Foxp3在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、研究背景與目的：肺癌是最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率在全球范圍內(nèi)逐年上升，已成為當(dāng)今癌癥死亡的主要原因，雖然近年來對(duì)肺癌發(fā)病機(jī)制研究有了很大進(jìn)展，大多數(shù)患者的預(yù)后仍然很差。肺癌患者的預(yù)后主要取決于其疾病的分期，但即使相同TNM分期的患者手術(shù)后的生存率也不同，表明存在影響肺癌預(yù)后的其他因素，因此有必要尋求能夠判斷預(yù)示肺癌發(fā)生、發(fā)展和手術(shù)預(yù)后的另一些方法。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)是一類具有免疫調(diào)節(jié)功能的T細(xì)胞亞群，主要是CD4+CD25

2、+Treg細(xì)胞，由Sakaguchi在研究自身免疫性疾病的小鼠模型中鑒定出高表達(dá)CD25的CD4+T細(xì)胞亞群而首次報(bào)道。CD4+CD25+Treg細(xì)胞具有低反應(yīng)性和免疫抑制功能，通過細(xì)胞與細(xì)胞間接觸的方式和分泌調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10、TGF-β等方式抑制CD4+和CD8+T細(xì)胞的分化和增殖。Treg細(xì)胞通過抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞保護(hù)宿主免受自身免疫性疾病，這樣，Treg細(xì)胞也能阻斷機(jī)體抗腫瘤免疫，該亞群細(xì)胞與腫瘤的關(guān)系已成為近年來腫瘤免

3、疫逃逸機(jī)制中的研究熱點(diǎn)。最近研究發(fā)現(xiàn)叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子Foxp3特異性表達(dá)于小鼠和人類CD4+CD25+Treg細(xì)胞。Sakaguchi將Foxp3基因?qū)胄∈蠛骉細(xì)胞數(shù)量明顯減少，并且這些T細(xì)胞增殖能力和溶細(xì)胞能力低下，小鼠免疫系統(tǒng)處于抑制狀態(tài)，因此可以證實(shí)Foxp3在CD4+CD25+Treg細(xì)胞的發(fā)育和功能維持中起重要作用，F(xiàn)oxp3的表達(dá)不是T細(xì)胞活化的結(jié)果，僅僅特異性表達(dá)于Treg細(xì)胞，可作為CD4+CD25+Treg細(xì)胞的特異性

4、標(biāo)記，而且Treg細(xì)胞上的Foxp3特異性表達(dá)與該細(xì)胞行使免疫抑制功能有關(guān)。因此，在腫瘤組織中研究Foxp3表達(dá)可了解CD4+CD25+Treg細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的抑制作用，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞在腫瘤局部募集、擴(kuò)增，在抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮抑制效應(yīng)，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。在肺癌腫瘤微環(huán)境中Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)量升高，影響肺癌患者預(yù)后，本研究以Foxp3作為腫瘤生物標(biāo)記物，采用免疫組化方法檢測(cè)Foxp3在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)組織中的

5、表達(dá)，探討其與肺癌臨床病理特征的關(guān)系和預(yù)后意義。 方法：回顧性分析67例術(shù)前未進(jìn)行化療或放療的NSCLC病人的手術(shù)切除標(biāo)本，男36例，女31例；年齡≥60歲38例，<60歲29例；腺癌39例，鱗癌28例；低分化29例，中-高分化38例；Ⅰ期25例，Ⅱ16例，ⅢA期12例，ⅢB期6例，Ⅳ期8例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例。采用免疫組化Envision方法檢測(cè)肺癌組織中Foxp3表達(dá)以用來反映具有免疫抑制功能的。Treg

6、細(xì)胞在肺癌腫瘤微環(huán)境中的浸潤(rùn)狀態(tài)。另外取13例肺部良性病變手術(shù)標(biāo)本和12例正常肺組織(距離腫塊邊緣5厘米以上正常肺組織或另一葉肺組織)作為對(duì)照。對(duì)67例NSCLC患者進(jìn)行生存期分析，生存日期為自手術(shù)日至死亡日或至本次隨訪時(shí)仍存活者，以月為單位。數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，組間的比較采用X2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，單因素生存分析采用壽命表分析法，差異顯著性采用Gehan比分檢驗(yàn)法，多因素分析采用COX比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模

7、型。 結(jié)果： 1、Foxp3陽(yáng)性定位于肺癌組織中細(xì)胞胞核，陽(yáng)性染色成棕黃色，在肺癌組織中Foxp3陰性表達(dá)46例(68.66％)，陽(yáng)性表達(dá)21例(31.34％)，對(duì)照組Foxp3陽(yáng)性表達(dá)率為0.00％。Foxp3表達(dá)在肺癌患者不同年齡、性別、組織學(xué)類型、分化程度、腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間均無顯著差異。 2、單變量生存分析顯示臨床分期、分化程度影響NSCLC患者預(yù)后，Ⅰ期、Ⅱ期、ⅢA期、ⅢB期以上4組比較

8、生存率顯示隨臨床分期升級(jí)，總體生存率降低，存在顯著差異(P=0.000)；低分化者較中一高分化者總體生存率低，存在顯著差異(P=0.029)。年齡、性別、組織學(xué)類型、腫瘤大小、Foxp3表達(dá)在NSCLC患者遠(yuǎn)期生存之間無顯著差異。在Ⅰ期+Ⅱ期肺癌中，F(xiàn)oxp3陽(yáng)性表達(dá)組與陰性表達(dá)組比較生存率，F(xiàn)oxp3陽(yáng)性表達(dá)組總體生存率明顯降低(P=0.009)，F(xiàn)oxp3陽(yáng)性表達(dá)為影響Ⅰ期、Ⅱ期肺癌遠(yuǎn)期生存的不利因素。年齡、性別、分化程度、組織學(xué)類

9、型、腫瘤大小與早期肺癌預(yù)后無關(guān)。 3、采用COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行多因素生存分析，臨床分期為NSCLC的獨(dú)立預(yù)后因素，F(xiàn)oxp3表達(dá)為Ⅰ期、Ⅱ期肺癌獨(dú)立預(yù)后因素。 結(jié)論: 1 Foxp3表達(dá)在肺癌臨床分期之間比較無顯著差異，表明Foxp3在肺癌早期即可表達(dá)。 2 Foxp3為影響Ⅰ期、Ⅱ期肺癌遠(yuǎn)期生存的不利因素，檢測(cè)肺癌組織中Foxp3表達(dá)作為判斷Ⅰ期、Ⅱ期NSCLC手術(shù)預(yù)后的腫瘤生物標(biāo)記物。 3