基于微流控共培養(yǎng)條件下膀胱腫瘤細(xì)胞能量代謝特點(diǎn)的研究.pdf

1、目的：系統(tǒng)分析膀胱腫瘤細(xì)胞及腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞能量代謝過(guò)程中線粒體相關(guān)蛋白質(zhì)的改變，并探討膀胱腫瘤細(xì)胞能量代謝特點(diǎn)。
　　方法：（1）應(yīng)用微流控芯片三維立體培養(yǎng)技術(shù)建立成纖維細(xì)胞及膀胱腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系；（2）用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)計(jì)算不同組別細(xì)胞培養(yǎng)后培養(yǎng)液內(nèi)乳酸的濃度（3）通過(guò)免疫熒光染色方法定性分析線粒體相關(guān)蛋白的改變；（4）通過(guò)蛋白印跡法定量分析線粒體相關(guān)蛋白的改變；（4）應(yīng)用spss軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：（1）

2、乳酸濃度測(cè)定：結(jié)果由高到低依次為實(shí)驗(yàn)組、膀胱腫瘤細(xì)胞對(duì)照組、成纖維細(xì)胞對(duì)照組。（2）蛋白定性結(jié)果：對(duì)照組成纖維細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較膀胱腫瘤強(qiáng)；實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤線粒體相關(guān)蛋白熒光較成纖維強(qiáng)；實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較對(duì)照組強(qiáng)；對(duì)照組成纖維細(xì)胞線粒體相關(guān)蛋白熒光較實(shí)驗(yàn)組強(qiáng)。（3）蛋白定量結(jié)果：對(duì)照組線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在膀胱腫瘤中較成纖維細(xì)胞明顯降低（p<0.05）；實(shí)驗(yàn)組膀胱腫瘤線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在膀胱腫瘤中較成纖維細(xì)胞明

3、顯增高（p<0.05）；成纖維細(xì)胞的線粒體相關(guān)蛋白的表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組中較對(duì)照組的明顯降低（p<0.05）；膀胱腫瘤細(xì)胞中的線粒體相關(guān)蛋白在實(shí)驗(yàn)組中較對(duì)照組的明顯增高（p<0.05）。
　　結(jié)論：膀胱腫瘤細(xì)胞的能量代謝并不完全是“瓦伯格”效應(yīng)所認(rèn)為的即便在氧供充足的條件下腫瘤仍以糖酵解的方式功能，在氧供充足的條件下膀胱腫瘤能量代謝也有高效氧化磷酸化的過(guò)程，同時(shí)也有腫瘤相關(guān)細(xì)胞有著密切聯(lián)系，即腫瘤能量代謝是通過(guò)誘導(dǎo)毗鄰的間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行糖酵解