甜瓜cucumismelol.單性花性狀遺傳規(guī)律及分子標(biāo)記的研究

1、天津大學(xué)碩士學(xué)位論文甜瓜（Cucumis melo L.）單性花性狀遺傳規(guī)律及分子標(biāo)記的研究姓名：柯妍檸申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：郭富常;劉莉20070601A B S T R A C TI no r d e r t Oo b t a i nd i f f e r e n t g e n e r a t i o n s o f C u c u m i s m e l o L ．，t h eh y b r i d s ( F

2、 Ow e r em a d eb y c r o s s i n g ，b e t w e e nm o n o e c i o u s F i - 1 5 5 ( P 1 ) ，S l6 0 - 1 ( P 2 ) a n da n d r o m o n o ·e c i o u s m a t e r i a l sF i - l ( P 3 ) ，F(xiàn) i - 2 ( P 4 ) ，F(xiàn) i - 3 ( P 5 ) ，F(xiàn)

3、 h 一2 3 2 - 3 ( P 6 ) a n dF 2 、B C I a n d B C 4 9 6w e r eg e n e r a t e db ys e l f i n ga n d b a c k c r o s s i n gr e s p e c t i v e l y ．T h e yw e r eu s e dt oa n a l y s i st h es e g r e g a t i o n p a t t

4、 e r n so ff l o w e rs e xt y p e si n d i f f e r e n tg e n e r a t i o n s ．F 2 p o p u l a t i o nf r o mP 2 a n d P 6w e r e s t u d i e d b yR A P D t e c h n i q u e ．S e g r e g a t i o n p a t t e r n s o f f l

5、 o w e r s e x t y p e s w e r e i n v e s t i g a t e d i n d i f f e r e n tg e n e r a t i o n s ．A l l F i g e n e r a t i o n s ，t h e h y b r i d s b e t w e e n m o n o e c i o u s a n d a n d r o -m o n o e c i o

6、 u s m a t e r i a l s ，w e r em o n o e c i o u s p l a n t s ，w h i c hi n d i c a t e dt h a tm o n o e c i o u s n e s so f p a r e n t s P 1 、P 2w a su n d e r t h ec o n t r o lo f a d o m i n a n tg e n ea n di n

7、h e r i t e ds t e a d i l y ．U s i n g c h i - s q u a r e t e s t i n g ，t h er e s u l ts h o w e dt h a tt h es e g r e g a t i o n p a t t e r n so f f l o w e rs e xt y p e si nF 2 、B C I a n dB C 4 S 6 g e n e r a

8、 t i o n s c o n f o r m e d t ot h es e g r e g a t i o n r a t i oc o n t r o l l e db y a s i n g l ed o m i n a n t g e n e ．R A P D t e c h n i q u ew a sc a r r i e do ni n F 2g e n e r a t i o nf r o mt h eh y b r

9、 i db e t w e e nP 2a n dP 6 ．M o d i f i e dC T A Bw a su s e dt o e x t r a c tg e n o m i cD N A f r o mCm e l o ．S i n g l ef a c t o rs e l e c t i o nw a su s e dt o o p t i m i z et h eR A P D r e a c t i o n s y

10、s t e mi nt h i s s t u d y ．T h eo p t i m a l v a l u eo b t a i n e df r o mt h el a s ts c r e e n i n g w a s u s e dt os c r e e n t h en e x tf a c t o ra saf i x i n g v a l u eu n t i lt h e o p t i m a lR A P D

11、 —P C R r e a c t i o n s y s t e m w a sb u i l t ．T h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h e o p t i m a lP C R s y s t e mf o rR A P D a n a l y s i si nm e l o n w a s a sf o l l o w s ：t h eg e n o m i c D N A c o n

12、 c e n t r a t i o nw a s3 ．7 5 n g ／p L ：d N T P c o n c e n t r a t i o nw a s0 ．2 5 m m o l ／L ；p r i m e rc o n c e n t r a t i o nw a sO ．5 0 ¨r n o l ／L a n dT a qD N A p o l y m e r a s ec o n c e n t r a t i

13、 o nw a s1U ／r e ci n2 0 此r e a c t i o ns y s t e m ．T h e o p t i m a lP C R s y s t e ml a y e d a g o o df o u n d a t i o n o nt h er e s e a r c ho fm a r k e r - a s s i s t e d s e l e c t i o nf o rm o n o e c i

14、 o u s o ff l o w e rs e x t y p e i n C ．m e l o ．U s i n g t h i so p t i m a lR A P D r e a c t i o ns y s t e m ，2 0 0p r i m e r sw e r es e l e c t e d t o s c r e e nR A P D m a r k e r sl i n k e d t o m o n o e

15、c i o u s g e n e i n F 2 ( P 2 x P 6 ) t h r o u g hu s i n gb u l k e ds e g r e g a n ta n a l y s i s ( B S A ) s t r a t e g y ．5s p e c i f i c p o l y m o r p h i s mp r i m e r sw e r es c r e e n e d ，o n e o f

16、w h i c h ，o n l y T 1 6 5 7 1p r i m e r ( 5 5 0 b p ) w a s f o u n d a c h a r a c t e r i s t i cb a n di nm o s to fF 2m o n o e c i o u si n d i v i d u a l s ，w h i c hw a s n a m e d T 1 6 5 7 15 5 0 ．T h i sp r