URATv1與尿酸結石形成相關性研究.pdf

1、尿酸結石是尿路結石中比較常見的結石類型。文獻顯示在我國尿酸結石的發(fā)病率約為15％，國外報道5％～39．5％。由于尿酸結石的高復發(fā)率，所以，了解尿酸結石的發(fā)病機制，從而對有效的防治尿酸結石具有重要的臨床和社會意義。目前普遍研究觀點認為尿酸結石形成與高尿酸尿癥相關。而原尿中的尿酸重吸收減少會導致尿酸在原尿中蓄積，進而引起尿尿酸濃度增加。URATv1是位于人腎小管刷狀緣有機離子轉運體，主要負責腎小管上皮細胞膜表面的尿酸轉運，在尿酸的重吸收當中

2、占有重要地位。當其功能發(fā)生異常則可能會導致尿酸的重吸收減少，增加原尿中尿酸含量。文獻顯示在狗敲除編碼URATv1蛋白的SLC2A9基因可以導致高尿酸尿癥，針對臨床標本的統(tǒng)計學分析結果發(fā)現(xiàn)SLC2A9與尿路結石的形成有相關性，但目前尚未有研究報道人的URATv1功能異常對尿酸轉運能力的影響，以及與高尿酸尿癥的關系。
　　目的：研究腎小管上皮細胞HK-2中尿酸轉運體URATv1表達受抑制時該細胞轉運尿酸能力的影響。
　　材料和方

3、法：用RNA干擾技術（RNAi）干擾URATv1轉錄，并帶有綠色熒光蛋白的siRNA質粒轉染入HK-2細胞。熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白的表達量，并進一步用熒光定量PCR分別檢測URATv1的m RNA表達量變化，以及western blot檢測URATv1蛋白的表達量，最后用尿酸試劑盒檢測HK-2細胞尿酸重吸收能力的變化。
　　結果：轉染后HK-2細胞成功表達綠色熒光蛋白，后續(xù)檢測發(fā)現(xiàn)siRNA干擾后HK-2細胞內URATv1在