氟化鎂陶瓷AZ31B鎂合金體外細(xì)胞毒性及干預(yù)成骨細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，對(duì)金屬植入物生物相容性的要求進(jìn)一步提高，將鎂合金及鎂基復(fù)合材料作為骨外科植入材料的研究受到了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注，成為了新的研究熱點(diǎn)，氟化鎂陶瓷 AZ31B（F-Mg）是中國(guó)科學(xué)院金屬研究所新近研發(fā)的一種含表面生物活性涂層的鎂基復(fù)合材料，本研究對(duì)氟化鎂陶瓷 AZ31B 鎂合金的細(xì)胞毒性及其對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響進(jìn)行了研究，為表面改性鎂合金應(yīng)用于矯形外科臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：<

2、br>　　 參照 GB/T16886.5-2003/ISO 10993-5:1999 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和要求，以鈦合金（Ti-6Al-4V）作為陰性對(duì)照材料，采用人成骨樣MG63細(xì)胞，用不同濃度材料浸提液（100％、75％、50％）與細(xì)胞共培養(yǎng)等方式進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)試，采用 MTT 比色法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組中與材料浸提液共培養(yǎng)48小時(shí)后成骨細(xì)胞的相對(duì)增殖率來(lái)判定材料對(duì)細(xì)胞的毒性程度，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較；

3、用掃描電鏡、熒光染色方法觀察材料表面成骨細(xì)胞的粘附情況并同時(shí)進(jìn)行材料表面能譜分析；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)成骨細(xì)胞增殖、凋亡及材料對(duì)成骨細(xì)胞細(xì)胞周期的影響；用免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察人成骨樣MG63細(xì)胞與F-Mg、Ti-6Al-4V 共培養(yǎng)4小時(shí)后，與成骨細(xì)胞粘附、增殖、分化密切相關(guān)的MAPK 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中 ERK 信號(hào)蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 F-Mg 不同濃度浸提液的細(xì)胞毒性級(jí)均為0級(jí)，與空白對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著

4、性。在直接接觸實(shí)驗(yàn)中，SEM 及熒光染色示成骨細(xì)胞在氟修飾的鎂合金表面粘附生長(zhǎng)情況良好，無(wú)明顯生長(zhǎng)抑制表現(xiàn)；FCM 示 F-Mg 材料組成骨細(xì)胞凋亡率0.0018±0.0004，與空白對(duì)照組相比差異無(wú)顯著性，Ti-6Al-4V 組凋亡率為0.0024±0.0003，與F-Mg組相比差異有顯著性；免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與空白對(duì)照組及Ti-6Al-4V 組相比 F-Mg 組 ERK 表達(dá)增強(qiáng)，提示氟修飾的鎂合金可能增強(qiáng)成骨細(xì)胞與材料的粘附