子癇前期患者外周血中性粒細胞凋亡及其機制的研究.pdf

1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文子癇前期患者外周血中性粒細胞凋亡及其機制的研究姓名：黃艷君申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產科學指導教師：黃引平20050501溫州醫(yī)學院碩士學位論文子癇前期患者外周血中性粒細胞凋亡及其機制的研究摘要【目的】明確子癇前期患者和正常妊娠孕婦外周血中性粒細胞凋亡的狀況，及其外周血血清對中性粒細胞凋亡率及凋亡相關基因和蛋白的影響，以探討中性粒細胞凋亡在子痛前期發(fā)病機制中的作用，并為該疾病的防治提供新的策略?！痉椒ā?采集予癇前

2、期組(20例)、正常妊娠組(20例)孕婦外周血，分別分離中性粒細胞和血清。將中性粒細胞與自體血清在體外共同孵育24h。然后1)Hoechst染色后，熒光顯微鏡下觀察兩組孕婦外周血中性粒細胞凋亡的形態(tài)學變化。2)采用瓊脂糖凝膠電泳檢測兩組孕婦外周血中性粒細胞“梯形電泳圖譜”(DNAladder)的表現(xiàn)。3)應用流式細胞術(FCM)檢測兩組孕婦外周血中性粒細胞的凋亡率。2采集健康非孕婦女外周血，分離中性粒細胞，將其分別與子癇前期患者血清、正

3、常孕婦血清共同孵育24h。然后1)應用流式細胞術(FCM)檢測兩組孕婦外周血血清對正常人中性粒細胞凋亡率的影響。2)應用逆轉錄一聚合酶鏈反應法(RTPCR)檢測兩組孕婦血清對中性粒細胞Mcl1mRNA、BaxmRNA表達水平的影響。3)應用免疫印跡法(WesternBlotting)檢測兩組孕婦血清對中性粒細胞caspase3蛋白表達水平的影響。【結果l1Hoechst染色后，熒光顯微鏡下可見活細胞呈彌散均勻熒光；凋亡細胞形態(tài)呈碎片狀，