USPIO增強MR活體內(nèi)監(jiān)測大鼠局部腦缺血再灌注損傷的炎癥反應.pdf

1、背景與目的:腦缺血是常見的腦血管病，其致殘率高。因此，活體研究腦缺血早期的病理變化對于診斷、治療措施的選擇、藥物的開發(fā)及療效的評價有重要意義。大量實驗證明局部腦缺血－再灌注可引起腦內(nèi)小膠質(zhì)細胞活化及血源性粒細胞浸潤，這些細胞在局部聚集并釋放一些炎癥因子加重缺血區(qū)腦組織的損傷，使梗死范圍進一步擴大，這表明炎癥反應在腦缺血－再灌注繼發(fā)性損傷中起重要作用。以往人們研究腦缺血炎癥反應的變化通常是在獲得腦缺血模型后處死實驗動物，然后制作病理切片，

2、這不僅需要大量的動物，最大的問題是不能在同一個體內(nèi)連續(xù)、動態(tài)觀察，針對腦缺血炎癥反應的治療新舉措要求無創(chuàng)評價炎性細胞的激活、浸潤。超微超順性氧化鐵粒子(ultrasmall particles of iron oxide，USPIO)作為單核巨噬細胞系統(tǒng)(mononuclearphagocytotic system,MPS)特異的MR對比劑近年來受到重視，應用這種成像技術可以在活體內(nèi)監(jiān)測炎癥反應，目前國內(nèi)尚未見此類報道，本實驗旨在探討應

3、用USPIO增強MR在活體內(nèi)動態(tài)監(jiān)測局部腦缺血－再灌注損傷炎癥反應的變化。 材料與方法:清潔級雄性SD大鼠36只，月齡4—5月，體重270—320g。隨機分為兩組：假手術組(n=6)，模型組(n=30)。模型組再細分為：氯化四唑(TTC)染色組(n=6)，USPIO注射后第24h、48h、72h MRI觀察組(每組6只)和對照組(大鼠尾靜脈注射等量的生理鹽水替代USPIO)(n=6)。 參照longa法制作大腦中動脈阻塞

4、模型，模型成功后，2h后向外輕提線栓實現(xiàn)再灌注，再灌注2h后行首次MR掃描，隨后經(jīng)大鼠尾靜脈注射造影劑USPIO(300μmmolFe/kg)，實驗過程中保持大鼠肛溫在37±1℃。假手術組不插入線栓，其余步驟同手術組。分別于注射USPIO后第24h、48h、72h掃描，MR信號改變采用病變側信號/對側相應區(qū)域信號計算方法。每組動物在行最后一次掃描后立即過量麻醉處死，斷頭取腦，標本送常規(guī)病理及免疫組化檢查，光鏡觀察。實驗期間動物如有死亡，

5、予以補充。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件包進行正態(tài)性檢驗、方差分析等處理，以均數(shù)士標準差表示，P<0.05視為有統(tǒng)計學意義。 結果:模型組缺血區(qū)在T2WI上呈高信號，T1WI不敏感。TCC染色缺血梗死部位淡染，和正常腦組織(染成紅色)對比明顯。USPIO T1WI增強缺血區(qū)呈正性強化，表現(xiàn)為高信號，T2WI增強呈負性強化，表現(xiàn)為低信號。USPIO增強掃描的時間信號變化規(guī)律為：T1WI增強在24h最明顯(p<0.002)，

6、T2WI增強在48h最明顯(p<0.001)，無論T1增強還是T2增強均表現(xiàn)為強化范圍逐漸增大的趨勢，但T1增強較T2增強更敏感，顯示的強化范圍更大，假手術組和對照組中信號無此變化。MRI和病理對照研究顯示MRI強化區(qū)組織CD68免疫組化染色見大量增生活躍染成黃色的小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞，對照組無類似改變。普魯士蘭染色顯示藍染的鐵粒子不僅位于梗死灶周邊巨噬細胞內(nèi)，還可見于壞死區(qū)。 結論:1．本研究進一步證實，應用USPIO這種巨噬