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文檔簡介
1、目的:同種異體移植是否成功,所面臨的主要難題是再移植段氣管上皮細胞所引起的排斥反應及血運的重建.該實驗探索一種方法,首先去除移植段氣管的上皮細胞,使之減少免疫原性,再用異體大網(wǎng)膜包裹使之血管化以驗證其排斥反應的強弱.方法:以20只雄性SD大鼠(150-200g)作供體.取其環(huán)狀軟骨下15個氣管環(huán),每五個環(huán)作為一段移植氣管.另30只雄性SD大鼠(200-250g)作受體,分成三組,每組10只.分別為:新鮮氣管移植組(A組):新鮮異體未經(jīng)處
2、理,置入腹腔大網(wǎng)膜包裹;冷凍氣管移植組(B組):移植段氣管,先放入-196℃的液氮中冷凍1月,再取出移植;去上皮細胞移植組(C組):先用蛋白酶XⅣ脫上皮細胞,再置入腹腔大網(wǎng)膜包裹.三組于21天后取出移植段氣管,經(jīng)HE染色后觀察氣管結(jié)構(gòu)變化,再通過淋巴細胞浸潤測定,確定三組排斥反應的強弱.以上實驗前,分別用三種不同濃度(0.1%,0.3%,0.5%)的蛋白酶XⅣ脫移植段氣管上皮和腺體細胞,與正常氣管比較,以確定最佳蛋白酶XⅣ濃度.結(jié)果:淋
3、巴細胞浸潤:A組:29.16±2.69個/5Hp B組:12.17±2.19個/5Hp;C組:11.56±0.87個/5Hp;A組與B、C組比較(P<0.01),有顯著差異,A>B、C.B、C組比較(P<0.05),也有統(tǒng)計學意義,B>C.結(jié)果排斥反應強弱為:A>B>C.三組軟骨都存活,血運建立,但B、C組有部分鈣化,其中A組管腔內(nèi)有肉芽組織,出現(xiàn)壞死,基本實變,B組少量肉芽組織,C組無.濃度為0.3%蛋白酶XⅣ適合移植段氣管脫上皮細胞
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