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文檔簡介
1、目的: 觀察急性肝衰竭大鼠肝臟Bad、Bax蛋白的表達及烏司他丁(UTI)對其影響,探討UTI防治急性肝衰竭的作用機制。 方法: 1.健康雄性SD大鼠186只:正常對照組6只,模型組75只,治療組75只,模型組和治療組再各留15只大鼠觀察造模后大鼠每天的生存情況。模型組和治療組造模后6、12、24、36和48h按隨機數(shù)字表分別隨機取6只處死,留取標本用于觀察和檢測各項指標。 2.模型組和治療組均以D-氨基
2、半乳糖(D-Gal)800mg/kg聯(lián)合內毒素(LPS)40μg/kg腹腔內注射誘導大鼠急性肝衰竭模型,正常組予以生理鹽水腹腔注射;治療組在造模結束后立即按1×105U/kg腹腔注射UTI,其余兩組腹腔注射同等量生理鹽水。 3.觀察各組大鼠24h存活率。取肝組織,采用蘇木素-伊紅(HE)染色,光鏡下觀察肝組織損傷情況,采用免疫組織化學方法檢測不同時間點肝組織中Bad、Bax蛋白的表達。同時測定各時間點血清丙氨酸轉氨酶(ALT)、
3、天冬氨酸轉氨酶(AST)、總膽紅素(TB)、TNF-α及肝組織丙二醛(MDA)變化。 結果: 1.D-Gal800mg/kg聯(lián)合LPS40μg/kg腹腔注射成功構建了大鼠急性肝衰竭模型:24h存活率為40%;血清TNF-α于6h表現(xiàn)為最高,12h開始下降,36h已降為正常;TB于6h開始升高,36h達到峰值;各時間點血清丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、及肝組織丙二醛(MDA)含量和Bad、Bax蛋白的表
4、達均較正常組明顯增高,并于24h達到高峰(P<0.01);病理學可見肝組織結構紊亂,大量肝細胞腫脹變性,并有不同程度的肝細胞壞死。 2.治療組與對照組各指標比較: ①治療組大鼠24h存活率明顯高于對照組,66.7% VS40%,P<0.05。 ②TNF-α在UTI治療6h開始即有明顯下降(P<0.01);12h開始各時間點血清ALT、AST水平及肝臟MDA含量均低于模型組(P<0.01),且肝臟Bad、Bax蛋白
5、的表達量均少于模型組(P<0.05)。UTI治療后6h、12h血清TB無顯著變化(P>0.01),24h開始各時間點較模型組均有明顯降低(P<0.01或P<0.05)。 結論: 1.D-Gal800mg/kg聯(lián)合LPS40μg/kg腹腔注射成功構建了大鼠急性肝衰竭模型;其可能機制為通過誘導肝組織脂質過氧化及TNF-α的表達增加從而上調凋亡相關蛋白Bad、Bax的表達而導致急性肝衰竭。 2.UTI對大鼠急性肝衰竭有
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