益氣養(yǎng)陰祛瘀方藥對IPF大鼠氧自由基水平的影響及機制研究.pdf

1、目的：本研究通過檢測博萊霉素(BLM)致特發(fā)性肺纖維化(IPF)大鼠模型血液及肺組織中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)等指標的變化，運用HE、MASSON染色以及SP免疫組織化學染色等技術手段，研究IPF時氧化損傷的特點以及肺組織病理形態(tài)學改變和誘導型一氧化氮合酶(indtlciblenitric oxidesynthase，iNOS)的表達特征，并以益氣養(yǎng)陰祛瘀中藥進行干預，研究氣陰

2、兩虛、脈絡瘀阻與IPF發(fā)病的相關性，探討益氣養(yǎng)陰祛瘀法對IPF的作用機理，為臨床治療提供新的思路和實驗依據(jù)。 方法：將120只Sprague Dawley(SD)大鼠(雌雄各半)置于實驗環(huán)境中適應性飼養(yǎng)1周后，隨機分為5組(每組24只)：①正常對照組(對照組，control group)；②IPF模型組(模型組，model group)；③益氣養(yǎng)陰祛瘀方低劑量組(低劑量組，low-dose．group)；④益氣養(yǎng)陰祛瘀方高劑量組

3、(高劑量組，high-dose group)；⑤強的松組(prednisone group)。 根據(jù)文獻方法，造模各組大鼠氣管內(nèi)滴注博萊霉素A，(BLMA5，5mg/kg，溶于0.2 ml無熱源生理鹽水)，復制IPF模型；對照組氣管內(nèi)滴注等量無熱源生理鹽水。手術后第2天始，給對照組與模型組大鼠灌服生理鹽水(10ml/kg)；給低劑量組和高劑量組大鼠灌服中藥水煎劑(12.3g/kg、24.6g/kg，相當于臨床成人用藥量的7倍和1

4、4倍)；給強的松組大鼠灌服強的松混懸液(6mg/kg)。各組動物于造模后第7d、14d、28d分3批斷頭處死。取血漿，并分離血清，取肺組織制成10％組織勻漿，5000r/min離心15 min，取上清液，-20℃凍存待檢。在肺門處結扎取右肺1 cm×1 cm×1 cm大小組織，用4％多聚甲醛固定、包埋、切片(5 μm)，行HE、MASSON及iNOS免疫組化染色，光學顯微鏡下觀察肺組織形態(tài)結構以及iNOS的表達情況。檢測血液和肺組織中M

5、DA、SOD、ET-1以及NO等指標變化。 結論： 1、IPF時機體MDA含量增加，SOD活力降低，表明機體氧化一抗氧化失衡是其發(fā)病的重要機制，自由基直接參與了IPF的形成過程。益氣養(yǎng)陰祛瘀方藥能有效降低MDA含量，增加SOD活力，從而影響IPF的形成過程。 2、IPF時大量產(chǎn)生的NO造成血管通透性增大，其結果加重了氣道的炎癥反應和組織損傷；而ET-1作為前纖維化因子在IPF狀態(tài)下的過量增加，加劇了組織損傷程度。益