐弱光的茄子品種。單性結實品種在設施中能克服授粉受精不良引起落花落果的障礙，提高座果率，顯著提高作物產(chǎn)量，降低生產(chǎn)成本。同時，單性結實的果實因不經(jīng)受精而無籽或種子空癟，品質(zhì)明顯提高，商品性得到改善，符合如今品質(zhì)育種的目標，達到設施專用品種的要求。因此，茄子單性結實種質(zhì)的研究，對選育耐低溫、適宜保護地和露地早春栽培、優(yōu)質(zhì)無籽或少籽的茄子品種具有重要的意義。弄清單性結實基因的遺傳

3、規(guī)律對指導單性結實品種的育種工作具有重要的現(xiàn)實意義，通過找到與單性結實基因緊密連鎖的分子標記可用于茄子單性結實品種的分子標記輔助育種，在苗期進行單性結實性的評價鑒定，縮短育種進程。 本研究以茄子單性結實自交系為試材，研究了自然低溫、蕾期去雄及去柱頭處理對其單性結實性的影響；通過單性結實和非單性結實雜交后代的分離比例分析單性結實基因的遺傳規(guī)律；通過對AFLP反應體系中的關鍵因子進行優(yōu)化，建立適宜茄子的AFLP技術體系，在此基礎上篩

4、選與單性結實緊密連鎖的分子標記。其主要結果如下：1.茄子D-10的單性結實性屬于兼性單性結實，既由遺傳基因控制同時又受環(huán)境調(diào)節(jié)影響。低溫能誘導其單性結實性的表達，誘導其單性結實性表達的溫度范圍在7-15℃之間。 2.去柱頭法可用于茄子單性結實性的鑒定和評價。本實驗參試的單性結實材料經(jīng)過去柱頭處理，在未經(jīng)花粉誘導和受精的條件下，其果實可正常生長發(fā)育。且去柱頭法不需對花進行隔離，操作簡單，快速、效率高，因此，去柱頭法可用于茄子單性結

5、實性的鑒定，對開花前1-2d的花蕾去柱頭，截取1mm左右即可。 3.茄子D-10的單性結實性由單顯性核基因控制。通過對茄子單性結實的親本及雜交后代的分離表現(xiàn)鑒定，對開花前1-2d的花蕾截取柱頭，使其不能正常授粉，觀察其結實性，x2測驗后從中可知單性結實與非單性結實株符合單基因分離比例，初步認為茄子D-10單性結實性的遺傳由單顯性核基因控制。 4.建立了適宜茄子AFLP分析的技術體系。本實驗以茄子(Solanummelon

6、genaL.)為材料，通過對AFLP反應體系中DNA用量，酶切連接時間，預擴增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)等幾個關鍵因素進行優(yōu)化，首次在國內(nèi)建立了適宜茄子的AFLP體系，可用于茄子的遺傳研究。20uL體系中酶切基因組DNA適宜用量為100ng，酶切-連接適宜時間為10h，預擴增產(chǎn)物適宜稀釋倍數(shù)為30-50倍。 5.在國內(nèi)外首次獲得1個與茄子單性結實基因連鎖的AFLP標記。用改良BSA法，采用AFLP技術對控制茄子單性結實的基因進行引物篩選，用茄