二甲基甲酰胺急性中毒毒性及解毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過給小鼠、兔灌胃(ig)建立二甲基甲酰胺(DMF)急性中毒動(dòng)物模型，觀察小鼠、兔子急性中毒的行為及病理改變，小鼠體重變化，測定小鼠經(jīng)口LD50，觀察DMF對肝功能、氧化酶、抗氧化酶的影響，四種巰基化合物對DMF急性中毒小鼠的解毒作用。 方法： 1．20只小鼠分為4組，每組5只，18只兔分為2組，每組9只，分別給予ig不同劑量DMF，觀察其急性中毒的行為表現(xiàn)、存活時(shí)間、主要臟器的病理改變；30只小鼠分為3組，每組1

2、0只，觀察每日ig1．5g／kgDMF和3g／kgDMF連續(xù)14天的體重變化；測定小鼠經(jīng)口LD50。 2．80只小鼠分2組，每組40只，分別給予單次ig3g／kgDMF和每日ig1．5g／kgDMF連續(xù)3天，ig后24h、48h、72h、96h取血，檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)。 3．48只小鼠分為6組，每組8只，于ig3g/kgDMF后6h、12h、24h、48h、72h取血及肝左葉，檢測

3、血漿及肝勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、黃嘌呤氧化酶(XOD)活力。 4．64只小鼠分為正常組、急性中毒組、Na-DMPS治療組、Na-DMPS對照組，每組16只，急性中毒組ig3g／kgDMF染毒，Na-DMPS治療組ig3g／kgDMF染毒，并于ig前15min及ig后3hip(腹腔注射)二巰丙磺鈉(Na-DMPS)各1次，對照組僅ipNa-DMPS，同治療組。小鼠分兩批分別于染毒后6h取血檢測SOD活

4、力、72h取血檢測XOD活力。 5．80只小鼠分為正常組、急性中毒組及4個(gè)巰基化合物治療組、4個(gè)巰基化合物對照組共10組，每組8只；急性中毒組ig3g／kgDMF染毒，巰基化合物治療組予ig3g／kgDMF染毒，于ig前15min及ig后3h、12h分別ipNa-DMPS、谷胱甘肽(GSH)、N一乙酰半胱氨酸(NAC)和二巰丁二酸(DMSA)各1次，巰基化合物對照組僅ip相應(yīng)的巰基化合，同治療組。染毒后24h取肝左葉做勻漿檢測S

5、OD、XOD活力。 6．40只小鼠分為正常組、急性中毒組、Na-DMPS治療組、Na-DMPS對照組，每組10只，染毒劑量及治療開始時(shí)間同上，ig(qd)及ip(q8h)連續(xù)3天，末次ig后24h取肝左葉做勻漿測SOD活力。 結(jié)果： 1．小鼠及兔DMF急性中毒的主要行為表現(xiàn)有行動(dòng)遲緩、行走不穩(wěn)、毛紊亂、發(fā)紺、易興奮、呼吸急促、四肢抽搐，8～12g／kgDMF染毒的小鼠于1h～4d全部死亡，7／18只兔于DMF染毒

6、后1～3天死亡。小鼠和兔急性中毒病理見胃腸散在小充血灶，腹腔內(nèi)少許淡黃色或淡血性腹水，肝細(xì)胞局灶壞死，炎癥細(xì)胞浸潤，肝血竇擴(kuò)張、淤血，線粒體水腫、嵴減少，肝細(xì)胞內(nèi)膽汁淤積，腎小管上皮細(xì)胞水腫，局部腎小管細(xì)胞核固縮、碎裂，胞漿內(nèi)板層小體形成，近曲小管微絨毛細(xì)絲樣改變，線粒體可見電子致密物。小鼠予以兩個(gè)不同劑量DMF連續(xù)ig，第5、7、M天與正常組小鼠相比，體重明顯下降(P＜O．01)；3g／kgDMF組小鼠第7天體重與染毒前比較明顯下降(

7、P＜O．01)，第14天體重恢復(fù)至染毒前。小鼠DMF經(jīng)口LD50為6．019g／kg。 2．小鼠單次ig3g／kgDMF24～48h后血ALT、AST升高(P＜O．01)，96h降至正常。小鼠每日ig1．5g／kgDMF連續(xù)3天，血漿ALT、AST于末次ig后24h升高(P<0．01)，72～96h降至正常。 3．小鼠ig3g／kgDMF后6h血SOD活力下降(P＜O．01)，24h升至正常，ig后72h血XOD活力升高

8、(P＜0．05)，ig后24h肝組織SOD、CAT、XOD活力升高(P＜0．01)，48h降至正常。 4．小鼠ig3g／kgDMF同時(shí)予Na-DMPS治療的實(shí)驗(yàn)中，ig后6h治療組與急性中毒組血SOD活力比較無顯著性差異(P＞0．05)，ig后72h治療組與急性中毒組血XOD活力比較亦無顯著性差異(P＞0．05)。 5．小鼠Na-DMPS、NAC、DMSA治療組肝組織SOD、XOD活力比急性中毒組低(P＜0．01)。GS

9、H治療組肝組織XOD活力比急性中毒組低(P＜0．01)，而兩組肝組織：gOD活力無顯著性差異(P＞O．05)。Na—DMP$、NAC、DMSA治療組間肝組織SOD活力無顯著性差異(P＞0．05)。4個(gè)巰基化合物治療組肝組織XOD活力比較無顯著性差異(P＞0．05)。 6．小鼠每日ig1．5g／kgDMF連續(xù)3天后，急性中毒組肝組織SOD活力比正常組高(P＜0．01)，Na-DMPS治療組肝組織SOD活力比急性中毒組低(P＜0．0

10、5)。 結(jié)論：DMF是一種低毒毒物，經(jīng)口急性中毒表現(xiàn)多樣，可導(dǎo)致體重下降，DMF染毒劑量越大，中毒潛伏期越短，生存時(shí)間越短，主要損害臟器為肝腎。DMF急性中毒后，血SOD下降，血ALT、AST、XOD及肝組織SOD、CAT、XOD上升，ALT、AST、XOD可作為DMF急性中毒損傷的標(biāo)志。血SOD下降及肝組織XOD上升可能是DMF中毒損傷的結(jié)果，肝SOD、CAT上升可能是一種代償性改變，是機(jī)體對DMF中毒損傷的保護(hù)反應(yīng)。DMF急