靶向瘦素基因的siRNA對肝星狀細(xì)胞生物學(xué)活性影響的實驗研究.pdf

1、第一部分 瘦素在肝纖維化組織中的表達(dá)研究 目的：探討瘦素在肝纖維化發(fā)生、發(fā)展中的表達(dá)及臨床意義。 結(jié)論：瘦素的異常表達(dá)與肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，提示瘦素參與了肝纖維化的病理過程。 第二部分 靶向瘦素基因的siRNAs真核表達(dá)質(zhì)粒篩選平臺的建立 目的：構(gòu)建具有特異性瘦素(leptin)基因siRNA功能的表達(dá)載體，篩選有效的靶向瘦素基因的siRNA真核表達(dá)質(zhì)粒。 結(jié)論：本研究構(gòu)建的

2、leptinsiRNAs表達(dá)載體中siRNA278、siRNA108、siRNA97和siRNA454有較強的抑制HSC的黏附力。 第三部分 靶向瘦素基因的siRNAs對肝星狀細(xì)胞生物學(xué)活性的影響 目的：研究靶向leptin基因的siRNAs在大鼠肝星狀細(xì)胞中l(wèi)eptin表達(dá)情況及對HSC生物學(xué)特性的影響。 結(jié)論：靶向leptin基因的siRNAs通過抑制靶基因及下游基因的表達(dá)逆轉(zhuǎn)活化型HSC的生物學(xué)特征

3、，因此為肝纖維化的基因治療提供一種新的方法。 第四部分 靶向leptin的siRNAs對瘦素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制等的影響 目的：檢測靶向leptin的siRNAs對信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白p-STAT3和細(xì)胞因子TGFβ1的影響，初步探討siRNAs對leptin的信號傳導(dǎo)機制等的影響。 結(jié)論：p-STAT3、TGFβ1參與了leptin在肝纖維化中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)；siRNAs抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對于肝纖維化的治療有一定的前景。

4、 第五部分 siRNA聯(lián)合α-干擾素抗肝纖維化的實驗研究 目的：實驗研究表明siRNA對肝星狀細(xì)胞有抑制作用。本實驗擬進一步研究α-干擾素(alpha-interferon，α-IFN)與靶向leptin的siRNA97單獨及聯(lián)合作用對肝星狀細(xì)胞體外活性的影響。 結(jié)論：siRNA97聯(lián)合α-IFN的體外抗纖維化作用比單獨應(yīng)用α-IFN和siRNA97效果好。 第六部分 奧曲肽對大鼠肝星狀細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)