肺癌患者免疫狀態(tài)的綜合評(píng)價(jià)及化療對(duì)其免疫狀態(tài)的影響.pdf

1、目的意義：肺癌的發(fā)病與死亡近10年來一直居惡性腫瘤之首位，嚴(yán)重威脅著人類的健康。且80％以上的肺癌患者確診時(shí)已屬晚期，全身化療為主的綜合治療成為主要治療方法?；煵粌H有效率非常有限，而且作為一種非特異性細(xì)胞毒治療方法，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)損傷人體的正常組織，個(gè)別患者不但未能從化療受益，反而導(dǎo)致病情進(jìn)展，生存時(shí)間縮短。這使我們意識(shí)到化療的負(fù)面影響，引起了對(duì)免疫治療的重視。但是由于目前除個(gè)別腫瘤外尚無資料證明單用生物療法可以治愈晚期癌癥，故

2、多作為輔助支持治療方法。由于缺乏有效的理論指導(dǎo)，免疫治療在臨床上存在著盲目用藥。本研究從三個(gè)層面綜合評(píng)價(jià)了肺癌患者的免疫狀態(tài)及化療對(duì)免疫狀態(tài)的影響，從而為肺癌患者的免疫治療提供理論依據(jù)。 材料和方法： (1)應(yīng)用流氏細(xì)胞儀對(duì)2002年至2006年4月間189例肺癌患者外周血中的免疫細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，運(yùn)用SAS6.02軟件以不齊方差t檢驗(yàn)分析外周血T細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞，在不同分期、KPS評(píng)分及單灶轉(zhuǎn)移與多灶轉(zhuǎn)移間的

3、差異，并著重以重復(fù)測(cè)量的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法分析了102例化學(xué)治療前后肺癌患者免疫狀態(tài)的變化，以t檢驗(yàn)分析了累積化療周期數(shù)>4周期與≤4周期兩組間的差別；并以一般2×2列聯(lián)表的卡方檢驗(yàn)方法分析可預(yù)測(cè)療效的免疫指標(biāo)。 (2)應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)2005年6月至2006年4月間103例肺癌患者外周血中活性T淋巴細(xì)胞：CD3+HLA-DR+、CD4+CD25+、CD8+CD28+細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，采用細(xì)胞內(nèi)因子測(cè)定法用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Th細(xì)胞亞群百分

4、數(shù)；運(yùn)用SAS6.02軟件以不齊方差t檢驗(yàn)分析了以上指標(biāo)在不同KPS評(píng)分、TNM分期及單灶與多灶轉(zhuǎn)移間的差別，并重點(diǎn)用重復(fù)測(cè)量的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法分析了83例肺癌患者化療前后各免疫指標(biāo)的變化，以不齊方差t檢驗(yàn)分析了累積化療周期數(shù)>4周期與≤4周期兩組間的差別；以一般2×2列聯(lián)表的卡方檢驗(yàn)方法分析可預(yù)測(cè)療效的免疫指標(biāo)。 (3)采用競(jìng)爭(zhēng)性定量RT-PCR技術(shù)對(duì)2005年6月至2006年4月間47例肺癌患者化療前及化療1周期結(jié)束后抗凝外周血

5、標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，并以重復(fù)測(cè)量的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法分析了化療前與化療1周期結(jié)束后三種殺傷因子FasL、Granzyme B和Perforin的轉(zhuǎn)錄水平，以及累積化療周期數(shù)>4周期與≤4周期兩組間殺傷因子轉(zhuǎn)錄水平的差別；采用一般2×2列聯(lián)表卡方檢驗(yàn)法分析三種殺傷分子基因表達(dá)水平的變化與療效的關(guān)系，以找出可預(yù)測(cè)療效的免疫指標(biāo)。 結(jié)果： 1，肺癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、B細(xì)胞和NK細(xì)胞水平及化療對(duì)其影響。 (1)化療1周期結(jié)束

6、后與化療前相比較，免疫指標(biāo)CD3+CD4+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，CD4+/CD8+比值較化療前下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)，NK細(xì)胞及B細(xì)胞水平降低無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)化療累積周期數(shù)>4周期組與≤4周期組比較，CD3+、CD4+細(xì)胞水平、CD4+/CD8+比值均下降，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CD8+細(xì)胞水平上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (3)各指標(biāo)對(duì)療效均無預(yù)測(cè)作用。 (4)不同TNM分期：Ⅳ期組與對(duì)照組相比較CD3+、CD3+CD

7、4+、NK細(xì)胞百分?jǐn)?shù)及CD4+/CD8+比值下降，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CD3-CD8+百分比上升且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，B淋巴細(xì)胞變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各免疫指標(biāo)差異于Ⅲ期與Ⅳ期間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (5)KPS評(píng)分<70分組較KPS評(píng)分≥70分組，CD4+/CD8+比值和NK細(xì)胞水平均下降，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。 (6)多灶轉(zhuǎn)移組與單灶轉(zhuǎn)移組比較，CD3+CD8+細(xì)胞水平升高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)；CD4+/CD8+比值

