生殖道解脲脲原體感染狀況及其分群價值的研究.pdf

1、[目的]
　　 近年來很多婦科和泌尿外科醫(yī)生將解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,Uu)做為下生殖道感染的必查項目,并且只要是檢測結果陽性就給與大量抗生素進行治療,結果Uu反復出現(xiàn)陽性,稱為“解脲脲原體耐藥”。醫(yī)院常規(guī)Uu的檢測方法有液體培養(yǎng)法、固體培養(yǎng)法、PCR法,這三種方法各有優(yōu)劣,但共同的特點是檢測出陽性的Uu多數(shù)是正常攜帶,無臨床意義。因此如何區(qū)分感染者和正常攜帶者,這是臨床急于解決的問題。有研究表

2、明進一步的分型分群是解決問題的關鍵。本試驗比較了各種情況下Uu培養(yǎng)的陽性率,并將陽性標本進行分群,試圖找出其中的聯(lián)系,為其防治和進一步深入研究打下基礎。
　　 [方法]
　　 1研究對象
　　 收集深圳市龍華醫(yī)院2008年1月至2008年12月在門診泌尿外科、婦科、皮膚性病科就診,擬診為非淋菌性尿道炎、陰道炎患者樣本1028例(男性397例,女性631例),全部病例詳細登記病史。另選取同期體檢的無癥狀人群307例

3、(男性109例,女性198例)作為對照組。
　　 2液體培養(yǎng)
　　 女性為棉拭子取樣法采集宮頸管分泌物標本;男性為棉拭子取樣法采集尿道口分泌物。將標本直接接種于Uu液體選擇性培養(yǎng)基進行初篩試驗。
　　 3細菌培養(yǎng)
　　 所有Uu液體培養(yǎng)陽性的標本無論是否渾濁,都轉種血平板進行細菌培養(yǎng),排除由干擾菌引起的假陽性。
　　 4固體培養(yǎng)
　　 所有Uu液體培養(yǎng)陽性的標本都轉種固體培養(yǎng),確定液體培養(yǎng)

4、的可信度。將確定為陽性的標本放入-20℃保存待用。
　　 5解脲脲原體基因型引物設計并合成。
　　 6將Uu陽性標本提取裂解產(chǎn)物制備DNA模板。
　　 7基因擴增并分群。
　　 8應用CEQ8800測序儀對隨機抽取的陽性的PCR產(chǎn)物進行雙向DNA測序。
　　 9采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析。
　　 [結果]
　　 1 Uu液體培養(yǎng)的結果:病例組檢出陽性384(37.

5、35％)例;對照組檢出陽性97例(31.60%)。
　　 2 Uu固體培養(yǎng)的結果:病例組檢出陽性371例(36.09%),其中男性120例,女性251例。對照組檢出陽性93例(30.29%),其中男性25例,女性68例。Uu液體培養(yǎng)與固體培養(yǎng)的陽性率無統(tǒng)計學差異(x2=0.473,P=0.491);病例組與對照組(總體、男性、女性分別比較)的陽性率均無統(tǒng)計學差異(總體,χ2=3.503,P=0.061;男性,χ2=2.224,P

6、=0.136;女性,χ2=1.880,P=0.170);不同性別之間Uu陽性率性有統(tǒng)計學差異(χ2=13.373,P=0.000);病例組女性,按不同妊娠次數(shù)比較,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=14.319,P=0.006),根據(jù)趨勢χ2檢驗(Cochran Armitage trend test)(χ2=13.53,P=0.0002)的結果,得出病例組Uu檢出的陽性率隨妊娠次數(shù)的增加而增加。
　　 3細菌培養(yǎng)的結果:病例組培養(yǎng)出54

7、株細菌,對照組培養(yǎng)出14株細菌。共有17例標本液體培養(yǎng)與固體培養(yǎng)結果不一致。引起液體培養(yǎng)假陽性的污染菌的陽性率在病例組與對照組無統(tǒng)計學差異(χ2=0.015,P=0.903)。
　　 4 Uu分群結果:對固體培養(yǎng)陽性的標本464例(病例組371例,對照組93例)進行分群。464例標本用通用引物測試都是陽性。用特異性的引物進行分群,檢出生物群349例(其中病例組280例,對照組69例)未檢出生物群115例,總檢出率75.22%。病

8、例組對照組分群檢出率的差異沒有統(tǒng)計學意義(χ2=0.065,P=0.799)。病例組生物一群檢出181例(64.64%),生物二群檢出76例(27.14%),混合感染23例(8.21%);對照組生物一群檢出54例(78.26%),生物二群檢出9例(13.04%),混合感染6例(8.70%)病例組對照組分群結果的差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.059,P=0.048)。
　　 5陽性標本的DNA測序:隨機選取的10份檢測陽性標本的測序

9、結果均為相對應的群。
　　 [結論]
　　 1 Uu的液體培養(yǎng)可以替代“金標準”固體培養(yǎng)。
　　 2引起液體培養(yǎng)“假陽性”的污染菌多為白色念珠菌和凝固酶陰性的葡萄球菌。
　　 3在健康人的泌尿生殖道可存在無癥狀的Uu攜帶狀態(tài),Uu的陽性率病例組和對照組無統(tǒng)計學差異。男女由于泌尿生殖道生理構造不同,女性Uu的陽性率明顯高于男性。病例組妊娠次數(shù)越多,Uu的陽性率就越高。
　　 4 Uu以生物一群感染常