氟化鎂陶瓷AZ31B鎂合金體外細胞毒性及干預成骨細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 近年來，隨著科學技術(shù)的進步，對金屬植入物生物相容性的要求進一步提高，將鎂合金及鎂基復合材料作為骨外科植入材料的研究受到了國內(nèi)外學者的關(guān)注，成為了新的研究熱點，氟化鎂陶瓷 AZ31B（F-Mg）是中國科學院金屬研究所新近研發(fā)的一種含表面生物活性涂層的鎂基復合材料，本研究對氟化鎂陶瓷 AZ31B 鎂合金的細胞毒性及其對成骨細胞增殖的影響進行了研究，為表面改性鎂合金應用于矯形外科臨床提供實驗依據(jù)。
　　 方法：<

2、br>　　 參照 GB/T16886.5-2003/ISO 10993-5:1999 醫(yī)療器械生物學評價第5部分：體外細胞毒性試驗的評價標準和要求，以鈦合金（Ti-6Al-4V）作為陰性對照材料，采用人成骨樣MG63細胞，用不同濃度材料浸提液（100％、75％、50％）與細胞共培養(yǎng)等方式進行細胞毒性測試，采用 MTT 比色法測定各實驗組中與材料浸提液共培養(yǎng)48小時后成骨細胞的相對增殖率來判定材料對細胞的毒性程度，并進行統(tǒng)計學分析比較；

3、用掃描電鏡、熒光染色方法觀察材料表面成骨細胞的粘附情況并同時進行材料表面能譜分析；用流式細胞儀檢測成骨細胞增殖、凋亡及材料對成骨細胞細胞周期的影響；用免疫細胞化學方法觀察人成骨樣MG63細胞與F-Mg、Ti-6Al-4V 共培養(yǎng)4小時后，與成骨細胞粘附、增殖、分化密切相關(guān)的MAPK 信號轉(zhuǎn)導通路中 ERK 信號蛋白的表達情況。
　　 結(jié)果：
　　 F-Mg 不同濃度浸提液的細胞毒性級均為0級，與空白對照組比較差異均無顯著

4、性。在直接接觸實驗中，SEM 及熒光染色示成骨細胞在氟修飾的鎂合金表面粘附生長情況良好，無明顯生長抑制表現(xiàn)；FCM 示 F-Mg 材料組成骨細胞凋亡率0.0018±0.0004，與空白對照組相比差異無顯著性，Ti-6Al-4V 組凋亡率為0.0024±0.0003，與F-Mg組相比差異有顯著性；免疫細胞化學實驗結(jié)果表明與空白對照組及Ti-6Al-4V 組相比 F-Mg 組 ERK 表達增強，提示氟修飾的鎂合金可能增強成骨細胞與材料的粘附