生殖道解脲脲原體感染狀況及其分群價(jià)值的研究.pdf

1、[目的]
　　 近年來(lái)很多婦科和泌尿外科醫(yī)生將解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,Uu)做為下生殖道感染的必查項(xiàng)目,并且只要是檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性就給與大量抗生素進(jìn)行治療,結(jié)果Uu反復(fù)出現(xiàn)陽(yáng)性,稱(chēng)為“解脲脲原體耐藥”。醫(yī)院常規(guī)Uu的檢測(cè)方法有液體培養(yǎng)法、固體培養(yǎng)法、PCR法,這三種方法各有優(yōu)劣,但共同的特點(diǎn)是檢測(cè)出陽(yáng)性的Uu多數(shù)是正常攜帶,無(wú)臨床意義。因此如何區(qū)分感染者和正常攜帶者,這是臨床急于解決的問(wèn)題。有研究表

2、明進(jìn)一步的分型分群是解決問(wèn)題的關(guān)鍵。本試驗(yàn)比較了各種情況下Uu培養(yǎng)的陽(yáng)性率,并將陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行分群,試圖找出其中的聯(lián)系,為其防治和進(jìn)一步深入研究打下基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 1研究對(duì)象
　　 收集深圳市龍華醫(yī)院2008年1月至2008年12月在門(mén)診泌尿外科、婦科、皮膚性病科就診,擬診為非淋菌性尿道炎、陰道炎患者樣本1028例(男性397例,女性631例),全部病例詳細(xì)登記病史。另選取同期體檢的無(wú)癥狀人群307例

3、(男性109例,女性198例)作為對(duì)照組。
　　 2液體培養(yǎng)
　　 女性為棉拭子取樣法采集宮頸管分泌物標(biāo)本;男性為棉拭子取樣法采集尿道口分泌物。將標(biāo)本直接接種于Uu液體選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行初篩試驗(yàn)。
　　 3細(xì)菌培養(yǎng)
　　 所有Uu液體培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)本無(wú)論是否渾濁,都轉(zhuǎn)種血平板進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),排除由干擾菌引起的假陽(yáng)性。
　　 4固體培養(yǎng)
　　 所有Uu液體培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)本都轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng),確定液體培養(yǎng)

4、的可信度。將確定為陽(yáng)性的標(biāo)本放入-20℃保存待用。
　　 5解脲脲原體基因型引物設(shè)計(jì)并合成。
　　 6將Uu陽(yáng)性標(biāo)本提取裂解產(chǎn)物制備DNA模板。
　　 7基因擴(kuò)增并分群。
　　 8應(yīng)用CEQ8800測(cè)序儀對(duì)隨機(jī)抽取的陽(yáng)性的PCR產(chǎn)物進(jìn)行雙向DNA測(cè)序。
　　 9采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 [結(jié)果]
　　 1 Uu液體培養(yǎng)的結(jié)果:病例組檢出陽(yáng)性384(37.

5、35％)例;對(duì)照組檢出陽(yáng)性97例(31.60%)。
　　 2 Uu固體培養(yǎng)的結(jié)果:病例組檢出陽(yáng)性371例(36.09%),其中男性120例,女性251例。對(duì)照組檢出陽(yáng)性93例(30.29%),其中男性25例,女性68例。Uu液體培養(yǎng)與固體培養(yǎng)的陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=0.473,P=0.491);病例組與對(duì)照組(總體、男性、女性分別比較)的陽(yáng)性率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(總體,χ2=3.503,P=0.061;男性,χ2=2.224,P

6、=0.136;女性,χ2=1.880,P=0.170);不同性別之間Uu陽(yáng)性率性有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=13.373,P=0.000);病例組女性,按不同妊娠次數(shù)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.319,P=0.006),根據(jù)趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)(Cochran Armitage trend test)(χ2=13.53,P=0.0002)的結(jié)果,得出病例組Uu檢出的陽(yáng)性率隨妊娠次數(shù)的增加而增加。
　　 3細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果:病例組培養(yǎng)出54

7、株細(xì)菌,對(duì)照組培養(yǎng)出14株細(xì)菌。共有17例標(biāo)本液體培養(yǎng)與固體培養(yǎng)結(jié)果不一致。引起液體培養(yǎng)假陽(yáng)性的污染菌的陽(yáng)性率在病例組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.015,P=0.903)。
　　 4 Uu分群結(jié)果:對(duì)固體培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)本464例(病例組371例,對(duì)照組93例)進(jìn)行分群。464例標(biāo)本用通用引物測(cè)試都是陽(yáng)性。用特異性的引物進(jìn)行分群,檢出生物群349例(其中病例組280例,對(duì)照組69例)未檢出生物群115例,總檢出率75.22%。病

8、例組對(duì)照組分群檢出率的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.065,P=0.799)。病例組生物一群檢出181例(64.64%),生物二群檢出76例(27.14%),混合感染23例(8.21%);對(duì)照組生物一群檢出54例(78.26%),生物二群檢出9例(13.04%),混合感染6例(8.70%)病例組對(duì)照組分群結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.059,P=0.048)。
　　 5陽(yáng)性標(biāo)本的DNA測(cè)序:隨機(jī)選取的10份檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本的測(cè)序

9、結(jié)果均為相對(duì)應(yīng)的群。
　　 [結(jié)論]
　　 1 Uu的液體培養(yǎng)可以替代“金標(biāo)準(zhǔn)”固體培養(yǎng)。
　　 2引起液體培養(yǎng)“假陽(yáng)性”的污染菌多為白色念珠菌和凝固酶陰性的葡萄球菌。
　　 3在健康人的泌尿生殖道可存在無(wú)癥狀的Uu攜帶狀態(tài),Uu的陽(yáng)性率病例組和對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。男女由于泌尿生殖道生理構(gòu)造不同,女性Uu的陽(yáng)性率明顯高于男性。病例組妊娠次數(shù)越多,Uu的陽(yáng)性率就越高。
　　 4 Uu以生物一群感染常