三陰性乳腺癌組織中PD-L1蛋白表達(dá)及腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞數(shù)目與患者預(yù)后分析.pdf

1、背景：2015年ACS公布的癌癥統(tǒng)計(jì)顯示乳腺癌占美國(guó)女性腫瘤新發(fā)病的第一位（25％），有超過(guò)4萬(wàn)名女性死于乳腺癌，占死亡總數(shù)的15%1。2012年全球癌癥統(tǒng)計(jì)顯示，與2008年相比，全球乳腺癌患者增長(zhǎng)20%以上，死亡率增長(zhǎng)14%，其中我國(guó)乳腺癌患病人數(shù)為69.7萬(wàn)，死亡人數(shù)為4.8萬(wàn)2，在2011年分型中，人表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER2)陽(yáng)性的乳腺癌患者，在使用靶向藥物治療后生存明顯獲益，在一些發(fā)達(dá)國(guó)家中，五年生存率已到達(dá)90%3。然而

2、對(duì)于受體三陰性乳腺癌患者來(lái)說(shuō)，因?yàn)槿鄙偬禺愋缘陌悬c(diǎn)，所以要面臨復(fù)發(fā)早、進(jìn)展快，生存期短等問(wèn)題。由于對(duì)內(nèi)分泌治療及抗HER2的靶向藥物治療不敏感，三陰性乳腺癌患者的五年生存率僅有60%4，找出新的治療的策略迫在眉睫。
　　程序性死亡配體1(Programmed death ligand1,PD-L1)作為免疫球蛋白超家族負(fù)性共刺激分子的重要成員，參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)過(guò)程。PD-L1是程序性死亡受體-1（Programmed death1

3、，PD-1）的主要配體，PD-1是1992年由Ishida等在對(duì)T細(xì)胞雜交瘤的凋亡研究中發(fā)現(xiàn)的與細(xì)胞凋亡相關(guān)的蛋白5，1999年P(guān)D-1的配體被Dong等發(fā)現(xiàn)并且取名為PD-L1，隨后命名為CD2746；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)PD-L2，命名為CD2737。PD-1：PD-L1信號(hào)通路可以通過(guò)對(duì)T細(xì)胞的抑制負(fù)調(diào)控免疫應(yīng)答，進(jìn)而在免疫耐受，微生物感染，腫瘤免疫逃逸，過(guò)敏中發(fā)揮重要作用。TIL與PD-1是T淋巴細(xì)胞活化過(guò)程中重要的負(fù)性共刺激分子，可

4、以抑制激活T淋巴細(xì)胞，避免腫瘤細(xì)胞受到T淋巴細(xì)胞的攻擊。部分早期研究顯示PD-1和TIL也與較差的預(yù)后相關(guān)8。同時(shí)也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)PD-1的配體PD-L1在部分TIL表明也有所表達(dá)，通過(guò)聯(lián)合其他TIL表面上的PD-1發(fā)揮作用9,10。關(guān)于PD-L1在乳腺癌中表達(dá)的數(shù)據(jù)非常有限，近期一些研究指出，PD-L1在乳腺癌中的表達(dá)可作為不良預(yù)后10和保護(hù)性因素11的預(yù)測(cè)指標(biāo)。同時(shí)一項(xiàng)大樣本的獨(dú)立隊(duì)列研究表明，三陰性乳腺癌中PD-L1的表達(dá)明顯高于非三

5、陰性乳腺癌患者，并且癌巢內(nèi)CD8+T細(xì)胞的表達(dá)也與PD-L1的陽(yáng)性表達(dá)有關(guān)，但預(yù)后的意義不明確，而三陰性乳腺癌中PD-L1與TILs之間的關(guān)系尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　本研究對(duì)中山腫瘤醫(yī)院及我院共215例三陰性乳腺癌患者PD-L1與腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞TIL進(jìn)行評(píng)估，分析PD-L1與TIL之間的關(guān)系與對(duì)患者的臨床結(jié)局的影響。
　　目的：在乳腺癌中，三陰性乳腺癌（TNBC）的預(yù)后較差，所以有必要找出一個(gè)有效的治療策略。目前研究發(fā)現(xiàn)PD-L

