血清抑制素B在鑒別梗阻性與非梗阻性無(wú)精子癥中的應(yīng)用價(jià)值.pdf

1、目前，臨床上還沒(méi)有鑒別OA和NOA敏感性和特異性都非常高的血清學(xué)標(biāo)志物。研究血清INHB的鑒別效果是當(dāng)務(wù)之急。INHB自被發(fā)現(xiàn)迄今己有七十余年。在己經(jīng)完成的INHB試驗(yàn)研究中，發(fā)現(xiàn)其預(yù)測(cè)精子發(fā)生狀態(tài)效果較好，是一個(gè)非常有臨床應(yīng)用前景的激素。1NHB研究的目的是預(yù)測(cè)翠丸內(nèi)精子發(fā)生的狀況，從而為男性不育癥的臨床診治提供依據(jù)。然而，抑制素B在國(guó)內(nèi)男性的正常參考值范圍以及在鑒別OA和NOA的應(yīng)用價(jià)值這兩個(gè)問(wèn)題一直沒(méi)有得到解決。由于血清INHB在

2、不同種族差異具有顯著性，因此國(guó)外的正常參考范圍以及鑒別OA和NOA的切點(diǎn)不能在國(guó)內(nèi)得以應(yīng)用。盡管國(guó)內(nèi)一些臨床研究給出了參考范圍，但是均由于標(biāo)本量不夠以及實(shí)驗(yàn)方法落后等原因而沒(méi)有被普遍采用。 FSH、精漿中性a-Glu在OA和NOA患者之間存在差異。近年來(lái)，國(guó)外越來(lái)越多的證據(jù)顯示，INHB比FSH更能夠預(yù)測(cè)精子的發(fā)生。通過(guò)研究比較血清INHB和FSH、精漿中性a-Glu在預(yù)測(cè)OA或者NOA的敏感性和特異性，可以闡明1NHB在鑒別OA和NO

3、A的應(yīng)用價(jià)值，從而為更科學(xué)的應(yīng)用INHB提供理論指導(dǎo)與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。目的:本研究通過(guò)測(cè)定血清抑制素B(INHB)并與卵泡刺激素(FSH)和精漿中性a-葡糖昔酶( a-Glu)等經(jīng)典指標(biāo)比較，評(píng)價(jià)INHB在鑒別診斷梗阻性(OA)和非梗阻性無(wú)精子癥困OA)中的應(yīng)用價(jià)值，并對(duì)攀丸精子發(fā)生障礙作出預(yù)判。方法健康生育男性組((n=60)，以翠丸活檢為金標(biāo)準(zhǔn)確定OA組(n=39)和NOA組((n=77)，留取血液和精液標(biāo)本，進(jìn)行精液常規(guī)分析，檢測(cè)血清I

4、NHB, FSH和精漿中性a-Glu的水平，采用受試者工作特征(ROC)曲線法，通過(guò)計(jì)算ROC曲線下面積，確定切點(diǎn)值并分析評(píng)價(jià)檢測(cè)指標(biāo)的敏感性和特異性。結(jié)果本實(shí)驗(yàn)室健康育齡男性血清INHB的95％參考值范圍為:20.37206.21 pg/ml。血清INHB, FSH、精漿中性a-Glu、血清INHBIFSH比值以及INHB+FSH聯(lián)合在OA組與NOA組之間均差別顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。其中血清INHB的曲線下面積最大，為

5、0.985，診斷價(jià)值最高，敏感性為97.4％，特異性為92.2％，切點(diǎn)值為49.89pg1ml。結(jié)論血清INHB L血清FSH、精漿中性a-Glu、血清INHB/F SH比值、或INHB+FSH聯(lián)合指標(biāo)在鑒別OA與NOA方面具有最佳的敏感性與特異性。Y染色體上的無(wú)精子癥因子(azoospermiafactor, AZF)基因位點(diǎn)的微缺失會(huì)導(dǎo)致非梗阻性無(wú)精子癥(non-obstructive azoospermia, NOA)的發(fā)生。因此

6、，NOA患者有必要進(jìn)行Y染色體微缺失檢測(cè)以明確病因。Y染色體微缺失可以通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。盡管一些研究通過(guò)單重或者多重PCR技術(shù)研究了不同男性人群Y染色體從2個(gè)到22個(gè)位點(diǎn)的微缺失，然而，檢測(cè)技術(shù)以及檢測(cè)位點(diǎn)一直是大家爭(zhēng)論的議題。己有研究發(fā)現(xiàn)NOA患者人群會(huì)發(fā)生Y染色體微缺失，缺失率從1％到55％各不相同。檢測(cè)結(jié)果差異產(chǎn)生的可能原因與以下因素有關(guān):(1)研究對(duì)象選擇標(biāo)準(zhǔn)不同;(2)檢測(cè)所用STSs標(biāo)記位點(diǎn)密度和位置不同;(3)檢測(cè)方

7、法不同;(4)群體遺傳背景和環(huán)境不同。目的:評(píng)價(jià)多重PCR和單重PCR檢測(cè)Y染色體微缺失的優(yōu)劣，檢測(cè)6個(gè)位點(diǎn)和15個(gè)位點(diǎn)的利弊，分析NOA患者Y染色體微缺失的患病率。通過(guò)研究患者是否有Y染色體微缺失的狀況，可以明確病因，從而為醫(yī)生臨床診療提供指導(dǎo)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將15個(gè)經(jīng)典微缺失位點(diǎn)分成6組，摸索各組進(jìn)行多重PCR的最佳反應(yīng)條件;摸索15個(gè)引物進(jìn)行單重PCR的反應(yīng)條件;繼而分別進(jìn)行NOA患者DNA的檢測(cè)，確定每位患者Y染色體微缺失的情

8、況。再運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行多重PCR和單重PCR的比較;以及比較經(jīng)典的巧個(gè)微缺失位點(diǎn)和傳統(tǒng)的6個(gè)微缺失位點(diǎn)的檢出率。結(jié)果:獲得各組進(jìn)行多重PCR的最佳反應(yīng)條件。73名患者經(jīng)傳統(tǒng)的6個(gè)微缺失位點(diǎn)的檢測(cè)和巧個(gè)微缺失位點(diǎn)的檢測(cè)發(fā)現(xiàn):兩者在微缺失人數(shù)和位點(diǎn)缺失數(shù)目上的比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x L=5.06 P<0.05和x=15.06, P<0.0)。單重PCR和多重PCR的檢測(cè)率進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，微缺失人數(shù)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x==2.25, P>0

9、.05)，位點(diǎn)數(shù)目的差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性(x r=22.04, P<0.05)。在12名NOA且存在Y染色體微缺失的患者中，有1,2,3,6名患者分別缺失4,3,2,1個(gè)位點(diǎn)。結(jié)論:通過(guò)檢測(cè)15個(gè)微缺失位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)NOA患者中Y染色體微缺失的發(fā)生率為16.44％015個(gè)位點(diǎn)的Y染色體微缺失檢測(cè)比6個(gè)位點(diǎn)的檢測(cè)更有臨床意義和價(jià)值。Y染色體微缺失的多重PCR檢測(cè)會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果，需要單重PCR進(jìn)行確認(rèn)。研究還發(fā)現(xiàn)AZFb十c的缺失對(duì)生精功能