AQP1、VEGF在變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、研究目的：水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是一類(lèi)介導(dǎo)水、甘油、尿素等分子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的疏水性跨膜蛋白，廣泛分布于動(dòng)、植物及微生物，迄今為止在哺乳動(dòng)物體內(nèi)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了13個(gè)亞型，即AQP0-12[1]。AQP1表達(dá)于多種上皮組織和內(nèi)皮細(xì)胞。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知最強(qiáng)的血管通透因子[2]，其通透作用強(qiáng)于組胺1×106倍[3]，對(duì)血管生長(zhǎng)具有強(qiáng)烈的誘導(dǎo)作用，可增

2、生形成微血管，同時(shí)可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)小血管和毛細(xì)血管的通透作用，這種作用使血漿及部分大分子物質(zhì)（如纖維蛋白原）滲到血管外基質(zhì)中致使組織發(fā)生水腫。研究發(fā)現(xiàn)，兩者的異常表達(dá)和調(diào)節(jié)失控與某些疾病的炎性、水腫有關(guān)系，但在變應(yīng)性鼻炎（allergicthinitis，AR）中鮮有研究，且相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)照AQP1和AEGF在AR大鼠、正常大鼠以及地塞米松干預(yù)后AR大鼠鼻黏膜中的表達(dá)水平和兩者的相關(guān)性，從而進(jìn)一步探

3、討AQP1、AEGF在AR發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 研究方法：選取8周齡健康Wistar大鼠30只，雌雄各半，體重160g-200g。正常飼養(yǎng)一周后隨機(jī)分為三組，對(duì)照組，模型組和干預(yù)組，每組10只，以卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)經(jīng)典致敏法制作模型組和干預(yù)組Wistar大鼠AR模型，對(duì)照組以生理鹽水代替OVA，干預(yù)組大鼠造模成功后腹腔注射地塞米松，干預(yù)一周，模型組以等量生理鹽水代替。用組織化學(xué)方法觀(guān)察變應(yīng)性鼻炎的組織形態(tài)

4、學(xué)特征，運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法(SP法)和real-timePCR兩種方法分別測(cè)定各組鼻腔黏膜AQP1與VEGF的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以-x±s表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)三組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布且方差齊的進(jìn)行方差分析及多組均數(shù)差別的多重比較（LSD法）。偏態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行多組數(shù)據(jù)的Kruskal-Wallis檢驗(yàn)及Bonferroni法兩兩比較平均秩和，AQP1與VEGF雙變量符合正態(tài)分布，二者之間的相關(guān)性采用Pe

5、arson分析，反之采用Spearman秩相關(guān)。以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 研究結(jié)果：按行為學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，模型組和干預(yù)組大鼠均被激發(fā)出典型的癥狀，示造模成功。干預(yù)組經(jīng)過(guò)地塞米松干預(yù)后，偶有流涕，噴嚏和撓鼻現(xiàn)象基本消失。造模成功后上皮杯狀細(xì)胞明顯增多，上皮下層組織水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及嗜酸性細(xì)胞明顯增多，腺體增生，小血管增加、充血。干預(yù)組組織水腫，血管擴(kuò)張、腺體增生及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度均減輕。三組大鼠的癥狀學(xué)分析模型組評(píng)分高于

6、對(duì)照組和干預(yù)組。AQP1主要表達(dá)于大鼠鼻黏膜被覆上皮基底膜、血管內(nèi)皮細(xì)胞膜和腺體細(xì)胞內(nèi)，VEGF主要表達(dá)于小動(dòng)、靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞和腺體細(xì)胞內(nèi)。AQP1與VEGF在模型組中經(jīng)免疫組織化學(xué)和real-timePCR法檢測(cè)均高表達(dá)，干預(yù)組表達(dá)低于模型組。差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且兩者具有正相關(guān)性。
　　 結(jié)論：AQP1、VEGF在實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻粘膜的強(qiáng)表達(dá)，表明AQP1、VEGF參與了變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過(guò)程，與組織的水腫、腺體的過(guò)