化療藥物殺傷原代胃癌細(xì)胞效應(yīng)與hTERT mRNA及Bcl—2表達(dá)關(guān)系的研究.pdf

1、目的： 研究化療藥物對(duì)原代胃癌細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng)，并觀察其效應(yīng)與胃癌組織中端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA（human telomerase reverse transcriptase hTERT mRNA）和凋亡抑制基因Bc1-2蛋白表達(dá)的關(guān)系。 方法： 取手術(shù)切除的新鮮胃癌組織標(biāo)本，在無(wú)菌條件下，自漿膜面切開腫瘤，從腫瘤生長(zhǎng)活躍、無(wú)壞死變性的部位取材，制備含活細(xì)胞濃度（3～5）×10<'5>／ml的單細(xì)胞懸液，并分別加入血漿峰值藥物濃

2、度的紫杉醇（Tax）、順鉑（DDP）、阿霉素（ADM）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、絲裂霉素（MMC）培養(yǎng)48小時(shí)。用臺(tái)盼藍(lán)染色法和MTT法檢測(cè)經(jīng)上述藥物作用后腫瘤細(xì)胞活力及代謝活性的變化。取胃癌組織制成石蠟切片，用原位雜交技術(shù)檢測(cè)hTERT mRNA的表達(dá)；用免疫組化檢測(cè)Bc１-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： 68例胃癌標(biāo)本經(jīng)MTI比色法藥敏實(shí)驗(yàn)成功者60例。經(jīng)化療藥物作用后，體外培養(yǎng)的胃癌原代培養(yǎng)細(xì)胞呈現(xiàn)不同程度形態(tài)和代謝活動(dòng)的變化

3、。MTT結(jié)果顯示，不同個(gè)體的腫瘤細(xì)胞對(duì)不同化療藥物的敏感性不同，所測(cè)藥物對(duì)胃癌細(xì)胞的平均抑制率從高到低依次為：Tax［（40.6％±6.9）］、CDDP［（38.4％±7.8）］、5-FU［（38.9％±9.2）］、ADM［（31.6％±8.5）］、MMC［（28.9％±9.8）］。Tax、CDDP及5-FU的平均抑制率明顯高于ADM及MMC（P<0.05）。化療藥物對(duì)原代胃癌細(xì)胞的殺傷效應(yīng)與胃癌的組織病理學(xué)類型及分化程度相關(guān)性有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義，而與胃癌的TNM分期及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本組60例胃癌組織中hTERT mRNA與Bcl-2的陽(yáng)性表達(dá)率分別為90％（54／60）和80％（48／60），前者陽(yáng)性表達(dá)者對(duì)5-FU及ADM顯示了較強(qiáng)的體外耐藥性，而后者陽(yáng)性表達(dá)者對(duì)5-FU、ADM及MMC顯示了較強(qiáng)的體外耐藥性。hTERT mRNA的表達(dá)與Bc1-2蛋白的表達(dá)的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。hTERT mRNA陽(yáng)性表達(dá)與胃癌的分

5、化程度的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但與胃癌的TNM分期，胃癌的組織病理學(xué)類型及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）：hTERTmRNA染色強(qiáng)度與胃癌的組織學(xué)類型，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及TNM分期無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與胃癌的分化程度有關(guān)，低分化與高中分化胃癌的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Bc1-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)與胃癌的分化程度及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），但與胃癌的TNM分期及胃癌的組織病理學(xué)類型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.