茶多酚對酒精性肝病大鼠核因子κB及環(huán)氧合酶2表達的影響.pdf

1、目的:本研究采用大鼠酒精灌胃的方法建立酒精性肝病(ALD)早期病變動物模型，建模的同時加以抗氧化劑茶多酚干預(yù)。造模結(jié)束后通過血清肝臟酶學(xué)、脂質(zhì)過氧化指標(biāo)檢測、光鏡觀察評價、電鏡超微結(jié)構(gòu)檢查等方法綜合評價各組動物病變情況，用半定量RT-PCR及免疫組化方法檢測NF-κB和COX-2在各組大鼠肝臟的表達。觀察茶多酚對大鼠酒精性肝病的干預(yù)作用及其對核因子κB(NF-κB)和環(huán)氧合酶2(COX-2)表達的影響。 方法: 32只雌性Wis

2、tar大鼠隨機分為3組：對照組6只、模型組13只、茶多酚組13只。以56度白酒加玉米油2g·kg-1·d-1灌胃，白酒起始劑量為8mL·kg-1·d-1，白酒灌胃量每周遞增2mL·kg-1·d-1直至總劑量達16mL·kg-1·d-1后以該量持續(xù)至第7周末結(jié)束；茶多酚組在模型組的基礎(chǔ)上將茶多酚0.25g·k-1加入白酒中灌胃干預(yù)病變進程。實驗至第7周末麻醉后腹主動脈取血，檢測AST、ALT、MDA水平。采血后取肝組織石蠟切片HE染色結(jié)合

3、冰凍切片蘇丹Ⅳ染色觀察脂變程度、炎癥細胞浸潤、肝細胞細胞壞死及纖維化情況。透射電鏡觀察對照組、模型組及茶多酚組肝細胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、脂滴產(chǎn)生等超微結(jié)構(gòu)改變。肝組織半定量RT-PCR和免疫組化方法檢測NF-KB和COX-2在各組大鼠肝臟的表達情況。 結(jié)果: 1.模型組與對照組肝臟血清酶學(xué)及形態(tài)學(xué)檢查顯示兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，ALD模型建立成功。2.茶多酚組與模型組比較：茶多酚組肝小葉內(nèi)脂滴明顯減少，組織學(xué)評分低于模

4、型組(P＜0.01)。AST、ALT、MDA絕對值低于模型組且有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。RT-PCR及免疫組化均顯示，肝組織中NF-κB及COX-2表達模型組較對照組明顯升高(P＜0.01)，茶多酚組較模型組明顯降低(P＜0.01)；NF-κB和COX-2的RT-PCR檢測結(jié)果相關(guān)性分析顯示二者直線相關(guān)。 結(jié)論:氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化參與酒精性肝病的發(fā)生，茶多酚對大鼠酒精性肝損傷有保護作用，其機制可能是通過抑制NF-κB的活化