CD137及CD137L在喉癌組織中的表達及其與喉癌臨床因素及凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的：喉癌是典型的上皮來源的惡性腫瘤，當(dāng)喉黏膜上皮細胞發(fā)生惡變時，Langerhans細胞攝取腫瘤抗原，將腫瘤抗原提呈給T淋巴細胞，與T細胞結(jié)合后激活T細胞并分泌淋巴因子和趨化因子，從而引發(fā)抗腫瘤的免疫反應(yīng)。在此過程中，T細胞的活化是機體形成有力的腫瘤免疫的最關(guān)鍵的部分，需有雙重信號，即Ag/MHC分子復(fù)合物介導(dǎo)的特異性刺激及協(xié)同刺激分子提供的信號，如果缺乏協(xié)同刺激信號，則T細胞將進入無反應(yīng)狀態(tài)，甚至發(fā)生凋亡，機體則無法形成強有力的抵抗

2、腫瘤的免疫應(yīng)答，因此，協(xié)同刺激分子在腫瘤的免疫治療中起著不可或缺的重要作用。CD137/CD137L作為腫瘤壞死因子受體(TNFR)/腫瘤壞死因子(TNF)超家族中一員，是重要的協(xié)同刺激分子，CD137介導(dǎo)的協(xié)同刺激信號，可依賴或不依賴CD28發(fā)揮作用，調(diào)節(jié)T細胞、B細胞、單核細胞、NK細胞的活化、分化、增殖，提高免疫細胞的作用，阻止活化誘導(dǎo)的細胞凋亡，一定條件下有抗腫瘤的作用和加速移植排斥反應(yīng)。而CD137/CD137L在喉癌中的表達

3、卻未見報道，本研究采用免疫組織化學(xué)、流式細胞術(shù)的方法旨在探討CD137及CD137L在喉癌組織中的表達，以及CD137L在喉癌細胞凋亡中的作用。 方法：選擇2004年2月到2005年10月在白求恩國際和平醫(yī)院接受手術(shù)的喉鱗狀細胞癌患者的蠟塊標本50例，全喉切除患者經(jīng)病理證實正常喉組織9例，術(shù)前均未進行化學(xué)治療和放射治療。采用免疫組織化學(xué)方法染色(SP法)，檢測CD137、CD137L在50例喉鱗狀細胞癌、9例喉正常粘膜組織中的表

4、達情況并分析CD137L的表達與臨床分期，病理分級的關(guān)系。取新鮮喉癌組織30例提取腫瘤浸潤淋巴細胞，同時提取30例正常人外周血T淋巴細胞作對照，流式細胞術(shù)檢測腫瘤浸潤淋巴細胞CD137的表達情況，TUNEL的方法檢石蠟切片喉癌腫瘤細胞的凋亡情況，統(tǒng)計學(xué)分析與CD137L表達情況的關(guān)系。 結(jié)果：免疫組化SP法染色后可見正常喉黏膜CD137不表達，喉癌細胞上CD137亦不表達(平均陽性細胞所占比例≤5％判定為陰性)，腫瘤組織血管壁內(nèi)

5、皮細胞上可檢測到CD137的表達(13/13)；流式細胞術(shù)測定新鮮喉癌組織提取的腫瘤浸潤淋巴細胞CD137的平均表達率為(3.52±1.64)％(以正常人外周血作為對照)；CD137L表達在喉癌細胞的細胞膜和細胞漿，為淺黃至棕黃色顆粒。在50例喉鱗狀細胞癌中陽性表達率為100％。其中21例CD137L蛋白呈陽性+，陽性表達率為42％(21/50)；9例CD137L蛋白呈陽性++，陽性表達率為18％(9/50)，20例CD137L蛋白呈陽

6、性+++，陽性表達率為40％(20/50)，而9例正常喉粘膜組織中CD137L蛋白表達為陰性，與正常喉粘膜組比較，喉鱗狀細胞癌CD137L陽性表達顯著增高，在統(tǒng)計學(xué)上有非常顯著性差異(P＜0.01)。 用Wilcoxon兩樣本比較的秩和檢驗分析50例喉鱗狀細胞癌患者的臨床因素與CD137L表達之間的關(guān)系。結(jié)果顯示，CD137L表達與患者年齡(p=0.444)、性別(p=0.627)、腫瘤生長部位(p=0.267)無相關(guān)性。而與病

7、理分級(P=0.017)臨床分期(P=0.002)腫瘤T分期(P=0.002)有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.000)有關(guān)。 用TUNEL的方法檢測50例喉癌病理切片中5例可檢測到凋亡，用Spearman相關(guān)分析分析與CD137L的表達的關(guān)系，兩者無關(guān)(p=0.642，R=-0.067)，CD137L的表達與喉癌細胞的凋亡無關(guān)。 結(jié)論：1正常喉黏膜上CD137不表達，喉癌腫瘤細胞CD137亦不表達，腫瘤組織血管壁的內(nèi)皮細胞上可檢

8、測到CD137的表達，胞膜胞漿表達。 2流式細胞術(shù)檢測腫瘤浸潤淋巴細胞CD137的平均表達率(3.52±1.64)％，以正常人外周血(0.65±0.05)％作為對照，CD137表達增高，有統(tǒng)計學(xué)差異。 3CD137L在喉正常組織中不表達，而在喉癌細胞中表達，表達率為100％(50/50)。可能與腫瘤細胞的快速生長有關(guān)。 4CD137L的表達程度與腫瘤臨床特征、病理類型有關(guān)，隨腫瘤臨床進展和惡性度的增加，CD137