8、降低且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。 2，肺癌患者外周血中活性T淋巴細(xì)胞的水平及化療對(duì)其影響。 (1)化療1周期結(jié)束后與化療前相比，CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞比例上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)，其它指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)化療累積周期數(shù)>4周期組與≤4周期組比較， CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+及Th1細(xì)胞水平下降且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CD4+CD25+及Th2細(xì)胞水平均上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

9、 (3)可預(yù)測(cè)療效的指標(biāo)：CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞上升則療效差，下降療效好，其他指標(biāo)均對(duì)療效無預(yù)測(cè)作用。 (4)不同TNM分期：Ⅲ期組與對(duì)照組比較，只有CD3+HLA-DR+細(xì)胞水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Ⅳ期組與對(duì)照組比較，CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+細(xì)胞水平下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， CD4+CD25+與Th2細(xì)胞水平上升，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，rh0和Th1細(xì)胞水平變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ⅳ期組與Ⅲ期組比較，Th1細(xì)胞

10、水平下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (5)KPS評(píng)分<70分組較KPS評(píng)分≥70分組，CD4+CD25+細(xì)胞及Th2細(xì)胞水平上升，而CD8+CD28+細(xì)胞水平下降，且皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。(6)多灶轉(zhuǎn)移組與單灶轉(zhuǎn)移組比較，免疫指標(biāo)CD8+CD28+細(xì)胞水平下降而CD4+CD25+、Th2細(xì)胞水平均上升，變化均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。 3，肺癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞FasL、Granzym B、Perforin基因表達(dá)定

11、量分析及化療對(duì)其影響。 (1)化療1周期結(jié)束后與化療前比較，三種殺傷效應(yīng)因子FasL、Granzyme B和Perforin基因轉(zhuǎn)錄水平均下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)化療累積周期數(shù)>4周期組與≤4周期組比較，殺傷效應(yīng)因子FasL、Granzyme B和Perforin基因轉(zhuǎn)錄水平均下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)Granzyme B、FasL的基因表達(dá)水平上升則療效好，下降療效差；Perforin對(duì)療效無預(yù)測(cè)作用。 結(jié)

12、論： 1，化療對(duì)免疫狀態(tài)的影響： ①化療1周期結(jié)束后，CD4+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)、CD4+/CD8+比值及三種殺傷效應(yīng)分子FasL、Granzyme B和Perforin基因轉(zhuǎn)錄水平呈下降趨勢(shì)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞比例上升，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果提示化療1周期結(jié)束后較化療前，免疫抑制加重。 ②化療累積周期數(shù)>4周期組忠者與≤4周期組比較，CD3+、CD4+、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28

13、+及Th1細(xì)胞水平及CD4+/CD8比值下降，CD8+、CD4+CD25+、Th2細(xì)胞水平上升均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三種殺傷效應(yīng)分子FasL、Granzyme B和Perforin基因轉(zhuǎn)錄水平呈下降趨勢(shì)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果提示化療累積周期數(shù)增多，細(xì)胞免疫抑制程度加重。 ③CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞上升則療效差，下降則療效好；而殺傷因子GranzymeB、FasL的基因表達(dá)水平上升則療效好，下降則療效差，Perforin基因轉(zhuǎn)錄

14、水平與療效無關(guān)。 2，免疫狀態(tài)與一般情況的關(guān)系： ①免疫狀態(tài)受到TNM分期的影響：Ⅲ期組患者與對(duì)照組比較，NK細(xì)胞、CD3+HLA-DR+細(xì)胞水平及CD4+/CD8+比值下降，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Ⅳ期組較對(duì)照組，除上述兩指標(biāo)外，CD3+、CD3+CD4+、NK、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+細(xì)胞水平及CD4+/CD8+比值下降而CD3+CD8+、CD4+CD25+與Th2細(xì)胞水平上升均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Ⅳ期組與Ⅲ期組

15、比較，只有Th1細(xì)胞水平下降且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果提示Ⅳ期組肺癌患者較Ⅲ期組免疫抑制程度加重。 ②受到KPS評(píng)分的影響：KPS評(píng)分<70分組較KPS評(píng)分≥70分組，CD4+/CD8+比值和NK、CD8+CD28+細(xì)胞水平下降而CD4+CD25+細(xì)胞及Th2細(xì)胞水平上升，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果提示KPS評(píng)分低的肺癌患者免疫抑制程度較評(píng)分高的患者嚴(yán)重。 ③多灶轉(zhuǎn)移組與單灶轉(zhuǎn)移組比較，CD8+CD28+細(xì)胞水平及CD4+/