2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文敗血癥及臨床常見細(xì)菌16S23SrRNA基因區(qū)間的分子生物學(xué)研究姓名:傅君芳申請學(xué)位級別:博士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:洪文瀾2000.5.1不能通過水煮裂解而擴(kuò)增。Chelex100裂解法能一步裂解所研究的菌種,擴(kuò)增條帶清晰,明亮,方法簡便陜速,污染機(jī)會少經(jīng)典的酚氯仿抽提細(xì)菌DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,需將DNA在不同的管之間轉(zhuǎn)移,步驟繁瑣,增加污染機(jī)會最終確立Chelex100裂解法為奉課題研究的細(xì)茵裂解方法。經(jīng)PCR擴(kuò)增

2、后,i3個菌種呈單一條帶,其中5種菌:產(chǎn)單核李斯特氏茵、腦膜炎敗血黃桿菌、嗜水氣單胞茵、陰溝腸桿菌、類白喉棒狀桿菌能立刻區(qū)分,2種分枝桿菌具有與其它細(xì)菌不同的特異性條帶(i800bp),還有6種菌不能區(qū)分;8個菌種呈兩條帶,其中3種茵:肺炎鏈球菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌、福氏志賀氏茵能立刻區(qū)分。但嚆氏志賀氏茵與其它呈兩條帶的5種菌條帶相近,故在第二部分中亦對它們做了RFLP分析:呈三條帶的三種菌:糞腸球菌、洋蔥假單胞菌、枯草芽孢桿菌以及呈

3、多條帶的7種菌:B一溶血鏈球菌(4條帶)、大腸埃希氏菌(4條帶)、支氣管敗血鮑特氏菌(4條帶)、醋酸鈣不動桿菌(5條帶),傷寒沙門氏菌(5條帶)、惡臭假單胞菌(5條帶)、痢疾志賀氏茵(7條帶),它們的條帶分子量不同,互相之間能區(qū)分。從臨床分離的肺炎克雷伯氏菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌等常見菌株共j5株,均呈現(xiàn)b標(biāo)準(zhǔn)菌株相同的DNA圖譜,表明這些條帶具有很好的重復(fù)性二葡萄球菌屬中11個不同菌種的16S23SrRNAf基因區(qū)間的研究\萄萄

4、球菌是引起兒童敗血癥的首位致病原,文獻(xiàn)報道葡萄球菌尤以金黃色葡萄球菌具有不同的rRNA基因區(qū)間PCR圖譜,且在葡萄球菌裂解i童程中,我們發(fā)現(xiàn)用水煮法及Chlexloo法均不能擴(kuò)增葡萄球菌,因此為了研制簡便有效的裂解葡萄球菌的方法及詳細(xì)了解葡萄球菌屬細(xì)菌的165—23SrRNA基因區(qū)問的PeR圖譜,我們對葡萄球菌屬中ii個不同菌種的75株細(xì)菌進(jìn)行了研究。結(jié)果Chelexl00裂解法經(jīng)改良后,即5%Chelex緩沖液(舍003%SDS,1%

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