6、1通路在腫瘤免疫逃逸中有著重要地位，所以推測(cè)阻斷PD-1：PD-L1通路可以增加T細(xì)胞的抗腫瘤免疫活性及提高宿主抗腫瘤免疫反應(yīng)?？筆D-1及抗PD-L1抗體已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)中觀(guān)察到具有明顯抗腫瘤活性12，然而目前關(guān)于PD-L1在TNBC中的臨床研究及分析數(shù)據(jù)不足。
　　資料與方法：選取中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院及中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院組織標(biāo)本庫(kù)中1999年7月至2012年10的三陰性乳腺癌患者215例，215例組織樣本被制成組織芯片，所有病例均為女

7、性，年齡在27-78歲，中位隨訪(fǎng)年齡為49歲。用免疫組化和蘇木素染色的方法檢測(cè)215例三陰性乳腺癌組織中PD-L1和TILs的表達(dá)，并分析其與患者各項(xiàng)臨床病例特征及預(yù)后的關(guān)系。
　　現(xiàn)今對(duì)PD-L1的判定標(biāo)準(zhǔn)尚未統(tǒng)一，推薦使用的方法是對(duì)組織細(xì)胞著色程度與被染色細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行評(píng)分，被染細(xì)胞數(shù)與著色程度得分的乘積：≤1記為陰性，＞1記為陽(yáng)性。其中（-）記為PD-L1陰性患者，（+）記為PD-L1陽(yáng)性的患者。
　　TIL是有兩位高年

8、資病理科醫(yī)生在雙盲條件下分別對(duì)腫瘤間質(zhì)和腫瘤內(nèi)的TIL進(jìn)行觀(guān)察，其中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在0%-10%記為低表達(dá)；11%-40%記為中度表達(dá)；41%-100%記為高表達(dá)。除此還將TIL≥50%的患者記為淋巴細(xì)胞主導(dǎo)型乳腺癌患者（LPBC），TIL＜50%的患者為非淋巴細(xì)胞主導(dǎo)型乳腺癌患者。
　　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，卡方檢驗(yàn)對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行分析，使用Kaplan-Meier對(duì)總生存率和無(wú)病生存率進(jìn)行分析，對(duì)

9、于單因素分析后有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素用非條件Logistic回歸進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：中位隨訪(fǎng)時(shí)間為67.7個(gè)月（7個(gè)月-159個(gè)月）。PD-L1陽(yáng)性的患者中位總生存時(shí)間為89個(gè)月，PD-L1陰性的患者中位總生存時(shí)間為72個(gè)月,P=0.019,P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PD-L1陽(yáng)性的患者中位無(wú)病生存時(shí)間為137個(gè)月，PD-L1陰性的患者中位無(wú)病生存時(shí)間為116個(gè)月,P=0.046,P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在TNBC患者

10、中PD-L1陽(yáng)性的患者中位總生存時(shí)間及中位無(wú)病生存時(shí)間比PD-L1陰性的患者明顯延長(zhǎng)。
　　STILs高表達(dá)患者的中位總生存時(shí)間為107個(gè)月，STILs中度表達(dá)患者的中位總生存時(shí)間為82個(gè)月，STILs低表達(dá)的患者中位總生存時(shí)間為64個(gè)月，P=0.026,P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。STILs高表達(dá)的患者中位無(wú)病生存時(shí)間為126個(gè)月，STILs中度表達(dá)的患者中位無(wú)病生存時(shí)間為135個(gè)月，STILs低表達(dá)的患者中位無(wú)病生存時(shí)間為11

11、9個(gè)月，P=0.325,P≥0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在TNBC患者中STILs高表達(dá)的患者具有更長(zhǎng)的中位總生存時(shí)間。(P=0.026)。
　　多因素COX回歸分析結(jié)果顯示PD-L1、STILs是三陰性乳腺癌患者生存的獨(dú)立因素。在STILs≥50%（LPBC）的患者中PD-L1蛋白表達(dá)率高于STILs<50%的患者，（P=0.004）。
　　結(jié)論：在TNBC患者中PD-L1、STILs與患者生存及預(yù)后密切相關(guān)。PD-L1陽(yáng)性表