外源黃體酮對(duì)孕鼠卵巢子宮形態(tài)和胚胎發(fā)育的影響.pdf

1、本文以妊娠金黃地鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究外源黃體酮對(duì)孕鼠子宮形態(tài)和胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)生機(jī)制。主要進(jìn)行了下述實(shí)驗(yàn)： ①外源黃體酮注射后卵巢、子宮形態(tài)學(xué)微觀和電鏡超微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察實(shí)驗(yàn)；②子宮內(nèi)膜游離面上皮細(xì)胞親和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)凝集素分子探針觀察實(shí)驗(yàn)；③免疫印跡法半定量測(cè)定ConA、PNA、UEA等凝集素蛋白含量實(shí)驗(yàn)；④外源黃體酮注射1～6天后同位素放射免疫對(duì)動(dòng)物血清激素FSH、LH、E2、P濃度進(jìn)行定量分析觀察實(shí)驗(yàn)。⑤停藥后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)情

2、周期和生育能力恢復(fù)觀察實(shí)驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：①動(dòng)物注射黃體酮停藥6天后發(fā)現(xiàn)妊娠子宮串珠樣隆起吸收而消失；子宮內(nèi)膜游離面上皮細(xì)胞變低，細(xì)胞順序排列紊亂；細(xì)胞游離面纖毛消失；上皮下固有層小血管和毛細(xì)血管發(fā)生出血現(xiàn)象。 ②停藥6天后利用凝集素分子探針標(biāo)記子宮黏膜上皮細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)ConA、PNA、UEA等凝集素受體表達(dá)出現(xiàn)明顯變化，ConA、PNA、UEA受體合成明顯增多，呈現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng)。 ③停藥6天后，利用免疫印跡法(i

3、mmunoblot)進(jìn)行半定量測(cè)定，發(fā)現(xiàn)ConA、PNA、UEA等凝集素大分子蛋白含量增加，與對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)。 ④停藥第1～6天后利用同位素放射免疫法測(cè)定，發(fā)現(xiàn)血清激素濃度呈現(xiàn)梯度降低，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組有顯著性差異(P＜0.05)：停藥后第1～6天血清激素濃度(x±sn=20)組別(d)FSH(IU/L)LH(IU/L)E2(ρ/μg·/.L-1)(ρ/μg·/.L-1)對(duì)照組2.94±0.024*1.54

4、±0.048*7.1±0.024*0.25±0.041*實(shí)驗(yàn)組11.76±0.011122±0.0296.95±0.0030.22±0.01621.34±0.0131.12±0.0525.65±0.0040.21±0.01631.16±0.0151.10±0.0395.25±0.0020.12±0.01541.06±0.0111.08±0.0225.13±0.0210.07±0.01250.96±0.0240.82±0.0325.05±

5、0.0120.04±0.02160.76±0.0130.22±0.0594.95±0.0070.02±0.001注：對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組停藥后6d比較*P＜0.05⑤在停藥后第10天實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可恢復(fù)動(dòng)情周期，合籠交配生仔。顯示動(dòng)情周期抑制的生物學(xué)效應(yīng)是可恢復(fù)的。 上述結(jié)果表明，外源黃體酮可能通過負(fù)反饋?zhàn)饔?，抑制了下丘腦-垂體促性腺激素的分泌，使內(nèi)源性卵巢黃體激素合成分泌降低，子宮內(nèi)膜處于激素失調(diào)節(jié)狀態(tài)。微觀和電鏡超微形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察顯示，子

6、宮內(nèi)膜的形態(tài)學(xué)發(fā)生異常；當(dāng)子宮內(nèi)膜處于激素失調(diào)節(jié)狀態(tài)時(shí)，子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞游離面的凝集素受體合成明顯增加。正常凝集素受體的含量和分布是胚胎植入、發(fā)育的必需因素。外源黃體酮通過對(duì)下丘腦的負(fù)反饋?zhàn)饔?，改變了卵巢和子宮形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，凝集素受體不能正常表達(dá)，胚胎的滋養(yǎng)層細(xì)胞與子宮內(nèi)膜細(xì)胞信息傳遞受阻，細(xì)胞間的識(shí)別發(fā)生誤導(dǎo)，造成胚胎細(xì)胞黏著、定位錯(cuò)誤，因而抑制了胚胎生存發(fā)育。 本實(shí)驗(yàn)表明，黃體酮血清濃度降低通過凝集素受體表達(dá)影響和改變?nèi)焉镒訉m