ISSR標(biāo)記在紫菜葉狀體種間遺傳關(guān)系及其生殖特征分析中應(yīng)用.pdf

1、紫菜屬具有典型的異型世代交替循環(huán)的生活史，即大型配子體世代(葉狀體)和微型孢子體世代(絲狀體)。在紫菜栽培生產(chǎn)中，栽培與收獲的對(duì)象是葉狀體，即經(jīng)濟(jì)利用對(duì)象為單倍體的葉狀體，屬配子發(fā)育形態(tài)(配子體)；絲狀體是合子的發(fā)育形態(tài)(孢子體)，為栽培生產(chǎn)中種苗培育的對(duì)象。紫菜葉狀體比較容易采集，且能提供一些明顯的外部形態(tài)特征，所以目前紫菜分類學(xué)研究主要以葉狀體形態(tài)特征為依據(jù)。然而紫菜的表型特征很有限，且這些表型特征是基因型與環(huán)境相互作用的產(chǎn)物，這給

2、紫菜的分類和系統(tǒng)學(xué)研究帶來很多困難和不確定性。核酸DNA是最原始的遺傳物質(zhì)，各種DNA分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)分類學(xué)和系統(tǒng)學(xué)研究中的不足。各種DNA分子標(biāo)記技術(shù)在紫菜中也得到了廣泛地應(yīng)用，而在我國大多以紫菜絲狀體為材料開展了類似的研究工作，本文在國內(nèi)首次利用紫菜葉狀體材料，從核酸水平上探討了我國4種常見紫菜的遺傳多樣性和親緣關(guān)系情況。此外，本文還對(duì)紫菜的生殖特點(diǎn)首次進(jìn)行了分子遺傳學(xué)分析研究。紫菜的生殖方式表現(xiàn)出多樣性，不僅有典型的

3、有性生殖方式，還有無性生殖及一些其他的無配生殖方式，因此對(duì)紫菜生殖特點(diǎn)的研究可以探討紫菜的生殖特征與體細(xì)胞發(fā)育分化的途徑等紫菜重要生物學(xué)特點(diǎn)。本文利用ISSR(Inter-simplesequencerepeats)分子遺傳標(biāo)記對(duì)紫菜屬海藻進(jìn)行了遺傳學(xué)分析研究。研究?jī)?nèi)容包括兩部分：一是對(duì)我國4種常見紫菜的遺傳多樣性及其親緣關(guān)系的情況進(jìn)行了探討；二是利用分子遺傳標(biāo)記對(duì)紫菜的生殖特征進(jìn)行了遺傳學(xué)研究。 第一部分是對(duì)采自青島海區(qū)野生條

4、斑紫菜(Porphyrayezoensis)、華北半葉紫菜(P.katadaivar.hemiphylla)、少精紫菜(P.oligospermatangia)和浙江象山海區(qū)人工栽培的壇紫菜(P.haitanensis)的10～15cm葉狀體材料，采用ISSR分子標(biāo)記進(jìn)行分析。從100個(gè)ISSR引物中篩選出22個(gè)引物，擴(kuò)增出清晰、可重復(fù)的條帶共計(jì)247條，其中多態(tài)性條帶比例達(dá)95.5％。根據(jù)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行的聚類分析，顯示條斑紫菜和少精紫菜

5、的親緣關(guān)系最為接近，在聚類圖中二者首先聚在一起，接著與壇紫菜相聚，最后與華北半葉紫菜匯聚。同時(shí)本文還討論了紫菜屬種類的遺傳多樣性以及種間的特異性ISSR分子標(biāo)記。 內(nèi)容二是對(duì)采自江蘇連云港海區(qū)的條斑紫菜(P.yezoensis)和浙江象山海區(qū)的壇紫菜(P.haitanensis)人工栽培的單株葉狀體材料，及其生殖細(xì)胞和營養(yǎng)細(xì)胞組織塊分別經(jīng)有性生殖和無配生殖發(fā)育來的絲狀體S1、S2，利用ISSR標(biāo)記進(jìn)行遺傳學(xué)分析。在本文中，葉狀體