HIF-1α、Ang-2在酸中毒誘導的視網(wǎng)膜新生血管異常增生中的表達及意義.pdf

1、目的:建立酸中毒誘導早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病大鼠動物(Acidosis—induced retinopathy AIR)模型,觀察缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)、血管生成素-2(Ang-2)在正常新生大鼠及ROP模型大鼠(AIR)視網(wǎng)膜中的表達變化,探討二者表達變化與酸中毒的關系,對視網(wǎng)膜血管發(fā)育以及在酸中毒誘導ROP進程中的作用。
　　 方法:將120只新生Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)隨機分為酸中毒實驗組和對照組,將

2、其60只從出生后第2天開始按535 mg／kg.d的劑量管飼NH4Cl(濃度為50mg／ml),每天2次,連續(xù)6天,然后進入恢復期0-12天；另選60只作為對照組。兩組大鼠分別于出生后第3、5、8、10、13、20日齡處死,取左眼球用ADP酶組織化學染色法觀察視網(wǎng)膜血管的改變；取右眼通過常規(guī)HE染色定量反映視網(wǎng)膜血管增生情況；用免疫組化方法進行HIF-1α和Ang-2蛋白的表達。
　　 結果:視網(wǎng)膜鋪片ADP酶染色法顯示酸中毒實

3、驗組8日齡鼠視網(wǎng)膜血管明顯收縮、阻塞,視網(wǎng)膜出現(xiàn)大片無灌注區(qū)；10日齡時可見大血管擴張、迂曲、大量新生血管形成,周邊可見無灌注區(qū)；13日齡時血管仍擴張,但新生血管結構及分布紊亂。HE染色可見酸中毒實驗組10日齡突破內(nèi)界膜血管內(nèi)皮細胞核顯著高于同齡對照組,分別為(28.78±7.53)與(1.22±1.48)個,p<0.001。免疫組化結果顯示:酸中毒實驗組8日齡時視網(wǎng)膜組織中可見散在HIF-1α的陽性表達；10日齡時視網(wǎng)膜組織中HIF-

4、1α呈強陽性表達,主要分布在視神經(jīng)節(jié)細胞層和突破內(nèi)界膜的新生血管；13日齡時HIF-1α陽性表達有所下降,此后表達強度漸向正常水平恢復,與各同齡對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；酸中毒實驗組8日齡時Ang-2表達較對照組增強,10日齡鼠Ang-2表達明顯增強并達高峰,陽性表達從神經(jīng)纖維層到內(nèi)網(wǎng)層,突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管,均有陽性反應出現(xiàn),13日齡時Ang-2表達仍明顯,主要分布區(qū)域不變:在實驗過程中HIF-1α與Ang-2

5、的表達趨勢存在一致性。
　　 結論:代謝性酸中毒可能損害正在發(fā)育的視網(wǎng)膜血管而引起新生血管形成,進一步證實了酸中毒是ROP的高危因素；HIF-1α、Ang-2在酸中毒誘導早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變模型中呈高表達,兩者表達存在正相關,且與視網(wǎng)膜新生血管形成趨勢一致,提示HIF-1α、Ang-2在視網(wǎng)膜的發(fā)育和ROP的發(fā)病過程中起著重要的作用；推測酸中毒可能通過直接或間接的途徑誘導HIF-1α表達升高,調(diào)控Ang-2表達,從而促進視網(wǎng)膜新生血