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1、目的:初步探討重癥急性胰腺炎(SAP)外周血中性粒細(xì)胞凋亡動(dòng)態(tài)變化及survivin在SAP中性粒細(xì)胞凋亡延遲調(diào)控中的作用。 方法:72只SD大鼠隨機(jī)分為2組:(1)SAP組,48只,SAP模型采用4%?;悄懰徕c(1ml/kg)胰膽管內(nèi)逆行注射后建立;(2)假手術(shù)(SO)組,24只,開(kāi)腹后僅翻動(dòng)胰腺,即關(guān)腹。各組分別于術(shù)后24h、48h和72h腹主動(dòng)脈抽血,隨即處死大鼠,留取胰腺組織用10%福爾馬林固定,用于光鏡組織病理學(xué)檢查;
2、留取血漿檢測(cè)血漿淀粉酶水平變化;分離中性粒細(xì)胞甩片固定;TUNEL熒光標(biāo)記法檢測(cè)外周血中性粒細(xì)胞凋亡;免疫組織化學(xué)檢測(cè)外周血中性粒細(xì)胞survivin蛋白表達(dá);RT-PCR檢測(cè)外周血中性粒細(xì)胞survivinmRNA表達(dá)。 結(jié)果:(1)SAP組血漿淀粉酶水平均較各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)SO組顯著升高(P<O.05);(2)SO組光鏡下胰腺組織無(wú)明顯變化,SAP組各時(shí)點(diǎn)胰腺組織病理評(píng)分均較各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)SO組顯著高(P<0.05);(3)SAP
3、組中性粒細(xì)胞凋亡率均較SO組明顯降低,且隨時(shí)間延長(zhǎng)更明顯(P<0.05);(4)SAP組中性粒細(xì)胞survivin蛋白和mRNA水平均較SO組明顯升高,隨時(shí)間延長(zhǎng)更明顯(P<0.05);(5)SAP組外周血中性粒細(xì)胞凋亡率與胰腺病理評(píng)分呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=-0.97(P<0.05)。(6)SAP組外周血中性粒細(xì)胞凋亡率與survivin蛋白和mRNA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別r=-0.97,及r=-0.99(P<0.05)。
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