關(guān)于胃食管反流與支氣管哮喘的關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討胃食管反流能否導(dǎo)致類似哮喘樣變化以及加重支氣管哮喘可能的機(jī)制
　　方法：
　　1、隨機(jī)將選擇的100只雄性小鼠平均分成為5組。A組：哮喘對(duì)照組，B組：胃食管反流對(duì)照組，C組：胃食管反流組，D組：哮喘組，E組：胃食管反流合并哮喘組。A組，用生理鹽水進(jìn)行霧化吸入并腹腔注射；B組，用生理鹽水進(jìn)行灌胃； C組，第1天開始每天予以一次1毫升的0.5％的胃蛋白酶（Pepsin）與0.1mmol/L的鹽酸（HCL）溶液緩慢灌注,

2、Ph值為3.0，連續(xù)21天；D組、E組,于第1、8、15天，用新鮮配制的20μg卵清蛋白(ovalbumin，OVA)+1mg氫氧化鋁（Al(OH)3）共0.2ml，腹腔注射致敏，并于第22天開始予每天1次，每次30分鐘予以2％0VA生理鹽水溶液霧化吸入，每天1次，連續(xù)7天。E組，從第16天開始，在腹腔注射基礎(chǔ)上，每天灌注1次，每次30分鐘的0.5％的胃蛋白酶（Pepsin）與0.1mmol/L的鹽酸（HCL）溶液,連續(xù)21天。

3、　　2、D組、E組在卵清蛋白（OVA）攻擊結(jié)束之后，再一次持續(xù)霧化吸入30分鐘的OVA生理鹽水（10mg/ml）溶液，予以組胺在小鼠末次灌胃結(jié)束的24小時(shí)內(nèi)，激發(fā)哮喘。
　　3、對(duì)氣道阻力在各組小鼠中的變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并觀察小鼠氣道反應(yīng)性的變化；鏡檢肺泡灌洗液涂片，計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞在灌洗液細(xì)胞總數(shù)中所占比例；觀察HE染色后的肺組織及食管病理切片的病理形態(tài)變化；對(duì)脾臟中的IFN-γ，IL-4，以及Th1/Th2比例變化，

4、應(yīng)用流式細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1、支氣管激發(fā)試驗(yàn)后小鼠氣道阻力的變化，A組和B組小鼠無(wú)氣道高反應(yīng)發(fā)生，C組、D組、E組均有氣道高反應(yīng)性發(fā)生，與A組、B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；E組的氣道阻力明顯高于C組、D組，差異比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；C與D組比較差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2、各組小鼠IL-4值比較：A組、B組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與

5、A組、B組相比較，小鼠的IL-4值在C組、D組和E組中明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；C組、D組低于E組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；C組與D組比較，D組略比C組高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3、各組小鼠IFN-γ比較：C組、D組、E組與A組、B組比較，IFN-γ顯著降低，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），E組低于C組、D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），A組與B組、C組與D組之間比較差異

6、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　4、各組小鼠Th1/Th2比值比較：A組與B組，C組與D組、E組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組比值下降，與A組與B組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），E組較C組、D組比值下降明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），C組與D組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　5、各組小鼠BALF中EOS數(shù)比較：A組、B組偶見單個(gè)EOS，C組、D組、E組可見大量的

7、EOS，與A組、B組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），E組與 C組、D組比較，EOS數(shù)占細(xì)胞總數(shù)百分比明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。A組、B組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），D組EOS數(shù)占細(xì)胞總數(shù)百分比高于C組，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　6、各組小鼠肺組織及食管病理切片：C組、D組、E組可見管腔變形、上皮細(xì)胞脫落、基底膜增厚，周圍可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，粘膜下層可見血管充血阻塞、水腫，肺泡腔

8、擴(kuò)張、肺泡壁變薄、斷裂。A組、B組支氣管管腔規(guī)則，管壁主要是假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞，無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。C組、E組食管病理切片可見下段食管粘膜下水腫明顯，伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，角化亢進(jìn)，其余各組未見病理變化。
　　結(jié)論：
　　1、胃食管反流可以引起氣道反應(yīng)性升高。
　　2、胃食管反流可以引起小鼠氣道內(nèi)的以嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞為主的浸潤(rùn)。
　　3、胃食管反流可以引起小鼠氣道發(fā)生類似哮喘樣變化的病理改變。
　　4、