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文檔簡介
1、目的:探討胃食管反流能否導致類似哮喘樣病理生理變化及發(fā)生機制
方法:選擇60只周齡為6~8的雄性BALB/c小鼠,采用隨機分組的方法將這60只小鼠分為4組,每組小鼠為15只:A組(胃食管反流對照組)、B組(哮喘對照組)、C組(胃食管反流組)、D組(哮喘組)。C組,從第1天開始用灌胃器緩慢灌注0.1mmol/L鹽酸+0.5%胃蛋白酶溶液,Ph值3,每次灌胃1ml,每天一次,連續(xù)21天。D組,用新鮮配制的20μg卵清蛋白(oval
2、bumin,OVA)+1mg氫氧化鋁共0.2ml于第1、8、15天腹腔注射一次致敏,第22天開始霧化吸入2%OVA生理鹽水溶液,每天吸入1次,每次30分鐘連續(xù)7天。A組用生理鹽水進行灌胃。B組用生理鹽水進行腹腔注射和霧化吸入。
卵清蛋白攻擊結束1周后再次給予OVA(10mg/ml)生理鹽水溶液霧化吸入30分鐘,與灌胃組小鼠在末次灌胃后,24小時內用組胺進行支氣管激發(fā)試驗,并測定每組小鼠的氣道阻力變化,觀察是否產生氣道高反應性;
3、進行肺泡灌洗液涂片,鏡下計數肺泡灌洗液中嗜酸性粒細胞和中性粒細胞所占的百分比;采用流式細胞術測定脾臟細胞中 IL-4、IFN-γ,Th1/Th2比值的變化;肺組織以及食管病理切片經HE染色后觀察病理形態(tài)變化。
結果:①進行氣道阻力檢測后,A、B組的小鼠均未發(fā)生氣道高反應性,C、D組在行支氣管激發(fā)試驗后氣道阻力比值比A、B組增高,比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),C、D組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。②4組小鼠I
4、L-4值得比較,C、D組小鼠IL-4較A、B組明顯增高,比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),C、D組之間,A、B組之間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。③C、D組小鼠IFN-γ較A、B組明顯降低,比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),C、D組之間,A、B組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。④C、D組小鼠Th1/Th2比值明顯下降,與A、B組比較具有差異性,有統(tǒng)計學意義。C、D組之間,A、B組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>
5、0.05)。⑤4組小鼠BALF中EOS數占細胞總數百分比比較,A、B組 BALF中僅偶見單個嗜酸性粒細胞,C、D組可見大量的嗜酸性粒細胞。與A、B組相比較,C、D組中EOS數占細胞總數百分比明顯增多,比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。C組與D組相比較,D組中EOS數占細胞總數百分比有所升高,但無統(tǒng)計差異性(P>0.05)。A組、B組、C組、D組四組之間相互比較中性粒細胞百分比無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。⑥肺組織病理切片中可以觀察
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